Реферат: Диагностика инфекций, вызываемых стафилококками - текст реферата. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Реферат

Диагностика инфекций, вызываемых стафилококками

Банк рефератов / Медицина и здоровье

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Реферат
Язык реферата: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Архив Zip, 27 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникального реферата

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Диагностика стафилококковых инфекций Предисловие Несмотря на то , чт о стафилококки принадлежат к числу наиболее легко обнаруживаемых и распозн аваемых микроорганизмов , не требующих сложных диагностических приемов для их выявления , в практической работе микробиологи до сих по р испытывают определенные трудности при устан овле н ии их причинной роли в р яде различных заболеваний . С одной стороны , присутствие патогенных стафилококков , обнаруживаем ое в исследуемом материале , не всегда явля ется убедительным доказательством их этиологичес кого значения . С другой , учитывая большое разно о бразие проявлений биологической активности этих микробов , зависящее от разн ых , не всегда поддающихся учету факторов , широкую их изменчивость под влиянием лекарств енных веществ и самого макроорганизма , доволь но сложно бывает определить их потенциальную пат о генность . Наконец , третья при чина связана с тем , что стафилококки являю тся представителями нормальной микрофлоры из группы условно патогенных микроорганизмов и , наряду с непатогенными , патогенные представители обитают в организме людей , распространяясь пр и этом весьма неравномерно на разные участки человеческого тела. Если выделение патогенного стафилококка , из крови больных людей и различных полост ей , которые принято считать стерильными , в подавляющем большинстве случаев может служить доказательством его р оли как возбудите ля болезни , то присутствие стафилококков на слизистых зева , носа и т . д . даже при явном болезненном состоянии их требует б ольшой осторожности исследователя в выводах о б этиологии данных заболеваний. Поэтому , естественно , не может быть об щи х рекомендаций , как при диагностике различных стафилококковых инфекций , так и при микробиологических исследованиях участков тела человека и разных объектов внешней среды . Широкий обмен мнениями между микробиологами научных учреждений и практических лабора т орий , осуществляемый на съездах и конференциях , посвященных проблемам стафилококко вых инфекций , а также при личных контактах , казалось бы , должен был привести к оп ределенным взглядам на различные методы иссле дования , предлагаемые для выделения и идентиф ик а ции стафилококков . Однако большое число запросов , поступающих из лабораторий СЭС и лечебных учреждений , свидетельствует о явных затруднениях , которые возникают у исследователей при решении разных вопросов ми кробиологической диагностики стафилококков , а в р яде микробиологических учреждений бы туют еще некоторые устаревшие методы и пр иемы , приводящие к неправильным оценкам и даже досадным недоразумениям. Важным условием эффективности лабораторной диагностики является сочетанное определение ка чественных и колич ественных критериев сод ержания патогенных стафилококков в исследуемом материале . Исходя из этого , я считаю нео бходимым изложить ряд методов основных микроб иологических исследований , наиболее простых и доступных для каждой практической и научной лаборатори и , которыми мы пользуемся в течение многих лет. ОСНОВНЫЕ ПРИ НЦИПЫ ОБНАРУЖЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ПАТОГЕННЫХ СТАФИЛОКОККОВ Предварительная диагностика стафилококков может основываться на бактериоскопическом изучении препаратов — мазков , окрашенных по Граму . П атогенн ые стафилококки , помимо гроздевидного расположени я , характеризуются правильной сферической формой клеток . Обнаружение стафилококков , находящихся внутри клеток , позволяет дать ответ о н аличии стафилококковой инфекции . В большинстве же случаев для то ч ного установ ления патогенности обнаруженных стафилококков тр ебуется выделить эти микроорганизмы в чистой культуре путем посева исследуемого материала на плотные питательные среды. В настоящее время ассортимент дифференциа льных , элективных и накопительных с ред , предложенных для выделения патогенных стафилок окков , весьма значителен и продолжает расширя ться . Многие исследователи на основе знания основных биохимических характеристик и питател ьных потребностей патогенных стафилококков при конструировании сред с т ремятся пов ысить их высеваемость и обеспечить возможност ь осуществлять их количественный учет , получи ть надежный способ отличать потенциально боле знетворные стафилококки от сапрофитов. Употребление жидких накопительных сред дл я первичного выделения стафило кокков неце лесообразно , так как лишает исследователя воз можности количественной оценки содержания микроб ов в обследуемых объектах , а при случайных загрязнениях способствует ошибкам . Особенно это относится к таким исследованиям , как о бнаружение носительств а патогенных стаф илококков , где доказательством является лишь массивный рост , либо определение этиологической роли этих микроорганизмов "при пищевых отра влениях или наружных воспалительных процессах . Если же речь идет об исследовании кров и , а также о тех н е многих случаях , когда бывает необходимо выявить даже единичные жизнеспособные особи этих микробов , например при контроле эффективности дезинфе кции , проверке на стерильность или титрационн ых посевах , то в подобных случаях использо вание накопительных сред в п олне о правдано. Из большого числа разнообразных питательн ых сред , опробованных для первичного выделени я стафилококков , в практике оправдал ,;1' себя немногие . Обычный питательный агар (рН 7,2 7,4), пр иготовленный путем добавления 2% агар-агара к мя сопептонн ому бульону или к триптическому перевару Хоттингера , может быть использован при исследовании экссудатов из закрытых полостей . Стафилококки вырастают через 18 — 24 ч инкубации при 37° С в виде гладких блестящих с ровными краями непрозрачных и слегка выпуклых колоний . Характер пигмента выявляется лучше после дополнительного суточного выдерживания чашек при комнатной температуре (20° С ) на свету . Если в исследуемом материале присутствует посторонняя флора , то по внешнему виду колонии стаф илококков могут быть тр у дно отлич имы. Употребление кровяного агара дает возможн ость , кроме выявления пигмента , определить и гемолитическую активность стафилококков . При эт ом необходимо помнить , что гемолитическая спо собность , определяемая на чашках с кровяным агаром , зависит от м ногих факторов — вида крови , ее концентрации , наличия в ней антитоксинов , толщины слоя среды , сод ержания углекислого газа в атмосфере культиви рования , густоты посева , присутствия и характе ра сопутствующей флоры и т . д. При отборе колоний с кровяного агара необходимо отвивать как гемолитические , так и не дающие гемолиза , особенно если исследование проводится на среде с челов еческой или лошадиной кровью , а отсутствие гемолиза на таких средах не позволяет заключить об отсутствии вообще гемолитической активнос т и . Поэтому использование к ровяного агара для первичного посева целесооб разно только при обследовании объектов , не содержащих посторонней микрофлоры , и желательно добавлять в питательную среду кровь крол ика или барана. Если же проводится исследование гноя о ткрытых ран или отделяемого язв или свищей , то следует пользоваться элективно-диф ференциальной средой для стафилококков — жел точно-солевым агаром (ЖСА ) Г . Н . Чистовича . Э лективность этой среды обеспечивается высоким содержанием хлористого натрия , а добавл е нный яичный желток позволяет выявлять лецитовителлазную активность , которая является одним из показателей патогенности стафилококков и в силу этого ЖСА более четко д ифференцирует патогенных представителей , чем кров яной агар . Приготовление ЖСА несложно. Заг отовляют впрок и стерилизуют в автоклаве при 120 °С " в течение 20 мин пит ательный агар (МПА или Хоттингера ) рН 7,2 — 7,4, содержащий 10% поваренной соли . Перед употребл ением солевой питательный агар растапливают , остужают до 45 — 50 °С и добавляют к нему 20% п о объему стерильной желточной взвеси (1 желток куриного яйца на 200 мл физ иологического раствора ). Для лучшего эмульсировани я желательно иметь колбы со стеклянными б усами . После тщательного перемешивания среду разливают по 20 — 25 мл в чашки , которые м огут х раниться в холодильнике в течение нескольких дней. Следует производить массивный посев иссле дуемого материала на чашки с ЖСА , а ин кубацию вести в течение 2 суток при 35 — 37° С . Посторонняя флора резко подавляется , стафилококки же на ЖСА вырастают практичес к и в чистой культуре . Непосредственно при просмотре чашек вокруг колоний отмечается образование радужных венчиков и мутной з оны — лецитовителлазная реакция . Такие колон ии , не менее двух из каждого посева , от вивают на скошенный мясо-пептонный агар для после д ующей проверки выросших куль тур в реакции плазмо-коагуляции. Чтобы избежать ошибок в определении ж елточной реакции , необходимо иметь в виду , что иногда наблюдается помутнение среды без радужного ободка , в этом случае проба на лецитовителлазу считается отри цательной . Если же колонии , выросшие на ЖСА , не дают лецитовителлазной реакции , т . е . не окружены радужным венчиком , но имеется рост стафилококков , то их тоже считают подозри тельными и также отвивают не менее двух из каждого такого посева на чашки с прост ы м питательным агаром пятнами диаметром 5 — 10 мм . После суточного инкубир ования при 37° С полученные макроколонии п роверяют в реакции плазмоагглютинации , для че го микробную массу размешивают петлей на стекле в каплях цитратной кроличьей или ч еловеческой пла з мы , разведенной 1 :4. Обра зование хлопьев учитывают в течение 30с— 1 мин . При наличии плазмоагглютинации такие шта ммы считают подозрительными и отвивают на скошенный агар для дальнейшего изучения в коагулазной реакции . При таком отборе чис ло пропускаемых ш т аммов патогенных стафилококков человеческого происхождения невелико , культуры же , выделенные от животных , треб уется проверять в реакции плазмокоагуляции. Коагулазная проба является основным призн аком , определяющим болезнетворность стафилококков , поэтому ее постановка требует к себе максимального внимания . Для выявления коагул азной активности у стафилококков , выделенных от людей , можно пользоваться как цельной к ровью , так и плазмой кроликов или человека . Можно использовать также кровь или плазм у , взятую неп о средственно от челов ека . Консервированная плазма или кровь , исполь зуемые для переливания , непригодны для реакци и , так как к ним часто добавляются кон серванты , которые препятствуют жизнедеятельности стафилококков , проявлению коагулазной активности . Не след у ет применять кровь животн ых или людей , переносящих стафилококковые заб олевания , в особенности затяжные , так как она может оказаться нестерильной и содержать антикоагулазу . При работе со стафилококками , выделенными от рогатого скота , можно пол ьзоваться быч ь ей кровью. Асептично взятую кровь стабилизируют с помощью 1 — 4% цитрата или 0,1% оксалата . Для получения плазмы нитратную кровь центрифугируют или отстаивают на холоду . Но , как уже говорилось , можно пользоваться и цельной кровью . Затем кровь разводят стерил ьным физиологическим раствором в соотношении 1 : 3 или 1 : 5 и разливают по 0,2 — 0,3 мл в стерильные пробирки , которые перед стерилизацией должны быть тщательно вымыты , так как остатки химических веществ могут влиять на результ ат плазмокоагуляции. Испытуемы е агаровые культуры стафилок окков вносят петлей в плазму и хорошо перемешивают . Бульонные культуры вносят пипетко й в объеме 0,1 мл В каждом опыте необход имо ставить контроль с культурами заведомо патогенных стафилококков , дающих коагулазную ре акцию , и шта м мами коагулазоотрицатель- ных микроорганизмов . Кроме того , часть пробиро к с разлитой плазмой следует оставлять не засеянной микробами и выдерживать в терм остате на протяжении всего срока опыта . В случае наступления коагуляции хотя бы в одной из них весь оп ы т н ужно переставить с новой порцией крови . Пр обирки с исследуемыми культурами выдерживают в термостате при 37 °С в течение суток . Учет результатов проводится обязательно дважды : через 2 — 3 ч и 24 ч . Учитывают свертывание плазмы и образование сгустков . Обыч н о культуры , активно продуцирующие коагула зу , дают положительную реакцию уже через 2 — 3 ч . а если они обладают и выраженной фибринолитической активностью , то первоначально образовавшиеся сгустки могут подвергнуться р асплавлению к концу суток . Слабокоагулиру ю щие штаммы могут давать положительную реакцию в поздние сроки— к концу суток . Опыты , давшие сомнительный результат , необходимо повторить. Некоторые исследователи , получив отрицательны й или сомнительный результат , оставляют проби рки на столе . Этого делать не льзя , так как свертывание плазмы в более поздни е сроки может носить не специфический хар актер и его не следует принимать во в нимание. Стафилококки , дающие положительную коагулазну ю пробу , должны рассматриваться как потенциал ьно патогенные , независимо от на личия или отсутствия у них гемолитических свойств и характера пигмента , их относят к ви ду St. aureus и в дальнейшем подвергают фаготипизации и проверке на чувствительность к антибио тикам. Углубленное изучение стафилококков показало , что основной признак па -тогенности — коагулазная реакция может подвергаться изм енчивости при воздействии различных факторов (Г . Н . Чистович , 1961; Е . М . Падерина , 1966), поэтому в ряде случаев , при выделении коагулазонега тивных стафилококков в монокультуре из патоло гических оча г ов , целесообразно изучит ь у них другие признаки потенциальной бол езнетворности и прежде всего — способность ферментировать маннит в анаэробных условиях . Известно , что среди коагулазоотрицательных ч асть культур обладает способностью расщеплять маннит в ана э робных условиях (8,4% — по данным А . А . Акатова и М . Л . Ха теневер , 1974). Определение ферментации маннита в анаэроб ных условиях технически очень просто и ос уществляется путем посева уколом исследуемых культур в пробирки с высоким столбиком по лужидкого агара Хоттннгера , содержащего 1% ман нита и 0,004% индикатора бромкрезолпурпура или бро мтимолблау (рН == 7,2). Эту среду перед посевом “регенерируют” , т . е . кипятят в водяной бан е , быстро охлаждают , а после посева залива ют слоем стерильного вазелинового масла . П осевы инкубируют при 37 °С в т ечение 5 дней . Однако в значительном числе случаев результаты могут быть учтены уже через сутки. Наряду с реакцией плазмокоагуляции , больш ое значение приобрела еще одна важная спо собность стафилококков , характеризующая их поте нциальную патогенность , — дезоксирибонуклеазная активность . Многие исследователи сообщают о высокой корреляции этого признака с коагул азной активностью и токсигенностью изучаемых культур ; отмечают , что стафилококки , выделенные из патологического материала, как пр авило , обладают ДНК-азой . Коагула-зопозитивные штам мы , полученные от носителей , могут не имет ь этого фермента , и обычно отсутствие дезо ксирибонуклеазной активности сочетается с низкой биохимической способностью и атоксигенностью таких культур стафил о кокков. По наблюдениям некоторых исследователей , среди коагулазонегативных штаммов стафилококков , но обладавших другими признаками патогенности , выделенных в ряде случаев от больных с различными гнойными инфекциями , дезоксирибонукле азную активность проявля ли от 10 до 29% та ких культур (И . И . Панышева и сотр ., 1967; Franklin и соавт ., 1966; Lierd и Golde, 1970). В настоящее время этот тест может служить надежным дифференциальным признаком ме жду патогенными и непатогенными стафилококками и в то же время может помочь в дифференциации степени патогенности коагулазоп озитивных штаммов и , безусловно , привлечет вни мание к коагулазонегативным , но обладающим эт им ферментом культурам стафилококков и в ряде случаев позволит отнести последние к болезнетворным формам с б о льшей уверенностью. Методика определения дезоксирибонуклеазной а ктивности несложна , в основу ее положен ме тод Джеффриса . Готовят впрок 2% МПА (рН— 8,6), с одержащий ДНК (2 мг /мл среды ), разливают по флаконам и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин . Пере д разливом в чашк и к среде добавляют CaCIa (0,8 мг /мл ). На подсу шенную среду засевают суточные культуры стафи лококков . После инкубации в течение 18 — 20 ч при 37° , на поверхность среды наливают IN раствор НС 1 и через 7 — 10 мин учитывают зоны просветления , ко т орые оцениваю т крестами (Н . Б . Мордвинова и соавт ., 1967). Нами предложен более экономичный метод для обнаружения ДНК-азы у микроорганизмов . Э тот способ , помимо уменьшения в 2 раза расх ода ДНК на каждый опыт , позволяет использо вать более дешевую низкополим ерную нуклеи новую кислоту , изготовляемую Олайнским заводом химических реактивов . Предлагаемая методика шир око апробирована на кафедре микробиологии ЛСГ МИ и по качеству результатов не уступает общепринятой . Поэтому мы приводим ее подр обное описание. Для при готовления рабочего раствора ДНК , навеску нуклеиновой кислоты из расче та 10 мг /мл помещают в дистиллированную вод у , добавляют 0,5 мл 0,2% (или 0,8%) раствора NaOH на кажд ые 10 мл воды . Для лучшего растворения ДНК смесь либо нагревают до кипения в водя ной б ане при постоянном перемешиван ии стеклянной палочкой , либо оставляют на ночь при 37 °С в термостате . К расплавленном у и остуженному до 50 °С МПА добавляют рабочий раствор ДНК из расчета 1 мг /мл (на 9 мл МПА— 1 мл раствора ДНК ), перемешиваю т , разливают по 10 л (л в пробирки , стерилизуют текучим паром в течение 30 мин или в автоклаве при 0,5 атмосферы в теч ение 20 мин . Срок хранения— 1 — 2 мес. При постановке опыта столбики агара с ДНК растапливают , в водяной бане добавляю т 0,1 мл официнального стерильного 10% р-ра Са СЬ , перемешивают и выливают на слой хорошо подсушенного питательного агара в чашки Петри и вновь подсушивают . Суточную агаровую культуру засевают маленькими бляшками (диаме тр равен 2 — 2,5 мм ) или штампом-репликатором не более 20 — 25 бляшек , во избежание с лияния зон деполимеризации ДНК . После 18 — 20-часовой инкубации поверхность агара зал ивают 5 мл IN раствора НС 1 и через 3 — 5 мин учитывают зоны просветления . Реакции оценива ют в крестах. При этом следует учесть , что интенсивн ость зоны деполимеризации на плотн ой среде не всегда совпадает с количеством п родукции этого фермента у исследуемых стафило кокков в жидких средах. Для обнаружения фибринолизина используют несколько усовершенствованный метод Кристи с сотр. Среда Кристи— Чепмена имеет следующий сос тав : мясной экстракт— 0,45 г , пептон— 0,75 г , хлористый натрий— 1,2 г , агар— 2,75 г , вода— 130 мл , рН среды == 7,0. Стерилизуется в автоклаве и сохраняется впрок. Перед опытом среду растапливают , остужают до 50 °С и добавляют 15 — 20% стерильной ци тратной человеческой плазм ы . Смесь прогре вается в водяной бане при 65 — 70°С в течение 2 — 5 мин до появления ясной мути , а затем разливается в чашки . Испытуемые культуры засевают “пятнами” по 15 — 20 на чашку . Посевы инкубируют при 37 °С . Учитываетс я образование зон просветления вокру г колонии первоначально через 14 ч , затем через 24 и 48 ч , так как реакция у разли чных культур течет неодинаково быстро и у ряда штаммов она развивается в более поздние сроки. Фибринолитический тест мы считаем весьма пригодным для определения потенциальной болезнетворности стафилококков , но оцениваем только в комплексе с другими признаками активности. Гиалуронидазная активность определяется по методу Мак-Клина в модификации М . Ш . Моги левского и Л . С . Коган (1949). Раствор гиалуроната дающий в присутствии 2 N уксусной кислоты типичный сгусток , р азливается по 0,5 мл в стерильные пробирки . Д обавляется 0,5 мл суточной культуры стафилококка в пептонной воде . Контролями служат : гиалуро пат + дистиллированная вода и гиалуропат + незас еянная среда . Смеси встряхиваютс я и выдерживаются при 37 °С 15 — 20 мин . Затем в каждую пробирку добавляется по две капл и 2 N раствора уксусной кислоты и встряхивается . В контролях должен образоваться слизистый комочек . В опыте при наличии гиалуронидазы он отсутствует , что свидетельствует о деполимеризации гиалуроновой кислоты микро бным ферментом. Для изучения токсигенности стафилококков удобно пользоваться методом , предложенным Илеком и Леви (1950), позволяющим определить типы гем олизинов. С этой целью готовятся чашки с пи тательным агаром , содержащим 5% отмытых физиол огическим раствором эритроцитов барана , кролика и человека. На поверхность питательной среды по д иаметру помещают стерильную полоску фильтровальн ой бумаги , смоченную альфа-антитоксической сыворот кой . Отступив 1 — 2 мл от края поло с ки , перпендикулярно к ней засеивают штрихами исследуемые культуры . Посевы инкубируют при 37 °С в течение суток , после чего учиты вают результаты. Альфа-гемолиз проявляется в виде полного просветления среды вокруг штриха культуры и нейтрализуется альфа-анти токсической сыво роткой . Он выявляется на средах с кроличьи ми и бараньими эритроцитами Бета-гемолиз на агаре с бараньей кровь ю дает частичное просветление , зона которого имеет буровато-пурпурный оттенок . Это “тепло-х олодовый” токсин и лучше выявляется после дополнительного суточного выдерживания чаш ек в холодильнике при температуре +4 °С по характерному послойному гемолизу бараньих эр итроцитов и не централизуется альфа-антитоксическ ой сывороткой . На кроличьих эритроцитах он не активен . Дельта-гемолизин опре д ел яется по узкой полоске гемолиза бараньих и кроличьих эритроцитов , не нейтрализуется ал ьфа-антитоксической сывороткой . Однако образование дельта-гемоли-зина на этих чашках может быть замаскировано действием альфа-токсина и поэт ому его следует проверять н а ср едах с эритроцитами человека или лошади . Т аким образом , для определения всех 3 типов гемолизинов достаточно использовать эритроциты б арана и человека или лошади. Для определения вирулентности стафилококков существуют несколько различных методов зараж ени я белых мышей. Наиболее простым является введение 0,1 мл суточной бульонной культуры испытуемого стафил ококка в хвостовую вену . Учет гибели живот ных осуществляется в течение 10 суток , регистрир уют наличие абсцессов в почках. Удобно пользоваться способом Ba denski и сотр . (1958), Суточная бульонная культура центрифугируе тся при 3000 об /мин — 30 мин . Полученный ос адок ресуспендируется в половинном объеме дек антата и в количестве 0,05 мл вводится 6 мышам позади глазного яблока в окологлазничную клетчатку . Куль т уру , вызывающую гибе ль половины и более зараженных мышей в течение 6 дней , считают вирулентной . При этих методах заражения вирулентной культурой у животных развивается общин сеп тический процесс с преимущественным поражением почек . Основная гибель мышеи пр оисходит на 3 — 5-й день после заражения. Другие способы заражения белых мышей ( внутрибрюшинный и интраназальный ) требуют в д есятки раз большей заражающей дозы , максимум гибели мышей приходится на 1 — 2-е сутки , что характеризует преимущественно токсический ко мпонент процесса (С . А . Анатолий , И . И . Антоновская , 1967). В то же время ряд исследователей отдают предпочтение более простому технически внутрибрюшинному способу заражения мышей , котор ый одновременно позволяет изучать клеточные и гуморальные механизмы ра звития инфекции. Сопоставление вирулентности стафилококков дл я белых мышей с отдельными факторами их патогенности показало , что вирулентность штаммо в , по данным большого числа исследователей , коррелирует с уровнем альфа-гемотоксина . Что касается других при знаков патогенности и их корреляции с вирулентностью , то по лучены разноречивые сведения . Так , по данным С . А . Анатолия (1969), вирулентность штаммов корре лировала с продукцией бета-гемолизина , летального фактора , лецитовителлазы , гиалуронидазы и коа гулазы. А . К . Акатов (1968) не отмечает кор реляции вирулентности с коагулазной , лециговител-л азной , фибринолитической активностью , не установле на корреляция с дельта-токсигенностью. Для сравнения вирулентности стафилококковых культур можно использовать их способн ость вызывать дермонекротическую реакцию у кроликов. Готовят 4-миллиардную взвесь суточной агар овой культуры стафилококка в физиологическом растворе , а из полученной густоты делают р азведения , чтобы получить 2- и 1-миллиардные взве си . Из каждого разведения в объеме 0,1 мл , что составляет 100, 200, 400 миллионов микробных тел , вводят кролику в выстриженную или депили рованную накануне кожу . На одном кролике м ожно одновременно поставить до 8 внутрикожных проб . Ежедневно отмечают проявления дермонекротич еской р еакции , а окончательно на 4-е сутки . За минимальную дермонекротическую дозу принимают то наименьшее количество куль туры , которое дает некроз на 4-е сутки ( Г . В . Выгодчиков , 1963). Список испол ьзованной литературы 1. А.М.Смирнова , А.А.Трояшкин , Е.М.Падерина : микробиология и профилактика стафилококков ых инфекций – “Медицина” , 1977. 2. Стафилококковые инфекции : российский сб . науч . тр . – С.-П ., 1991. 3. А.М.Смирнова : вопросы и ммунологии и микробиологии стафилококковых и стрептококковых инфекций – Ленинград , 19 75. 4. Лекция по теме. 5. Методическая разработка кафедры .
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
- А как там кошка? Всё нормально?
- В общем-то да... Только до этого ночью она улеглась в районе живота, когда я спала на боку, и заурчала. Я подумала, что это мой телефон на беззвучном, со всего размаха врезала кошкой себе по голове и сказала: "Алло!".
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, реферат по медицине и здоровью "Диагностика инфекций, вызываемых стафилококками", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru