Реферат: Роль метилирования ДНК в канцерогенезе - текст реферата. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Реферат

Роль метилирования ДНК в канцерогенезе

Банк рефератов / Медицина и здоровье

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Реферат
Язык реферата: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Архив Zip, 25 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникального реферата

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Роль метилирования ДНК в канцерогенезе. Введение. Метилирование Д НК - это процесс ковалентного присоеди нения in vivo метильной группы к основаниям в составе ДНК . 5-м етилцитозин (5-МеС ) был первым обнаруженным моди фицированным основанием ( Hotchkiss R.D., 1948 ). Метилирование цитозиновых остатков ге номной ДНК имеет мест о у бактерий , растений , животных , в том числе и млекоп итающих (включая человека ), но отсутствует у дрожжей и нематод ( Caenorhabditis elegans ). Помимо 5-МеС ДНК прокариот содержит модифицированное основание N 6 -метиладенин , тогда как ДНК высших эукариот - то лько 5-МеС (Bird A.P., 1995). Поскольку нуклеотидная последовательность при этом не и зменяется , то по своей сути метилирование - событие эпигенетическое ( Baylin S.B., et al, 1998 ). Наиболее сложные функции метили рование ДНК выполняет в клетках млекопитаю щих . Оно вовлечено в такие фундаментал ьные процессы жизнедеятельности клетки , как р егуляция экспрессии генов и поддержание стаби льности генома . В первом случае - это стаби льная репрессия транскрипции определенных генов (гены инактивированной Х-хромосомы у самок , импринтированные гены , часть тканес пецифичных генов ), во втором - регуляция процесс ов рекомбинации и защита генома от инвази и и распространения чужеродной информации . Оч евидно , что многообразие функций метилирования и важность процессов , в которых о но участвует , предполагает наличие достат очно жесткой регуляции . В исследованиях на экспериментальных моделях было показано , что нарушение регуляции метилирования в эмбриогене зе может приводить к гибели организма . Изм енение степени метилирования в соматич е ских клетках взрослого организма наблюдае тся при некоторых патологических состояниях у человека , в том числе и злокачественных новообразованиях . Далее будут рассмотрены со временные представления о метилировании ДНК в клетках млекопитающих и его роли в к ан ц ерогенезе . Метилиров ание ДНК в нормальных клетках. Для понимания роли метилирования при ка нцерогенезе необходимо знание закономерностей пр отекания этого процесса в нормальном организм е . Клетки млекопитающих обладают способностью эпигенетически модифи цировать свой геном путем энзиматического по пятому положению метилирования остатков цитозина в составе 5 / -CpG динуклеотидов . Ци тозиновый остаток в составе 5 / -GpC или любых других динуклеотидов не метилируется . Приблизительно 70-80% CpG динуклеотидов в ген омах млекопитающих метилированы ( Baylin S.B., et al, 1998 ). Одновременно , их распределение в ДНК является не слу чайным , и , в целом , геномы обеднены по отношению к CpG динуклеотидам ( Antequera F. & Bird A., 1993 ). Предполагается , что именно метилирование сы грало в этом критиче скую роль . 5-МеС в составе CpG динуклеотидов г ипермутабилен , поскольку аминогруппа в шестом положении цитозинового кольца крайне нестабильна . 5-МеС может легко подвергаться спонтанному дезаминированию с образованием тимина . Это обстоят е льство вело в процессе эв олюции к многочисленным заменам пар G-C на А- Т , в результате чего динуклеотидов CpG в сост аве ДНК приблизительно в 5 раз меньше (~1 CpG на 80 динуклеотидов ), чем следовало бы (1 на 16) ( Gardiner-Garden V. & Frommer M., 1987 ). Сущ е ствуют два вида распределения CpG динуклеотидов в составе ДНК млекопитающих . Первое - это р ассеянные CpG (их ~80% от общего количества ). Они рассредоточены по всему геному в виде оди ночных динуклеотидов , причем особой закономерност и в их распределении вы я вить невозможно . Чаще всего они встречаются в и нтронах и намного реже в транскрибируемых областях . Значительная часть тканеспецифичных г енов имеют в своих промоторах одиночные CpG. Степень их метилирования может быть различной в разных клетках и тканях ( Ли хтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Второй вид распределения заключ ается в следующем . В геномах млекопитающих существуют короткие (от 500 до 5000 пар нуклеотидо в ) последовательности , где CpG динуклеотиды распредел ены кластерами . Плотность их близка к расчетной (1 на 16), а содержание G + C превышает 60%. Такие последовательности получили название CpG-о стровков . Характерным свойством этих структур является их частая локализация в 5 / -регуляторных районах генов , но они также встречаются и в интронах , а та кже на 3 / - концах генов . Свыше половины генов , составляющих функционирующий геном человека , содержат CpG-островки . К их числу относятся , по-видимому , все гены домашнего хозяйства , окол о 40% тканеспецифичных генов , многие протоонкогены и гены супрессоры опу холевого роста . CpG-островки , ассоциированные с регуляторными обл астями генов , неметилированы во всех тканях эмбриона и взрослого организма (включая и гаметы ), независимо от того , экспрессируются в них гены или нет . Исключение составляют только гены , расп о ложенные на инактивированной Х-хромосоме у самок , а такж е импринтированные гены , которые экспрессируются только с одного из двух аллелей , мате ринского или отцовского . У этих генов в нормальных клетках CpG-островки метилированы ( Baylin S.B., et al, 1998; Ли хтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Кроме того , большую часть генома млекопитающих (~95%) составляет генетиче ский балласт или junk ДНК , участки которой , по двергаются интенсивному метилированию . Например , к числу последовательностей , обогащенных CpG дину клеотидами , относятся транспозоны (~25% генома человека ) и сателлитные повторы (~10% генома че ловека ). Эти паразитические элементы метилированы во всех изученных сайтах генома нормальн ого взрослого организма ( Selker E.U., 1999 ). Подобным же образом в норма льных клетках грызунов и человека инт егрированные вирусные последовательности подвергаютс я метилированию и обусловленному им стабильно му блоку транскрипции ( Walsh C.P., et al, 1998 ). Паттерн метилирования конкретных генов и генома в целом устанавливается в процессе эмбриогенеза и стабильно сохраняется в популяциях соматических клеток взрослого организма . Так , вскоре после оплод отворения , на стадии 1-2 клеточных делений , проис ходит тотальное деметилирование генома , устраняющ ее паттерн исходных половых кле т о к . Деметилированное состояние ДНК сохраняется до стадии имплантации бластоцисты ( Razin A. & Shemer R., 1995 ). На постимплантационной стадии начинается процесс метилирования de novo , когда большинство CpG-сайтов вновь метилируется , за исключением тех , что находятся в составе CpG-островков ( Tuker M.S., 1999 ). Механизм , позволяющий CpG-островкам избегать метилирования de novo в эмбриогенезе , пока неизвестен . Предполагают , что защитную ро ль в этом процессе играют специфические цис -действующие генетиче ские элем енты . В настоящее время такая функция доказана для последовательности , явл яющейся одновременно сайтом узнавания транскрипц ионного фактора Sp1 ( Tuker M.S., 1999 ). Позднее , в процессе дифференцировки пр оисходит локальное деметилирование индивидуальных генов. В результате этих последовательных событий 70-80% CpG-сайтов в геноме человека и мыши оказывается метилированными . Сформированный профиль метилирования затем сохраняется в ряду клеточных поколений . Поддерживающее метилиро вание осуществляется только в тех сайтах вновь синтезированной цепи ДНК , где в исходной цепи уже содержались CpG динуклеот иды с метилированным остатком цитозина ( Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). В настоящее время у млекопит ающих , включая человека , известны четыре ферме нта , осущес твляющие метилирование геномной ДНК . Это ДНК-метилтрансферазы : Dnmt1, Dnmt2, Dnmt 3a и 3b ( Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001; Robertson K.D. & Jones P.A., 2000 ). Dnmt1 - наиболее изученный на сегодн я фермент системы метилирования ДНК у поз воночных . Го мозиготная делеция dnmt1 у мышей приводит к летальному исходу на стадии эмбриона ( Li E., et al, 1993 ). Именн о это наблюдение явилось доказательством необ ходимости метилирования ДНК у высших эукариот . В структуре Dnmt1 были выявлены два домена : каталитическ ий и регуляторный . Каталитичес кий домен локализован в С-концевой области белка и структурно близок к бактериальным цитозиновым метилтрансферазам . В свою очеред ь , регуляторный домен расположен в N-концевой части Dnmt1 и содержит специальную сигнальную п осл е довательность , направляющую фермент в активные репликативные комплексы делящихся клеток ( Bestor T.H. & Verdin G.L., 1994 ). А ктивность фермента резко возрастает с началом синтеза ДНК и в первые минуты после репликации профиль метилирования дочерней ни ти вос создается по образцу материнской . Dnmt 3a и 3b, как оказалось , необходимы для метилиро вания de novo ( Okano M., et al, 1998a ). Инактивация соответствую щих генов несовместима с развитием зародыша у мыши . Ферменты экспрессируются на высок ом уровне в эмбрионах и на очень низком в соматических клетках взрослого ор ганизма . Эти ферменты различаются по своим функциям , так как только Dnmt3b небходима для метилирования центромерных минисателлитных повторо в ( Okano M., et al, 1999 ). Функции Dnmt2 остаются пока неясными ( Okano M., et al, 1998b ). В настоящее время нич его не известно и о том , как происходи т тотальное деметилирование генома в эмбриоге незе . Только совсем недавно была открыта Д НК-деметилаза , которая по своим свойствам явля ется весьма вероятным кандидатом на рол ь фермента , осуществляющего тотальное деметилиров ание . ДНК-деметилаза способна узнавать метилирован ные CpG динуклеотиды и трансформировать 5-МеС в цитозин , не нарушая целостности ДНК ( Bhatacharya S.K., et al, 1999 ). Что касается м еханизма локального де метилирования , то д ля нескольких тканеспецифичных генов установлено , что этот процесс контролируется определенны ми цис -действующими генетическими элементами , которые узнаются спец ифическими транс -дейст вующими белковыми факторами ( Лихте нштейн А.В . & Киселев а Н.П ., 2001 ). Метилирование подавляет экспрессию на уровне транскрипции . Существует , по крайней мере , два механизма , с помощью которых м етилирование может препятствовать транскрипции . О дин из них заключается в прямом ингибиров ании связывания специфическ их транскрипционн ых факторов (c-Myc/Myn, AP-2, E2F и ATF/CREB-подобные белки ), чьи сайты узнавания содержат одиночные метилированны е CpG динуклеотиды ( Robertson K.D. & Jones P.A., 2000 ). Второй механизм репрессии опосредуется через метил -CpG связывающие бе лки , такие как MeCP1 и MeCP2, известные также как MBD-семейство ( Boyes J. & BirdA., 1992 ). Они не проявляют специфичности к последовательности нем одифицированных нуклеотидов , но обладают высокой степенью родства к метилированной ДНК . На иболее изученный из них , MeCP2 локализуется в ядре в гетерохроматине (неактивен , конденсир ован , реплицируется в поздней S-фазе ). Структура белка включает 2 домена : один связывает ме тилированные CpG, второй обеспечивает функции репрес сора транскрипции . Взаимодействуя с метили р ованными основаниями , MeCP2 рекрутирует к орепрессорный комплекс mSin3a/HDAC (гистондеацетилаза ), который осуществляет деацетилирование N-концевых аминогру пп гистонов . В результате гистоны приобретают дополнительный положительный заряд и способн ость прочно взаимодействовать с витка ми нуклеосомной ДНК . Нуклеосомы компактизуются и теряют способность взаимодействовать с ф акторами транскрипции . Напротив , рекрутирование в комплекс с транскрипционными факторами белко в с гистонацетилазной активностью (НАТ ) способ н о снимать репрессирующее действие метилирования , приводя к образованию эухроматина (деконденсирован , потенциально активен , реплицируе тся в ранней S-фазе ) ( Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001; Spencer T.E., et al, 1997 ). Таким образом , наряду с формиров анием репрессивных комплексов на основе обычных бел ков - репрессоров , узнающих специфические последова тельности , высшие эукариоты с усложненным ген омом обладают дополнительным уникальным эпигенет ическим механизмом регуляции транскрипции , которы й наследует с я дочерними клетками при делении . Нарушения метилиро вания ДНК при канцерегенезе. За последние 15-20 лет было установлено , что п аттерн метилирования в неопластических клетках значительно изменяется по сравнению с норм альными клетками , причем тотальное д емети лирование генома сопровождается увеличением акти вности метилтрансферазы и локальным гиперметилир ованием CpG-островков . Во всех , без исключения , исследованных неоплазиях наблюдается подобный дисбаланс метилирования . В свете описанных вы ше функций мети л ирования в нормал ьных клетках , очевидно , что эти нарушения могут изменять структуру хроматина и функции ДНК , внося тем самым значительный вклад в создание генетической и фенотипической нестабильности опухолевой клетки . 1. Тотальное гипометилирование генома. Было обнаружено , что одним из первичных нарушений метилирования ДНК в неопластических клетках , является тотальное гипометилирование генома . Уменьшение количества м етильных групп является одним из ранних , з ачастую еще до появления сформированной опухоли , событием в клеточной трансформац ии . Напрямую роль гипометилирования ДНК в процессе клеточной трансформации была доказана на основании данных о том , что содержан ие грызунов на безметиониновой диете , ведущей к дефициту доноров метильных групп , вызы в ает гипометилирование ДНК и обра зование опухолей печени ( Pogribny I.P., et al, 1995 ). Несмотря на явную ассоциацию гипометилирования ДНК с процессом образования опухолей , причины и конкретные механизмы , обуславливающие его канцерогенный эффект , до сих пор остаются неясными . Есть данные , что гипометилирование может затрагивать опреде ленные онкогены , такие как К -ras при раке легкого и кишечника у человека . Эти лок альные ген-специфические изменения возникают на ранних стадиях канцерогенеза и обнаружены , в час т ности , в доброкачественных п олипах , которые являются предшественниками карцин омы кишечника ( Baylin S.B., et al, 1998; Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Тем не менее , спектр генов , активируемых в опухолях в результате гипометилирования генома , огран и чен . Вероятно , это объясняется тем , чт о гипометилирование затрагивает рассеянные CpG дину клеотиды . CpG-островки не могут быть объектами деметилирования . Исключение составляют импринтиров анные гены и гены на инактивированной Х-хр омосоме у самок . Таким обра з ом , деметилирование может затрагивать группы ткане специфичных генов , содержащих в регуляторных областях одиночные CpG динуклеотиды . Нарушение им принтинга в результате деметилирования и его роль в канцерогенезе были доказаны при изучении опухоли Вильмса ( Jirtl R.L., 1999 ). Опухоль этого типа развивается у детей в раннем возрасте из метанефрических бластных клеток . Существуют спорадическая и наследственная формы заболеван ия ( RyanG., et al , 1995 ). Было об наружено , что в 70% случаев в опухолях Вильмс а имеет место аберрантное деметилирование материнского аллеля и биаллельная экспрессия гена инсулинподобного фактора роста IGF2. Как и звестно , при сверхэкспрессии IGF2 проявляет свойства онкогена . Биаллельная экспрессия IGF2 часто набл юдается в фенотипически норм а льных тканях окружающих опухоль , т.е . является ран ним событием при возникновении опухоли Вильмс а . Нарушение импринтинга IGF2 наблюдается более ч ем в 20 различных типах опухолей ( Jirtl R.L. , 1999 ). Как уже упоминалос ь выше , тотальное гипометилирование ге ном а может , изменяя структуру хроматина и пер еводя его в активное состояние , косвенно в лиять на экспрессию генов . Так , было показ ано , что деметилирование генома нормальных кл еток под воздействием 5-азацитидина ведет к трансформации некоторых клеточных кул ь тур и нарушению процесса расхождения хромосом во время митоза ( Baylin S.B., et al, 1998; Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Еще одним следствием тотального гип ометилирования и , возможно , наиболее вероятным , является возникающая в результате нарушен ия паттерна метилирования общая нестабиль ность генома . Так гипометилирование ДНК в эмбриональных клетках мыши , нокаутированных по гену dnmt1, увеличивало частоту реарранжировок эндо генных ретровирусов и паразитических последовате льностей , частоту образова н ия делеций и транслокаций некоторых уникальных генов , т.е . являлось причиной хромосомных аномалий и последующего летального исхода ( Chen R.Z., et al, 1998 ). Однако , для опухолевы х клеток пока отсутствуют данные , которые подтвердили бы , что перечисленные на рушен ия , всегда присутствующие в них , являются прямым следствием тотального гипометилирования . 2. Локальное гиперметилирование. Локальное гиперметилирование распрос траняется на небольшую часть CpG динуклеотидов (~20%), которые входят в состав CpG- островков . CpG-о стровки , за известными исключениями , всегда не метилированы в нормальных клетках . Аберрантное гиперметилирование CpG-островков является особенность ю иммортализованных и трансформированных клеток и связано с инактивацией определенных ге нов с у прессоров опухолевого роста y человека ( Toyota V. & Issa J.-P.J., 1999 ). Механизм локального гиперметилирования не впо лне ясен . По-видимому , важную роль в этом процессе играет повышение метилтрансферазной а ктивности , тем более что оно является хара ктерны м свойством опухолевых клеток ( Robertson K.D., et al, 1999 ). При исследовани и некоторых клеточных культур было показано , что повышение ДНК-метилтрансферазной активности зачастую предшествует злокачественной трансформ ации . Так , трансфекция клонированного ге на человеческой Dnmt1 в иммортализованные фибробласты человека приводит к аберрантному метилированию CpG-островков в промоторных зонах ряда гено в , в том числе генов E-cad ( E-cadherin ) и HIC1 ( hypermethylated in cancer ). В тоже время , CpG-островки , ассоциир ованные с другими генами (например , с геном-супрессором p16 INK4A ), не меняют статус метилирования , несмот ря на постоянную экспрессию Dnmt1 ( Vertino P.M., et al, 1996 ). Таким образом , очевидно , что повышение активности Dnmt1 играет определенную роль в аберр антном метилировании CpG-остр овков . Однако простым повышением уровня экспр ессии нельзя объяснить появление у фермента способности к метилированию de novo . По-видимому , в трансформированных и опухолевых клетках нарушен механизм за щиты CpG-островков от метил ирования . Кроме того , недавно было показано , что Dnmt1 является мишенью действия онкобелков Ras и Fos, то есть активность фермента регулируется внутриклеточны ми путями , передающими митогенные сигналы ( Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Гиперметилир ование CpG-островков приводит к стабильной инактивации прилежащего гена , то есть феномену MAGI (methylation-associated gene inactivation). Это п роисходит в результате возникновения стерических препятствий к связыванию транскрипционных фа кторов или гетерох р оматинизации , опос редованной метилцитозин-связывающими белками MBD ( Robertson K.D. & Jones P.A., 2000 ). Если прилежащим геном окажется ген домашнего хозяйства , т о его инактивация будет летальна для клет ки , но не будет иметь особых последствий для организма . Подавление экспрессии ка кого-либо из тканеспецифических генов нанесет определенный ущерб дифференциальному фенотипу кл етки , не оказывая влияния на общую жизнесп особность . В то же время , инактивация гена супрессора опухолевого роста или гена ре парации мо ж ет создать условия для неконтролируемой пролиферации ( Baylin S.B., et al, 1998; Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Аберрантное метилирование CpG-островков явля ется ранним событием в процессе возникновения опухоли . Например , гиперметилирование промото рного региона гена супрессора опухолевого роста p16 INK4A при плоскоклеточном раке легкого было обнаружено уже в гиперплазии ( Baylin S.B., et al, 1998 ). Ген ретинобластомы (Rb1) - первый кла ссический ген супрессор опухолевого роста , в отношении которого б ыл установлен фе номен MAGI. Важность этого гена определяется тем , что , как полагают , все (или почти все ) антипролиферативные сигналы реализуются в к летке опосредованно , через белок Rb или родствен ные белки ( Hanahan D. & Weinberg R.A., 2000 ). Белок Rb синте зируется на протяжении все го клеточного цикла и почти все время присутствует в неполностью фосфорилированном в иде . Такая форма белка способна связывать факторы , отвечающие за переход клетки из ф азы G1 в фазу S, т.е . принимает участие в н егативной регуляци и клеточного цикла ( Kouzarides T., 1995 ). Когда белок Rb фосфорилируется с помощью специфичных для клеточного цикла киназ (например , циклином D1/CDK4), связанные с ним эффекторы высвобождаются и запускают переход в S-фазу . Сама по себе , ретинобластома пре дставляет собой о пухоль , развивающуюся из эмбриональной сетчатки и наследуемую в большинстве случаев по аутосомно-доминантному типу с 90%-ной пенетрантность ю . Кроме семейных случаев возникновения ретин областомы описаны и спорадические случаи ( Киселев Ф.Л., 1998 ). Ги перметилирование CpG-островка промотора гена Rb1 имеет место только при спорадической (унилатеральн ой ) ретинобластоме в 10-15% случаев ( Hanahan D. & Weinberg R.A., 2000 ). К настоящему времени и звестно значительное число генов супрессоров опухолев ого роста , инактивированных в раз личных опухолях путем гипеметилирования CpG-островк ов , локализованных в их регуляторных областях . Среди них : гены Rb1, р 53, VHL, BRCA1, MLH1 и другие ( Baylin S.B., et al, 1998; Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001; Robert son K.D. & Jones P.A., 2000; Hanahan D. & Weinberg R.A., 2000; Киселев Ф.Л ., 1998 ). 3. 5-МеС как эндогенны й мутаген. 5-МеС может подверг аться спонтанному дезаминированию даже при об ычных условиях тепловых флуктуаций , что делае т CpG сайты "горячими точками " для возникнов ения мутаций . CpG динуклеотиды , расположенные в к одирующих регионах генов супрессоров опухолевого роста могут спровоцировать мутации , приводящ ие к возникновению опухоли ( Rideout W.M.I., et al, 1990 ). О серьезности этого фен омена свид етельствует то обстоятельство , что из 300 мутаций гена р 53, главного хранител я целостности генома , зарегистрированных в оп ухолях человека различной локализации , 25-30% относятс я к мутациям этого типа или эпимутациям ( Greenblatt M.S., et al, 1994 ). Увелич ение мутабельности 5-МеС может быть об условлено тремя факторами : различной эффективност ью репарации , скоростью спонтанного дезаминирован ия и скоростью деления клеток ( Robertson K.D. & Jones P.A., 2000 ). Дезаминирование 5-МеС приводит к образованию тимина , такого же естественного основания ДНК , как и д ругие , и поэтому возможны ошибки системы р епарации . Серьезность проблемы состоит в том , что замены нуклеотидов возникают довольно часто . Согласно расчетам , за сутки в каж дой клетке происходит ~100 реакций деза м инирования , из которых многие приводят к мутациям ( Лихтенштейн А.В . & Киселева Н.П ., 2001 ). Что касается т ретьего фактора , то оказалось , что связанные с CpG мутации быстрее происходят в поврежденн ых тканях в процессе восстановления ( Greenblatt M.S., et al, 1994 ). Заключение. Характерной черто й опухолевых и трансформированных in vitro клеток м лекопитающих является дисбаланс метилирования ге номной ДНК , который вносит значительный вклад в создание генетической и фенотипической нестабильности . В тоже время, нестабильнос ть 5-МеС в составе CpG динуклеотидов , приводящая к эпимутациям , может иметь тот же конеч ный результат . Таким образом , метилирование , яв ляясь эпигенетической модификацией ДНК , может в случае нарушения приводить к генетическим изменениям , делая очевидной взаимосвя зь между генетическими и эпигенетическими про цессами при возникновении и развитии опухоли . Нарушение паттерна метилирования проявляется на ранних стадиях злокачественной трансформа ции клеток млекопитающих . С медицинской точки зрения э т о открывает возможности для ранней диагностики и лечения заболев ания . Тем более , что в отличие от мутац ий , которые принципиально необратимы , модификации ДНК , хотя и весьма стабильны , но принц ипиально обратимы . Литература Antequera F., Bird A. (1993) Proc .Natl.Acad.Sci. USA, 90, 11995-11999; Baylin S.B., Herman J.G., Graff J.R. et al (1998) Adv.Cancer Res., 72, 141-196; Bestor T.H., Verdin G.L. (1994) Carr.Opin. Cell Biol., 259, 946-951; Bhatacharya S.K., Ramchandani S., Cervoni N., Szyf M. (1999) Natu r e, 397, 579-583; Bird A.P. (1995) Trends Genet., 11, 94-100; Boyes J., BirdA. (1992) EMBO J., 11, 327-333; Chen R.Z. et al (1998) Nature, 395, 89-92; Gardiner-Garden V., Frommer M. (1987) J.Mol.Biol., 196, 261-268; Greenblatt M.S., Bennett W.P., Н olls tein M., Harris C.C. (1994) Cancer Res., 54, 4855-4878; Hanahan D., Weinberg R.A. (2000) Cell, 100, 57-70; Hotchkiss R.D. (1948) J.Biol.Chem., 168, 315-322 ; Jirtl R.L. (1999) Exp. Cell Res., 248, 18-24 ; Киселев Ф . Л . (1998) Молекулярная Биология , 32, 197-205; Kouzarides T. (1995) Sem.Canser Biol., 6, 91-98 ; Лихтенштейн А . В ., Киселева Н . П . (2001), Биохимия , 66, 293-317;
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
- Поговаривают, дружище Штирлиц, что по вечерам после работы вы злоупотребляете водкой. Вы случайно не русский?
- Давайте будем поделикатней друг к другу, Мюллер. Я же не обсуждаю ваше пристрастие к салу и галушкам.
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru