Реферат: Стафилококки. Выявление резистентности к метициллину и другим b-лактамным антибиотикам методом скрининга - текст реферата. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Реферат

Стафилококки. Выявление резистентности к метициллину и другим b-лактамным антибиотикам методом скрининга

Банк рефератов / Медицина и здоровье

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Реферат
Язык реферата: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Архив Zip, 20 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникального реферата

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Кафедра клинической фармакологии и антимикробной химиотерапии Смолен ской госу дарственной медицинской академии Контактный адрес : Дехнич Андрей Владимирович 214019, Смоленск , а /я 5, Факс : (0812)61-12-94 andrei@microbiology.ru УДК 615.33.015.8.07 Выявление резистентности к метици ллину и другим b-лактамным антибиотикам мет одом скрининга С момента появления в 70-х годах метициллинорезистентные стафилококки и прежде всего метициллинорезисте нтные штаммы Staphylococcus aureus (MRSA) являются одними из ведущ их возбудителей нозокомиальных инфекций . Частота MRSA в структуре стафи лококковых инфекций в последние годы резко возросла во все м мире , например , в США с 2% в 1975 г . до 35% в 1996 г . Резистентность стафилококков к оксациллину (метициллину ) может быть обусловлена тремя о сновными механизмами : q продукцией дополнительного пен ициллинсвязывающего белка (ПСБ ) – ПСБ -2а (фермента , участвующего в синтезе клеточной стенки ), кодируемого хромосомальным геном mecА – классическая , или истинная резистентность к метициллину (оксациллину ); q инактивацию вследствие гиперпродукции бета лактам аз ; q модификацию нормальных ПСБ . С клинической точки зрения , важно дифф еренцировать штаммы с классической (mecА-обусловленн ой ) резистентностью от штаммов с двумя дру гими редковстречающимися механизмами резистентности , обусловливающими низкий или пограни чный уровень устойчивости . Это связано с тем , что при инфекциях , вызванных штаммами с mecA-обусловленной резистентностью , терапия бета-лакт амными антибиотиками (пенициллинами , цефалоспоринами , карбапенемами ) будет неэффективна. Кроме того , эти штаммы часто быв ают резистентны практически ко всем другим классам антибиотиков за исключением гликопепти дов (ванкомицин , тейкопланин ). Фенотипические харак теристики , которые могут помочь дифференцировать три перечисленных механизма резистентности , изложены в таблице. ТИПЫ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К МЕТИЦИЛЛ ИНУ (ОКСАЦИЛЛИНУ ) У СТАФИЛОКОККОВ Штаммы с классическим типом рези стентности могут в свою очередь быть гомо - или гетерогенными по типу экспрессии уст ойчивости . При гомогенном типе экспрессии пра ктически все микробные клетки проявляют резистентность в стандартных in vitro тестах , в то время как при гетерогенном типе только небольшая часть клеток проявляет резистентност ь фенотипически . Нередко только 1 из 10 – 100 мл н клеток в популяции с наличием гена mecА экспрессирует резисте н тность , что обусловливает получение пограничных результатов при определении чувствительности к оксацилли ну (МПК – 2 – 8 мг /л ). Резистентность , обу словленная гиперпродукцией b-лактамаз и мутацией нормальных ПСБ , также приводит к получению пограничных значени й МПК . Однако резистентность к оксациллину , обусловленная гип ерпродукцией b-лактамаз , легко отличается от кл ассической резистентности по ее обратимости п ри использовании ингибиторов b-лактамаз. В отличие от штаммов с кла ссической резистентностью гиперпродуц енты b-ла ктамаз и штаммы с мутациями нормальных ПС Б обычно не имеют множественной резистентност и к другим антибиотикам. Наличие классической резистентности наиболее легко определить методом скрининга , так к ак рост микробных клеток с неклассическими типами резистентности обычно ингибируются . Для определения чувствительности используетс я оксациллин ввиду его более высокой стаб ильности при хранении по сравнению с мети циллином. ПРИНЦИП Для идентификации резистентности к оксаци ллину (метициллину ) у стафилококк ов необхо димо соблюдение следующих условий : q добавление 4% NaCl в агар с оксациллином (pH 7,2 – 7,4, так как при более низком pH увеличивается число ложноотрицател ьных результатов ); q температ ура инкубации 35 o С ; q длительность инкубации 24 ч для S.aureus и 48 ч – для коагулазоо трицательных стафилококков ; q стандартизированное чис ло микроорганизмов. МИКРООРГАНИЗМ Чистая культура Staphylococcus spp., инкубированн ая в течение 18 – 24 ч на кровяном агаре. МАТЕРИАЛЫ 1. Агар Мюллера– Хинтон с добавление м 4% NaCl (4 г на 100 мл среды ) и 6 мг /л оксациллина (0,6 мг на 100 мл среды ). Агар Мюллер а– Хинтон хранится при температуре 2 – 8oС , готовится согласно прописи на этикетке , 4% NaCl доб авляется до автоклавирования. 2. Субстанция оксациллина с известной активно стью предварительно растворяется в стерильной дистиллированной вод е (расчет концентрации оксациллина проводят с учетом его активности ) и добавляется в охлажденный на водяной бане до 48 – 50oС агар Мюллера – Хинтон . Приготовленный агар разливается по чашкам с толщиной с лоя 3 – 4 мм (на чашку диаметром 100 мм – 25 мл ). Готовые чашки со средой хранятся в пластиковых пакетах при температуре 4 – 8oС не более 5 сут. 3. Для контроля роста необходимо также приготовить чашки с агаро м , содержащим 4% NaCl, но без антибиоти ка. 4. Кровяной агар с ч истой культурой стафилококка , инкубированной в течение 18 – 24 ч. 5. Стерильный физиологически й раствор. 6. Стандарт мутности 0,5 по Мак-Фарланду. 7. Стерильные тампоны ил и микропипетка (10 мкл ). 8. Термостат с температу рой инкубиров ания 35 o С. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Исследование проводят при обяз ательном контроле роста испытуемых культур на агаре Мюллера– Хинтон с 4% NaCl без оксациллина (культуру наносят так же , как на агар с оксациллином ). Контрольные штаммы : S.aureus ATCC 38591 – рез истентный ; S.aureus ATCC 29213 – чувствительный. ПОСТАНОВКА ТЕСТА Приготовление инокулюма . Бактериальную взвесь стафилококка готовят из нескольких колоний с одинаковой морфологией на стерильно м физиологическом растворе (3 мл ) и доводят до мутности 0,5 по Мак-Фарланду (1,5· 108 КОЕ /мл ). Инокуляция . Метод I (микропипеткой ): 1. приготовить разведение 1:100 стандартного инокулюма 0,5 по Мак-Фарланду для получения бактериальной взвеси , содержащей 1,5· 106 КОЕ /мл (например , добавить 0,1 мл стандартной суспензи и к 9,9 мл стерильного физиологического раствора ); 2. с помощью микропипетк и нанести каплю (10 мкл ) разведенной стандартной суспензии на поверхность агара с оксацил лином. Метод II (с помощью тампона ): 1. погрузить стерильный ватный тампо н в пробирку со стандартизированной сус пензией (0,5 по Мак-Фарланду ), затем отжать избыток влаги о стенку пробирки ; 2. коснуться тампоном по верхности агара с оксациллином . ИНКУБАЦИЯ . Шт аммы S.aureus инкубируются при температуре 35oС в течение полных 24 ч , а коагулаза ( – ) ст афилококков – в течение 48 ч. Примечание . Среда АГВ не может быть рекомендована для постановки теста в связи с высокой частотой ложноположительных резуль татов. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТА Интерпретация : q появление видимого роста более 1 колонии на месте нанесен ия культуры означает устойчивость данного штамма к о ксациллину (метициллину ); q при отсутствии рост а на месте нанесения культуры исследуемый штамм учитывается как чувствительный к мет ициллину (оксациллину ). q при сомнительных ре зультатах , а также для штамм ов , выделе нных у больных с клинически неэффективной терапией и у больных с серьезными инфе кциями , необходимо провести развернутое исследова ние с определением МПК к оксациллину и гена mecA. Представление результата : q S.aureus или коагулаза ( – ) стафилоко к к (S.epidermidis), чувствительный к метициллину (окса циллину ); q S.aureus или коагулаза ( – ) стафилококк (S.epidermidis), резистентный к метициллину (MRSA или MRSE). Метициллино (оксациллино ) резистентные стафилококки должны расцениваться как резистен тные ко всем b-лактамам – пенициллинам , цефалоспоринам , карбапенемам , комбинациям пеницил линов с ингибиторами b-лактамаз . Кроме того , среди метициллинорезистентных стафилококков очень часто наблюдается ассоциированная резистентност ь к другим антибиотикам – ам и ногликозидам , макролидам , хинолонам , тетрацикли нам. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА 1. Скрининг на агаре с оксациллин ом предназначен для фенотипического определения штаммов , имеющих ген mecA. Однако штаммы с другими типами резистентности иногда могут давать ложнополо жительный результат . 2. Метод скрининга для выявления резистентности к оксациллину (метицил лину ) менее надежен у коагулаза ( – ) стафил ококков , чем у S.aureus. Примечание . О ксациллин в сравнении с метициллином менее стабилен к действию стафилококковых b-лак тамаз , что может привести к получению большего числа ложноположительных результатов , чем при использовании метициллина . В то же время метициллин в сравнении с окса циллином значительно менее стабилен при хране нии , что и ограничивает его применение. ВАНКОМИ ЦИНОРЕЗИСТЕНТНЫЙ Staphylococcus aureus О возможности появления ванкомицинорезистент ных штаммов S.aureus стали задумываться около 10 лет назад после сообще ний о появлении р езистентности к ванкомицину у энтерококков. Первое сообщение о выделении метицилли норезистентного S.aureus со сниженной чувствительно стью к ванкомицину (МПК 8 мг /л ) из клини ческого материала появилось в 1996 г. Несмотря на значение МПК к ванкомицин у , соответствующее диапазону умеренной резистентн ости , данный штамм был зарегистрирован к ак VRSA (ванкомицинорезистентный S.aureus) ввиду клиниче ской неэффективности ванкомицина . У этого шта мма не было найдено ни одного из ране е известных механизмов резистентности к ванко мицину ; отмечено только увеличение толщины кл еточной стенки и концентрац и и пен ициллин-связывающих белков 2 и 2а. Далее одно за другим последовали сооб щения о выделении из клинического материала штаммов S.aureus с МПК к ванкомицину 8 мг /л , обозначенных как VISA (S.aureus со сниженной чувствител ьностью к ванкомицину ). В результ ате углубленного исследовани я ванкомицинорезистентности у MRSA при скрининге более чем 2000 штаммов из различных стационаров было выявлено от 1 до 25%(!) штаммов с гете рогенной (индуцибельной ) резистентностью к ванкоми цину , экспрессирующих ее с частотой о к оло 1 клетки на 1 млн . Такие штаммы м огут являться предше ственниками VRSA. Специалисты пока не пришли к согласию , какой термин использовать : VRSA или VISA. Это свя зано с тем , что , несмотря на значения М ПК , соответствующие диапазону умеренной резистент нос ти , налицо клиническая неэффективность ванкомицина при терапии VRSA- и VISA-инфекций. Многие специалисты предлагают свои методы скрининга ванкомицинорезистентности у стафилоко кков . Однако общепринятые стандарты еще не разработаны. Таким образом , чрезвыча йно важна р азработка методов лабораторной диагностики и мониторинга ванкомицинорезистентности , особенно у пациентов , получающих или получавших ванкомицин / тейкопланин , и при неэффективности этой терапии. Следует разработать методики контроля за VRSA-инфек циями . Для предупреждения распрост ранения VRSA необходимо изолировать больных и но сителей S.aureus. Кроме того , применение антибиотиков должно предусматривать снижение числа необосно ванных назначений ванкомицина. В России пока не описано ни одног о штамма S.aureus со сниженной чувствительность ю к ванкомицину . Вероятнее всего это связа но с редким использованием ванкомицина в клинической практике.
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
Глубокая, темная ночь. Железнодорожная станция. Поезд отходит. Запыхавшийся мужик забегает на платформу и запрыгивает в первый попавшийся вагон. Темный коридор, закрытые купе, опущенные шторки, короче, ничего не видно. Он робко открывает одно купе, отодвигает шторку и спрашивает:
- Простите, это второй?
Ему отвечает мужской голос, немного возбужденно:
- Нет, мы еще даже не начали.
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, реферат по медицине и здоровью "Стафилококки. Выявление резистентности к метициллину и другим b-лактамным антибиотикам методом скрининга", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru