Диплом: Комбинированное действие солей тория, свинца и гамма-излучения на мужские половые клетки лабораторных мышей - текст диплома. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Диплом

Комбинированное действие солей тория, свинца и гамма-излучения на мужские половые клетки лабораторных мышей

Банк рефератов / Биология

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Дипломная работа
Язык диплома: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Архив Zip, 48 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникальной дипломной работы

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Министерство обще го и профессионального образования Российской Федер ации Сыктывкарский государственный университет Химико-биологический факультет Кафедра физиологии человека и животных Допустить к защите : зав . кафедрой д.б.н ., проф. _____________В.Г . Зайнулин Дипломная работа Комбинированное действие солей тория, сви нца и гамма-излучения на мужские половые клетки лабораторных мышей Научный руководитель : с.н.с ., к.б.н . _____________ А.О . Ракин Исполнитель : студентка 153 группы ____ __________ М.С . Фис уп Сыктывкар 2000 Содержание Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Действие ионизирующего излуче ния на наследственные структуры 1.1.1. Дейст вие малых доз ионизирующего излучения на биологические объекты 1.1.2. Биологическое действие гамма-излучения 1.2. Влиян ие тяжелых металлов на генетические структуры 1.3. Особенности биологического де йствия инкорпорированных радионуклидов 1.4. Комби нированное действие факторов различной природы на клеточные структуры 1.5. Заклю чен ие Глава 2. Материалы и методы Глава 3. Результаты и обсуждени е Глава 4. Выводы Литератур а Краткие обозначения : ИИ – ионизирующее излучение ДЛМ – доминантные летальные мутации ПЛМ – поздние летальные мутации РЛМ – ранние летальные мутации АГС – аномалии головок спермиев ТМ – тяжелые металлы Введение В последнее в ремя остро стоит проблема биологической опасн ости и , в частности , генетической эффективност и малых доз мутагенов . До сих пор не существует единого мнения о наличии или отсутствии «пор оговой дозы» , хотя факт «пороговой чувствительности клетки» не оспар ивается практически никем . При этом наибольшу ю проблему в разрешении данной задачи пре дставляет взаимная «интерференция» трех отправны х точек при формировании генетического эффект а : мощно с ти дозы , времени воздейст вия мутагена и состояния генотипа . Т.о . зав исимость «доза-время-эффект» (Бурлакова , 1994) усложняется даже на предварительном этапе оценки вли яния малых доз на биологические объекты , о собенно если речь идет о природных популя циях. Не для кого не секрет , чт о именно малые дозы , в особенности ионизир ующие излучения (ИИ ), являются источником накоп ления генетического груза , ведущего к качеств енным изменениям в генетической структуре поп уляции и , в итоге , к осуществлению микроэв олюционны х событий. Нельзя не обратить внимание и на характер биологического действия мутагена , т.е . на критерий оценки его влияния н а организм - физический или химический . Если ИИ , в частности г- излучение - чисто физический фактор , а тяжелые металлы (ТМ ) - химическ ий , то безусловно смешанным действием обладают тяжелы е естественные радионуклиды (ТЕРН ). Причем гене тичес - кий эффект внутреннего облучения , котор ый демонстрируют ТЕРН значительно превышает т аковой от внешних источников ИИ при равны х поглощенных дозах (Ду б инин , 1978; Куз ин , 1991 и др .). Наконец , поскольку эти факторы в приро де практически не встречаются и не взаимо действуют в «чистом» виде , то необходимо д ать оценку их влияния на живые объекты в сочетаниях друг с другом . К тому же сведения о комплексном дей ствии ТМ , ТЕРН и ИИ в малых дозах крайне с кудны. Генетическая опасность ТМ и ТЕРН , в отличие от токсической , изучена на сегодняш ний день недостаточно , и результаты такого рода исследований довольно противоречивы . Особе нно мало данных по влиянию этих вещест в на генеративные клетки и ткани , отвечающие за возрастание эмбриональной смертнос ти и , особенно , за накопление генетического груза в популяциях . Поэтому несомненную важ ность приобретают исследования генотоксического действия ТМ , ТЕРН и ИИ на гаметогенез, в особенности на процесс формиров ания мужских половых клеток как значительно более уязвимых для мутагенных воздействий. Поскольку в природе в основном приход ится сталкиваться с низким и умеренным со держанием ТМ , ТЕРН и ИИ , то при проведе нии модельных экспе риментов по исследован ию их генотоксического гонадотропного действия особый интерес вызывает влияние концентраций этих веществ на 1-2 порядка ниже полулетально й дозы для млекопитающих (Левина , 1972), а проло нгированного г - излучения - на 2-3 порядка (Кузин , 1991). Наиб олее популярным объектом в такого рода ис следованиях являются лабораторные млекопитающие чистых линий , генетический полиморфизм в лабо раторных популяциях сведен к минимуму. В настоящей работе предпринята попытка исследовать генотоксическое дей ствие свинц а и тория (в виде водных растворов нит рата ) и пролонгированного г- облучения малой мощности при ф ормировании сперматогоний и ранних сперматоцитов у самцов мышей линии СВА генетическим и цитогенетическим методами . Таким образом нами изучалась чувс твительность половых к леток , находящихся на ранних стадиях спермато генеза к перечисленным мутагенам в «субвиталь ных» дозах и концентрациях. 1. Обзор литературы 1.1 Действие ионизирующего излучен ия на наследственные структуры ИИ обладает с ильным мутагенны м эффектом . Для мутагенно го действия наследственный материал является главной мишенью . Нарушение структурной организаци и приводит к изменениям в потомстве данно го организм , либо к его гибели . Существуют гипотезы о возникновении генетических перест роек . К п римеру , физиологическая гипо теза предполагает возникновение мутаций не в фазе непосредственного повреждения генетическог о аппарата , но при нетождественной репарации . (Лобашов , 1947). Предложенная В.И . Корогодиным (1966) гип отеза основывается на предложени и , ч то результат внешнего воздействия - потенциальные повреждения наследственных структур , переходящие в истинные. Первичные повреждения наследственного материала , вызванные ИИ , заключаются в од но - и двунитевых разрывах глюкозидной связи с последующим удале нием оснований из полимерной ДНК ; образующиеся деструктивные осно вания , «апуриновые , амидопириповые участки могут служить субстратом для специфических эндонукли аз . Азотные основания повреждаются в два - три чаще , чем однонитеевые разрывы фосфодиэфи рных св я зей . В свою очередь од нотиевые разрывы формируются на 1-1,5 порядка чащ е , чем двунитевые (Жестяников , 1979). Наиболее радио устойчивы - нуклиазидные связи в нуклеиновых к ислотах , они в 7-9 раз стабильнее , чем фосфод иэфирные (Кузин , 1973). Согласно теории Д. Кроузера (Ли , 1963) первичным актом является попадание кванта э нергии в определенную структуру , и ионизация , вызывающая повреждение , возникает именно в ней . Однако после открытия репарационных фе рментных систем стали очевидны возможности во зникновения ск р ытых повреждений . кото рые не всегда завершаются проявлением адекват ного радиогенетического эффекта (Корогодин . 1966). Структурно-метаболическая теория предвидит во зможность , когда в следствие радиохимических процессов в ядре клетки формируются вещества , вы зывающие повреждение структур ДНК и ДНП (Кузин , 1973). В конечном итоге , повреждения формируются в несгабильной структуре , исход которых м ожет быть либо возникновением точковых мутаци й и формирование хромосомных аберраций , либо первичные изменения могут бы ть репар ированы . При чем зависимость выхода точковых и хромосомных мутаций обусловлена различными механизмами возникновения этих двух типов мутаций . Например , различная мощность дозы н е влияет на выход точковых мутаций у дрозофилы , в то время , как уровень аберрантных перестроек увеличивался пропорци онально увеличению мощности дозы гамма-облучения . Сходные результаты при обработке линейных мышей рентгеновскими лучами получили П . Буу л и Дж . Гудзварт ( Buul , Goudzwart 1986, цирк . по Ракину ). В частности , наличи е гена , нарушаю щего рекомбинацию , под влиянием гамма лучей не вызывала увеличения частоты РЛМ у д розофилы , хотя выход гиперплоидных самцов при этом был различен ( Miyamoto , 1983, цит , по Ракину ). На выраженность радиогенетического эффекта может влиять митот ическая активность к летки . Чем больше времени проходит между д елениями клетки , тем больше событий аберрантн ой природы ( Gaulden , Weber , 1984, цирк . по Ракину ). Безусловно и то , что индукция хромосом ных аберраций зависит от дифференцировки клет ок . Большая ре зистентность больших лимфоц итов по сравнению с малыми объясняется те м , что у последних в процессе дифференциац ии сильно возрастает плотность спирализации Д НК , что ведет к утрате способности к э ксцизионной репарации ( George e . a .; 1987, цит . по Ракину ). Неод инакова радиочувствительность клеток различных тканей одного и того же ор ганизма . Это четко показал И . Буул при сравнении реакции на облучение сперматоцитов и клеток костного мозга мышей , в последних образуется в 4,5 раза больше аберраций , чем в половых к л етках . Аналогична картина и при сравнении сперматоцитов и клеток роговицы глаза мыши . Такое несоответ ствие можно объяснить различной активностью р епаративных энзимов в тканях выполняющих разл ичные функции . Частота возникновения аберрантных перестроек в од н ой о той же хромосоме и негомологичных парах хромосом одного генома то же различна. Выход хромосомных аберраций может зависет ь от параметров , таких , как пол особи ( Ватти , 1987), возраст , физиологическим состоянием клетк и и организма в целом . Однако хромосо мные аберрации могут возникать и без прямого воздействия ИИ за счет дестабили зации цепи ДНК , индуцированной в результате потери или модификации нуклеотидов , либо об разование ДНК-межнитевых сшивок чипа димеров тимина ( Liu , Heddle , 1981, цит . по Ракину ). На основании этих фактов можно предположить , что при действии ИИ на ДНК , первичные реакции начинаются с повреждения азотных оснований . В последствие нерепарируе мые повреждения фиксируются в виде точковых мутаций , а другая часть поломок вследстви е работы репа р ативных систем прео бразуется в хромосомные перестройки. Действие малых доз ионизирующ его излучения на биологические объекты Хроническое дейс твие малых доз ИИ на организм также о пасно , как и однократное воздействие мега-дозы излучения . Анализ данных о вы ходах генетических повреждений показывает «немонотонную» зависимость выхода мутаций от дозы радиа ции (Зайнуллин , 1998). Например , частота хромосомных аберраций в корневой меристеме прорастающих семян овсянницы луговой , собранных с гамма - поля , оказалась в ыше по сравнен ию с контролем , а однако эта зависимость не всегда была монотонной . Частота хлороф ильных мутаций среди всходов облучившихся сем ян , напротив оказалась ниже контрольного уров ня . Это может быть связано , как с высок им полиморфизмом данного показ а теля , типичным для дикорастущих видов , так и с явлением гомозиготации в малых изолирова нных популяциях (гамма - поле ) (Зайнуллин , 1993). Исследуя линии дрозофил спонтанный уровень доминантных леталий может колебаться (Ватти , 19б 5). При относительно низком ф оне радиации обнаруживается повышение уровней доминантных леталий (Шевченко , Померанцева 1985). Хроническое облучение в алых дозах пр иводит к заметному изменению величины генетич еского груза . Наряду с увеличением частоты мутаций (летальных , полулетальных ) снижающих жизнеспособность , возможно увеличение доли с упервитальных мутаций , приводящих к повышению жизнеспособности. При излучении реакции мышевидных грызунов на хроническое облучение в малых днях показано , что в большинстве случаев характе р зависимости «доза - эффект» имеет нелин ейных характер и во многом определяется г енотипом животного . Это можно наблюдать на полевке-экономке (со стабильным генотипом ) вивар ского содержания , мышевидных грызунов из зоны сильно загрязненной (Зайнуллин , 1998). Частота выхо да мутаций может быть обусловлена разной радиочувствительностью клето к (соматических и половых ), а также активно стью репарационных систем , стабильностью генома , физиологическим состоянием организма (Шевченко , 199б , Померанцева , 1969). УФ - лучи и органичес кие перекиси вызывают мутации нуклеиновых кислот (Ауэрбах , 1978). Существует ряд химических агентов , получи вших название «супермутагенов» , к которым отн осятся пестицды , этилметасульфонат , этиленамин и другие (Шварцман , 1973). В сочетании ИИ и суп ермутагены проявляют либо аддитивный либо синергический эффект , противоположным по действ ию являются радиопртекторы . Их действие основ ано на перехвате кванта энергии , электронов , либо образующегося в результате их действи я свободного радикала . К этим веществам от но с ятся тиолсодержащие соединения , ви тамины тиамин и цианобеламин , иденовые соедин ения . Радиопртекторы снижают вероятность формиров ания летальных повреждений и уже сформированн ых потенциально летальных повреждений в следс твие стимуляции систем пострадиационн о го восстановления. 1.1.2. Биологическое действие гамма-и злучения Гамма - лучи , возникают в результате ра диоактивного распада атомных ядер . Они облада ют высокой энергией и могут проникать в ткани . При этом они сталкиваются с атом ами , вызывают высвобождени е электронов и образование позитивно - заряженных свободных радикалов или ионов . Эти заряженные частицы сталкиваются с другими молекулами , что влеч ет за собой высвобождение новых электронов . Поэтому вдоль трека высоко - энергетического луча формируется ст е ржень ионов , проходящий в живые ткани . Такая трансформац ия электронной сети вызывает изменения различ ных структур в клетке , в частности мембран ного комплекса , органелл и ДНК. Выделяют наиболее радиочувствительные органы клетки , а также внутриклеточные сист е мы и процессы (перекисное окисление липидов , распад ДНК , автолиз белков ) (Кудряшов , 1987). Хара ктер повреждений структур зависит от степени сложности - ее пространственной организации. ДНК - это лабильная , сложная , надмолекулярна я четвертичная структура ; определяющим факто ром в радиочувствительности ДНК является ее пространственная организация в составе хрома тина , ее упаковка и связь с клеточными органеллами , с биологическими мембранами, Биологическим мембранам отводиться любая из основных функций которой является дл я клетки жизненно - необходимой (барьерная , тран спортная , рецепторно - сигнальная , регуляторно - ферм ентативная ). По мере увеличения дозы гамма - излучения наблюдается подавление механизмов акти вного и пассивного транспорта , нарушается про ницае м ость ионов калия . ( Chapmenn , Stuurrock , 1972, цит . по Кудряшеву ), Важным в исследовании биологических мембран является оценка их структурно - функ циональных взаимодействий с ДНК . Эта «пара» выступает кабы в виде единой гигантской системы , кооперативно реаг ирующей на по глощение энергии ИИ , Нарушаются ДЕ 1К - мемб ранные взаимодействия , происходит денатурация и деструкция макромолекул , нарушение их функций в облученных клетках (Владимиров , 1972). Основным свойством гамма - лучей является их способность разрушать слаженность б иологических реакций , их взаимосвязь , порядок , повреждать регуляторные функции системы. Живая система лишившись «контроля» перест ает существовать (Хансон , Комар , 1985). По мере усложнения биологической организа ции гамма - лучи способствуют об разованию и действию активных радикалов воды и липидов , радиотоксинов , усилению автолитических процессов , нарушению клеточной и нейрогуморальной систем регуляции . (Кудряшов , 1985). Следует отметить , что гамма - излучение поражает органы , клетки и структуры т есно взаимосвязанные с функциональной активность ю , например , радиорезистентных «некритических сист ем» (нейрогормональной системы , печени , тучных клеток и др .), сохраняющейся в облученном о рганизме в начальный период поражения (Корого дин , 1966). Наиболее радиочувствительным процессом при гамма - излечении является процесс свободн о-радикального перекисного окисления ненасыщенных липидов - липопероксидация (Владимиров , Арчаков , 1972). Гамма - излучения интенсифицирует пероксидацию л ипидов , в результате обра з уется из быток липидных токсических веществ , наступает деструкция мембраны (Ясуо Кагава . 1935, цит . по Кудряшову ). Надежность живых систем в отношении п оражающего действие гамма лучей обеспечивается активностью защитных ресурсов системы - биогенн ых аминов , тиолов , гормонов , эндогенных а нтиокислительных и антирадикальных систем (Гончар енко , Кудряшов , 1980). 1.2. Влияние тяжелых металлов н а наследственные структуры организма Тяжелые металлы в последние десятилетия являются одним из самых распро страненных фак торов загрязнения окружающей среды . В связи с этим назрела настоятел ьная необходимость на ряд вопросов о степ ени генотоксической опасности многих веществ , включающих в свои структуры ионы ТМ . Мнен ия различных исследователей о генетической ак тивности ТМ не о днозначны , поскольку функциональная роль металлов в организме д о конца еще не выяснена. Известно , что физиологическая роль некото рых ТМ обеспечивается их участием в клето чных структурах . Так , наряду с общеизвестными микроэлементами , представляющими атомы М n , F е , Ni , С u , Мо , Zn , и С r , оказывающих ста билизирующее действие на двойную спираль ДНК , а также играющих важную роль в орган изации третичной и четвертичной структур хром осом (Уильямс , 1975), возможна и определена роль ТМ в регуляции внутриклеточных проце сс ов , в частности , как было показано Мазиа (Ма zia , 1954) (ци т . по : Ракин , 1990) кобальт и никель регулируют кроссинговер , препятствуя возникновению структур ных нарушений нитей Д HК. Металлы способны связываться и с белк овыми структурами . Так в 1977 году в ц итолизосомах кишечного эпителия личинок дрозофил ы были обнаружены белковые образования , содер жащие ионы меди (Тарр , Нос kaday , 1977). Было высказано предло жение , что эти протеиды , названные металлотион инами , являются клеточными детоксикантами . Правиль ность этого предложения была подтверждена в 1987 году , когда было обнаружено резкое с нижение концентрации низкомолекулярных комплексов серебра и ртути , вводимых крысам в каче стве затравок , под действием медь - и кобал ьт содержащих металлотионинов ( Sugawara , 1987 ) (цит . по : Ракин , 1990). По мнению Д . Уильямса (1975), металлы в качестве микроэлементов могут находиться в ви де свободных ионов , выполняя регуляторные фун кции в клетке . Однако Б . Халлиуэл (1987), полага ет , что в виде свободных радикалов ТМ появляются в о рганизме крайне редко , п ричем происходит это в случае разрушения ранее существовавших комплексов и являются в этом виде сильнейшими клеточными ядами. Действительно , практически все металлы , по падающие в клетку , сразу связываются в орг анические комплексы , д аже находясь в в иде нерастворимой соли . Такие ковалентные и координатные комплексы проявляют не только стимулирующую , но и угнетающую активность , к оторая в основном зависит от атомарной ма ссы и электроположительности катионов металлов ( Talukderg , 1987) (ци т . по : Ракин , 1990). Резюмируя данные по генотоксической активности различных ТМ можно сделать вывод , что эти вещества , принимая форму органокомплекса , начинают проявлять мутаг енные свойства. Рассматривая механизмы повреждения наследств енных структур можно сказать , что под влиянием ТМ происходит повреждения третичной структуры хромосом , что ведет к частичной денатурации ДНК . При связывании двух валент ных ТМ с ДНК возможны мутации типа тр анверсий и транзиций (Лерина , 1972). ТМ могут вы зывать хромосомные абе р рации , индуцир овав точковые мутации , нарушать ферментные вз аимодействия , ингибируя отдельные энзимы . При этом соблюдается избирательная блокировка фермен тных систем . Каждый из металлов действует в строго определенных структурных точках энзи мов , вследствие чего появляется возмож ность подключить другие ферментные системы , ч тобы компенсировать такие взаимодействия . ТМ взаимодействуя с ферментными системами , могут замещать активный центр . ТМ , находясь в ци топлазме , изменяют насыщенность свободными радика лами в сторону их уменьшения. Ярким примером клеточных изменений являет ся свинец , который обладает гонадотоксическим действием (Харченко , Андреева , 1987). Отмечена способнос ть свинца , обладающего большим сродством к электрону , блокировать поступление в клетку кал ьция на рубеже внешней клеточной мембраны . Ингибирующее действие свинца на п роцессе синтеза ДНК и РНК объясняется под авлением им активности , полимераз . Ацетат свин ца может индуцировать рецессивные сцепленные с полом летальные мутации ( Jacobson - Kram , Mont albano , 1985). Нитрат свинца в малых к онцентрациях вызывает повышение уровня доминантн ых и рецессивных летальных мутаций у дроз офилы (Ракин , 1990). Особенности биологического действ ия инкорпорированных радионуклидов Естественные радионуклиды являются хи мическими токсикантами . Обладают способностью изл учать ИИ . Радиотоксический эффект инкорпорированн ых радиоактивных веществ превышают эффект от внешнего облучения (Рамад , 1981). При попадании радионуклидов в организм , облучение может п родолжаться в течении всей жизни . Мощность дозы облучения уменьшается со времен ем. Обширные исследования на животных показал и , что проявление биоэффектов при инкорпораци и радионуклидов , зависят от физических свойст в (тип и энергия излучения ), дозы , формы вводимого соединения , п ути и ритма поступления , особенностей распределения , эффективного периода полураспада , определяющего длительность лучевого воздействия , физиологических и гене тических особенностей организма . Например : торий . Период полураспада тория Т =1,39*10 10 . Поэтому в большей степени можно говорить о его токсичности , чем о радиационном факторе . Длительный к онтакт грызунов с природным торием приводит к усилению репаративных процессов в орга низме , что полностью не компенсирует нарушени е физиологического гомеастаза (Верхо в ская и др ., 1965). Безусловное значение имеет ви д , в котором торий поступает в организм , а именно сопровождающий его анион . Большую биологическую опасность представляют неорганиче ские соединения тория , чем комплексы. Биоэффекты обычно наблюдаются при накоп лении в тканях радионуклидов в дозах , значительно превышающих предельно допустимые в теле человека и животных . С увеличени ем дозы радионуклидов замедляется регенерация сперматозоидов , уменьшается масса семенников . Т акие эффекты проявлялись при введении в о рганизм Се , наблюдалось уменьшение массы семенников крыс на б 0% по сравнению с контролем . Также атрофия с еменников у крыс при поражении радионуклидом С s (Мос калев , 1985). При поступлении в организм НТО с питьевой водой , обнаружены атрофические изменения в семенных канальцах , их потомки им ели меньшие размеры тела и были более подвержены инфекции , у них часто развивалис ь инвазионные опухоли кишечника , в основе которых лежали наследственные изменения половых клеток ( Mewissen , 1983, по Москалеву , 1991). НТО мож ет инду цировать Д М на постмейотических стадиях сперматогенеза и реципрокные транслокации в с перматогониях. Гистологически в семенниках крыс после введения плутония выявлены канальцы с нару шенным сперматогенезом и измененным соотношением разных форм клеток . Изменения сперматог енеза в первую очередь относят к системе сперматогония-сперматиды . Начальная стадия сперма тогенеза редуцирована , еще более уменьшена ге нерация сперматоцитов первого порядка . В этих клетках нарушен мейоз , о чем свидетельств ует наличие д вуядерных сперматоцитов и клеток с крупным ядром . Количество кл еток Лейдига увеличена , что является морфолог ическим выражением дисгормональной перестройки э ндокринной части яичек . Мелкоклеточная лимфоцитар ная инфильтрация стромы свидетельствует об ау тоимм у нных процессах в этом орган е , завершающихся деструкцией половых клеток , в результате чего нарушатся оплодотворение (Ра йцина 1985 по Москалеву , 1991). Особенностью биологического действия инкорпо рированных радионуклидов определяется активной р олью организма в формировании тканевых доз из-за наличия транспортных иметаболических процессов , обуславливающих накопление , проявление эффектов , выведение радионуклидов из определенн ых органов и тканей. Комбинированное действие факторов различной природы на клеточные структуры Рассматривая многоклеточные организмы как совокупность взаимосвязанных между собой клето к , находящихся на разных стадиях развития , можно понять важность познания проблемы соче танного действия факторов различной природы н а клеточные структуры . П роблема комбиниро ванного действия факторов физической и химиче ской природы на клеточные структуры в нас тоящее время актуально с точки зрения рад иобиологии и экологии . Исследование эффектов клетки позволит нам сделать выводы о ее состоянии , а следовательно и об организме. Сочетанное действие физических и химических факторов В представленных научным комит етом ООН по эффектам атомной радиации в отчетах ( UNSCEAR , 1982, цит . по Ракину ), выделены два класс а количественной оценки эффектов сочетанного действия разл ичных факторов : 1. Наблюдаемый эффект вызван действием обоих агентов (ИИ и кофактором ). Здесь отмечаются три частных случая сочетанного действия факторов : а . интегральный эффект равен по значен ию сумме эффектов раздельно-действующих софакторо в (аддитивнос ть ); б . интегральный эффект выражен менее , чем это бы имело место при сложении р езультатов действия факторов порознь (антагонизм ); в . интегральный эффект превышает по зн ачению сумму эффектов , действующих независимо софакторов (синергизм ). 2. Этот класс вкл ючает наблюдаемый эффект - результат модифицирования действия одн ого из агентов другим , неактивным самим по себе . Сюда относятся два варианта с п ротивоположным действием : а . резкое снижение ИЭ неактивным агент ом (протекция ); б . резкое повышение эффекта неа кти вным агентом (сенсибилизация ). Комбинированное действие ИИ и физических факторов Сочетание факторов и их действ ия на живой объект может носить различный характер . Например , при действии лазерного излучения и гамма - лучей Со на дрожжи S . Се r е visae неск ольких штаммов отмечен аддитивный характер взаимоде йствия факторов по выживаемости (Петин , 1987). В экспериментах , выполненных на Zea mays , при действии на этот объект ультразвука и рентгеновск их лучей также обозначен аддитивный эффект . Другие исследовател и обнаружили синергизм действия ультразвука и ИИ на клетки кишечной палочки и млекопитающих ( Martins е.а ., 1977, Graid, 1977). Обнаружившие синергизм , авторы отметили , что если ультраз вук вызывает мембранные повреждения , то ИИ - ядерные , то есть синергизм может быть результатом этих двух типов повреждений. Гипертермия является сенсибилизирующим агент ом . Однако клетки млекопитающих более чувстви тельны к воздействию температуры и ИИ по сравнению с дрожжевыми . Проведенные В.Г . П етиным исследования на диплоидны х и г аплоидных штаммах дрожжей E. magnusii , Z. Bceilli , подтверждают вывод о сине ргичном характере взаимодействия гипертермии и ИИ. Следует ожидать , что плотно ионизирующие излучения вызывают большую долю необратимых повреждений , чем редко ионизирующие. С овместное действие ИИ и химических агентов Такое действие вызывает разные повреждения в клетке в частности , такая комбинация иприт и рентгеновские лучи дает сходства генетических эффектов так как о ни действуют непосредственно на мишень , то есть «разрывают > > хромосомы . При взаимод ействии ИИ с азотной кислотой происходит в РНК - генах замена оснований . В ДНК с паривание уроцила с аденином приводит к т ранзиции гуанин - цитазин на аденин - тимин ( Ауэрбах , 1978), так же азотная кислота может ин дуцировать делеции, так как она способст вует поперечному сшиванию двух цепей ДНК ( Schuster , 1960, цит . по Ауэрбаху ). УФ - лучи и органические перекиси вызы вают мутации нуклеиновых кислот (Ауэрбах , 1978). Существует ряд химических агентов , получивших название «супермут агенов» , к которым относятся пестициды , э тилметасульфонат , этиленамин и другие (Шварцман , 1973). В сочетании ИИ и супермутагены проявляют либо аддитивный либо синергический эффект , противоположным по действию являются радиопрте кторы . Их действие основано на пере х вате кванта энергии , электронов , либо образующегося в результате их действия свобод ного радикала . К этим веществам относятся тиолсодержащие соединения , витамины тиамин и цианобеламин , иденовые соединения . Радиопртекторы снижают вероятность формирования ле т а льных повреждений и уже сформированных потенц иально летальных повреждений в следствие стим уляции систем пострадиационного восстановления. 1.5. Заключение Мутагенчувствительно сть сперматогенных клеток Исследования генетических эффектов в процессе гамето генеза , индуцированного радиацией , позволили определить радиочувствительно сть разных стадий этого процесса. При изучении разных видов генетических повреждений (ДЛМ , РЛМ , ПЛМ ) было обнаружено , что у самцов мышей половые клетки нахо дящихся на разных стадиях сперматогенеза , располагаются по мере возрастания генетической радиочувствительности в следующем порядке : с перматогонии , сперматоциты , сперматозоиды , сперматиды (Померанцева , Рамайя , 1969). Причины различно й генетической радиочувствительности половых кле то к , находящихся на разных стадиях гам етогенеза , еще окончательно не ясны . Результат ы исследований позволили предположить , что эт и причины обусловлены комплексом факторов : ос обенностями метаболизма клеток , степенью конденса ции хромосом , уровнем насыщения кл е ток кислородом , относительной продолжительнос тью стадий ядерного цикла , чувствительностью к летальному эффекту радиации , количеством ра диозащитных веществ в цитоплазме , интенсивностью работы системы репарации (Шапиро , 1964). Сперматозоиды более чувствитель ные , чем оогонии , т.к . несут генетическу ю информацию и накапливают генетический груз . В оогониях меньше нарушений , т.к . они сразу закладываются в организме в определенно м количестве и более защищены природой . Сп ерматозоиды являются основным вкладчиком изм е нчивости . В них часто возникают мутации нейтральные , но бывают неблагоприятн ые . Поэтому они менее конкурентоспособные при проникновении в яйцеклетку (Ватти , Тихомирова , 1976). На радиочувствительность половых клеток б ольшое влияние могут оказывать биохимич ес кие преобразования , происходящие в процессе г аметогенеза . Так , в сперматидах происходит зам ещение муцинбогатого гистона соматического типа новым типам гистона , характеризующимся высок им содержанием аргинина (Кузин , 1973). В половых клетках самцов мышей , подвергшихся воздействию мутагенов или рентгенов ских лучей , уровень диссоциации ДНП и дена турации ДНК снижается по мере трансформации сперматогониев в спермоциты и спермии . Эт и изменения сопровождаются упрочнением нуклеопро теидного комплекса . (Стаканов , 1 9 77). При воздействии хемотерапевтических препарат ов мутации проявляются в сперматогониях , т.к . они более чувствительны . Клетки на более поздних стадиях развития , когда находятся в процессе мейотического деления более резесте нтны . Слабо пролеферирующие ство ловые спе рматогонии проявляют среднюю чувствительность ( Messtrich , 1984). Стволовые сперматогонии при воздействии м алых доз гамма-излучений от 0 – 8 Гр являлись в 6 раз более резистентными , чем клетки костного мо зга у хомячка. Таким образом механизмы мутаг енного действия ИИ и ТМ на генетические стр уктуры биологических объектов носят различный характер . Нарушения наследственного аппарата пр и действии этих веществ порознь , как прави ло , имеют различную природу , однако , механизмы репарации таких повреждений ед и н ы , и выход мутаций обусловлен именно спосо бностью клетки компенсировать вред , нанесенный мутагенами . При сочетанном действии ТМ и ИИ часто вступают в силу эффекты проте кции и сенсибилизации . При этом большое зн ачение имеют дозы и концентрации (их соотн ош е ние ) действующих совместно факторо в (Витвицкий и др ., 1996). В целом же доскона льно механизм ы взаимодейст вия мутагенов не выяснены. 2. Материалы и м етоды Для работы использовали мышей линии С ВА в возрасте 3 – 3,5 мес . Нитрат свинца и тория в концентрация х 0.03, 0.1, 0.3 г /кг веса (в пересчете на содержание иона свинц а Pb 2+ и тория Th 4+ вводили самцам с питьем и облу чали гамма-излучением 1,8 Гр в течении месяца. По истечении 30 суток после снятия возд ействия (продолжительность сперматогенеза у мыши – 35 су ток ) по 5 самцов из каждой группы отсаживали индивидуально с 4 - 5-ю однов озрастными интактными самками для определения уровня ДЛМ . Через 16 – 18 дней после начала спаривания осуществляли забой самок и по дсчет желтых тел в яичниках , а также ж ивых эмбрионо в и резорбций в ма тке . По процентному соотношению этих показате лей определяли эмбриональную смертность : ранние доминантные летали (РДЛ ) = сумма эмбрионов и резорбций / количество желтых тел., поздние летали (ПДЛ ) = количество резорбций / количество желтых тел., общая эмбриональная смертность (ДЛМ ) = колич ество эмбрионов / количество желтых тел. По 10 самцов через 35 суток после снятия воздействия забивали для определения уровней АГС . При приготовлении использовали стандарт ную методику ( Soares et al., 1979) в модификации А.О . Ракина : эпи дидимус самца измельчали на часовом стекле в 2-3 каплях физраствора , затем прибавляли 2-3 ка пли 10%-го воднорастворимого эозина , после чего пипеткой отделяли эмульсию и переносили ее на препаровальное стекло , распределяли по н ему и высушивали при комнатно й температуре . Готовый препарат анализировали под микроскопом , подсчитывали количество аномалий в выборке из 500 спермиев. Статистическую обработку данных проводили с применением стандартного пакета программ " Microsoft Excel – 7 ", для определения достоверности различий использовали критерий малых доз Фишера (Пло хинский , 1980). 3. Результаты и обсуждение Исследование генотоксической эффективности и онов свинца , вводимых в организм в субвита льных концентрациях (1 – 10% ЛД 50/30 ) ( Левина , 1972), было сосредоточен о на наиболее уязвимой стадии сперматогенеза – этапе формирования сперматоцитов (померан цева и др ., 1988). В этом отношении сроки те стирования ДЛМ и АРГ должны обеспечивать детекцию мутационных событий , имеющих сходные меха н измы реализации (Мендельсон , Серг еева , 1990). Необходимо отметить , что применяемые н ами концентрации нитрат-иона не являются мута генными (Ракин , 1990), что позволяет рассматривать в качестве генотоксического фактора только со держащийся в соединении свинец. Доминантные летальные мутации. Поскольку доимплантационная (ранние доминантные летали ) (РЛД ) и постимплантационна я гибель эмбрионов (поздние доминантные летал и ) (ПДЛ ), как правило являются результатом н арушения различных наследственных механизмов , то мы с очли необходимым разделить их на анализ. 1). В таблице 1 и на рисунке 1 представле ны результаты определения уровней РДЛ , ПДЛ и суммарных леталей (ДЛМ ) у групп самцов , подвергнутых затравке свинцом в различных концентрациях . Как из представленных данных , РД Л в 1-м , 3-м и контрольном вариа нтах показатели опыта практически не отличают ся . Исключении составляют результаты анализа этих параметров в варианте 2, частота РДЛ . В этом случае достоверно ниже таковой в контроле (Р 0,001). По скольку физиологическое состояние интактных самок , использованных в эксперимен те было одинаковым , то можно предположить , что у самцов из варианта 2 происходит сниж ение оплодотворяющей способности спермиев или внесение в зиготу таких нарушений генома , кото р ые препятствуют дроблению яйц а (Шевченко , Померанцева , 1985). Таким образом , по критерию РДЛ генетически эффективной оказалась концентрация свинца 0,1 г /кг. При анализе ПДЛ , являющихся по мнению многих исследователей истинными доминантными леталями (Ватти, 1965; Мендельсон , Сергеева , 1990; Р акин , 1990; Померанцева , Рамайа , 1993; и др .), была об наружена тенденция снижения эффекта по мере роста концентрации свинца . Наименьшая частот а ПДЛ зафиксирована в варианте 1 (5,7%), а наибо льшая – в варианте 3 (12,1%) ( Р 0,05). при этом значения леталей в контроле не имеют д остоверных различий с данными , полученными пр и анализе результатов каждого отдельно взятог о варианта опыта . Можно отметить , что гено токсичность минимальной концентрации затравки больше , чем максимальной , а по отношению к контролю эффективность свинца (по крите рию ПДЛ ) несущественна. При рассмотрении суммарных значений ДЛМ прослеживается дозовая динамика нарушений , с хожая с таковой РЛМ , когда концентрация св инца 0,1 г /кг и ндуцирует статистически д остоверно меньше повреждений , чем при спонтан ном мутагенезе (Р 0,05). Повышение частоты ДЛМ в вариа нтах 1 и 3 по сравнению с контрольным значен ием параметра не достоверны. Подобные нелинейные эффекты вы хода генетических нарушений были весьма показательн ы и в других исследованиях (Петин , 1997; Герась кин , 1996). В нашем случае при концентрации сви нца в интервале от 0,03 до 0,1 г /кг , вероятне е всего был превышен "порог поражаемости " для типа нарушений , вле к ущих за собой формирование ДЛМ (реципрокные транслокаци и и крупные хромосомные аберрации ) (Шевченко , Померанцева , 1985). При дальнейшем повышении концент рации затравки репаративные системы уже не справлялись с возрастающим количеством мутацио нных событий, что привело к повыше нию уровня нарушений. 2). При гамма-излучении животных выявлено значительное увеличение уровней эмбриональной см ертности (на всех этапах ) по сравнению с контролем (Р 0,001) (см . Табл . 3 и рис . 3). Это явно с видетельствует о высокой мутагенной актив ности ИИ данной интенсивности . Очевидно , что репаративные системы клеток не способны бы ли полностью компенсировать повреждающее действи е гамма-излучения. 3). Комплексное воздействие ИИ в дозе 1,8 Гр и свинца в конце нтрациях 0,3 и 0,1 г /кг (см . Табл . 3 и рис . 3) выявило значител ьный генотоксический потенциал сочетаний данных мутагенов по критериям РДЛ и ДЛМ (Р 0,05). В т о же время результаты обработки мышей сви нцом в концентрации 0,03 г /кг в совокуп ности с гамма-облучением позволяют сделать вы вод о низкой мутагенной активности данного сочетания воздействующих факторов . Таким образо м можно с уверенностью сделать вывод , что "порог поражаемости " сперматогониев меньшей п о критериям РДЛ и ДЛМ п р и воздействии гамма-излучения в дозе 1,8 сГр наход ится в промежутке концентраций свинца 0,1 и 0,03 г /кг . Анализ уровней ПДЛ во всех вар иантах комплексной обработки мышей не выявил статистически достоверных различий с частото й этих нарушений в контрольной г руппе , что позволяет сделать заключение о низкой генетической эффективности сочетанной затравки при индукции постимплантационной ги бели. Исследование монотонностей дозовых зависимос тей выхода РДЛ н ДЛМ однозначно свидетель ствует об их линейном характере ( r рдл = 0,9011 ( P<0,01); r длм = 0,9468 (р <0,001)). В случае же анализа ряда ЛДЛ прямая д озовая зависимость не прослеживается ( r = 0,1491). Таким образо м , можно с уверенностью сделать вывод о том , что индуцируемые комплексом комутагенов ПДЛ не зависят от за травки в да нном диапазоне концентраций свинца и при указанной дозе гамма-излучения. Нами был произведен расчет коэффициентов сочетанного действия (Ракин , 1991) по формуле : S = (Q-q)/Q, (Q = m + l – (n M + n L ); q = k – n K ), где m , l и k - значения пар аметра при действ ии соответственно факторов М , L и М + L , а n M , n L и n K - спонтанные ур овни . Необходимо отметить , что применение форм улы не корректно в случае Q 0, как и при значея иях m , l и k близких n. Расчет значений S с не применением регрессионного ана лиза позволяет выделить "интервал аддитивности ", в который не попадают данные , отражающие антагонистические (< 0) или синергические эффекты ( 0). Данные , представленные в Таблице 3 свидетел ьствуют , в основном об антагонистическом и аддитивном эффектах сочетанного действия обозначенных факторов . Исключение составляет ва риант обработки мышей облучение + 0,1 г /кг Р b по кри терию РДЛ , где прослеживается явный синергиче ский эффект . Индукция же ПДЛ во все х случаях комплексной обработки имеет антагонистический характер . Таким образом можно заключить , что истинный показатель генотокси чности сочетаний гамма-облучения и указанных концентраций свинца – постимплантационная гибел ь эмбрионов – снижается при компл е ксном воздействии мутагенов , в отличии от вариантов их раздельного на сперматогон ии мышей . Это согласуется с данными других исследователей (Витвицкий и др ., 1996). То есть , предположительно , "включение " механизмов репараци и более высокого уровня обеспечив а ет более низкий уровень выхода генети ческих нарушений. В таблице 2 (рис . 2) представлены частоты РЛМ , ПЛМ и ДЛМ у групп самцов подвергн утых затравке торием и гамма-облучением. Уровни РЛМ статистически достоверно превы шали контрольные значения , как видно на иллюстрациях , при максимальных и минима льных нагрузках при обработке животных -излучением и торием порознь ( P 0.01) . Максимальная степень воздействия индуцировала возникновение практически схожих частот леталей (17,6 и 17,4% соответственно ) при обработке торием в совокупности с облуче нием в дозе 1,8 сГр ( P 0,05). При анализе дозовой з ависимости выходы нарушений по критерию РЛМ во всех вариантах эксперимента не наблюд ал и линейного характера , что подтверждает ся статистическими методами . Однако , некоторая схожесть дозовых динамик нарушений была вы явлена при попарном анализе частот РЛМ пр и раздельной обработке мышей ИИ и торием ( r = 0.881 0.10) , при воздействии радиации и тория в сов окупности с облучением в дозе 1,8 сГр ( r = 0,8387 0,09) и при сравнении результатов затравки торием и торием в сочетании с облучением в дозе 1,8 сГр ( r = 0,8785 0,07) (во всех случаях P < 0,01). Если принять во внимание , что схожесть дозовых динамик была отмечена п ри сопоставлении частот АГС , индуцированных в оздействием тория и тория в сочетании с облучением в дозе 1,3 сГр (см . выше ), то в данном случае м ожно говорить о том , что при затравке торием и минимальной радиационной нагрузке отмечается синхронность в процессах формирования повреждений генного характера , реализуемых в АГС и РЛМ. Постимплантационные потери чаще встречаются при средних и малых стресс ирующих нагрузках . Исключение составляет статистически превышающий спонтанный уровень показатель параме тра при затравке торием в совокупностью с г- облучением в дозе 1,8 сГр (11,1%; Р <0,01). В случаях обработки мышей по отдельности торием или свинцом , а та кже свинцом и ИИ значимых превышений контрольных параметров не отмечено . Возможно при г- облучении в малых дозах «порог чувств ительности» генеративных клеток на коком-то э тапе оказался ниже дозы 1,8 сГр , и при до стижении максимальной радиационной нагрузки « включился» механизм репарации повреждений более высокого уровня. По критерию ПЛМ не было отмечено монотонной линейной дозовой зависимости . Проведен ный же корреляционный анализ выявил схожесть дозовых динамик выхода нарушений при сра внении таковых в вариант е при затравк е торием и торием в сочетании с г- облучением в до зе 1,8 сГр ( r = 0,7799 0,05; Р 0,05), что было выявлено при аналогичном сопоставл ении частот РЛМ (см . Выше ). Аномальные головки сперм и ев . Анализ частот , индуцированных различными концентрациями свинца , структурных нарушений строения спермиев представлен в таблице 3 и на рисунке 3. Как и в случае исследования уровней ДЛМ , четкой дозовой зависимости выхода нарушений нет . Однако , в отличии от картины от картины , наблюд аемой при анализе ДЛМ , частоты АГС , индуци рованные даже самой малой концентрацией токси канта значительно превышают контрольный уровень ( P 0,001 ). Это явно свидетельствует о высокой генотоксич ност и свинца при возникновении точковых мутаций , мелких делеций и соматических на рушений в организме , реализующихся в виде АГС (Шевченко , Померанцева , 1985). Минимальное статистич ески достоверное отличие уровней АГС в 3 - м и 2 - м вариантах может свидетельст в овать о том , что "порог поражаемости " и "репаративная емкость " компенсаторных систем были превышены при концентрациях меньших , но достаточно близких к таковой в вари анте 3. Таким образом , наши исследования показали , что свинец не индуцирует (в этих низк их концентрациях ) "крупных хромосомных аберр аций ". В то же время , свинец является в есьма генотоксичным в отношении индукции точк овых мутаций и мелких делеций . Анализируя соотношение данных по детекции АГС и ПЛМ , нужно заметить , что существует статистически д остоверная (Р 0,05) корреляция между этими параметрами : r = 0.721 0.03 что м ожет свидетел ьствовать об однонаправленности процессов компен сации упомянутых генетических повреждений . В связи с этим можно предположить , что свинец является эффективным мутагеном в ис следованном градиенте концентраций по критерию маломаштабных генетических повреждений , результато м чего в итоге являются ПЛМ и АГС (соответственно в меньшей и большей степени ) ( Шевченко , П омеранцева , 1985; Харченко , Анд реева , 1987). Одновременно следуе т отметить , что именно в выбранном диапазо не концентраций не наблюдается статистически достоверных коэффициентов регрессами , что указыва ет на отсутствие прямых дозовых зависимостей выхода гене тического эффекта по всем исследованным параметрам . И если по крите рию АГС можно смело утверждать , что "порог чувствительности " находится ниже минимальной концентрации свинца , по критерию ДЛМ как раз в промежутке для 1-го и 3-го вариант ов эксперимента. В т абл . 4 и на рис . 4 представлены результаты подсчета частот АГС во всех обследованных группах . Значительное превышение опытных и контрольных уровней данного парамет ра при раздельных облучении и затравке то рием может быть объяснено некоторой генетичес кой не с табильностью генотипа лаборато рной популяции мышей в момент проведения эксперимента . В целом необходимо отметить ста тистически значимое превышение спонтанного уровн я нарушений (Р < 0,05) во всех опытных группах при сочетанной обработке грызунов торием -облучением в дозе 1,8 сГр , а также при затравке свинц ом . Максимальные дозы явились генетически эфф ективными при сочетанном действии тория и облучения во всех вариантах , а также пр и комплексной обработке животных свинцом и радиац ией . Случаи статистически достоверног о превышения этого параметра под воздействием на объекты минимальных доз отмечены при раздельном -облучении , при затравке торием с сопу тствующей радиоактивной нагрузкой в дозе 1,8 сГр и пр и комплексной обработке мышей свинцом и -излучением. Отсутствие линейной дозовой зависи мости при воздействии на биологические структ уры малых доз мугагенов отмечено многими авторами (Кузин , 1991; Спитковский , 1992; Бурлакова , 1994; и др .). Поэтому внешнее отсутствие эффекта при более мощных воздействиях может быть объяснено различными точками зрения на характ ер выхода нарушений . Вполне пригодна для о бъяснения такого рода явления концепция поэта пного включения репаративных си с тем в клетке , подвергнутой стрессирующему воздей ствию внешних факторов (Зайнуллин , 1988; Спитковский , 1992). Это может свидетельствовать об адекватной реакции репаративных клеточных структур на дополнительное радиационное воздействие . В данн ом случае можн о сделать предположен ие , что при сочетанном действии -излучения и тория при средней концентрации металла был пре вышен порог чувствительности к стрессору « n -го» поря дка ( < 0,03 г /кг ), но не достигнут порог пор ядка « n +1» (0,1 г /кг ). Природа нарушений , приводящих к изменению формы головок спермиев выяснена недостаточно четко . Имеются данные , что повышение част оты АГС у мышей не связаны с реципрок ными транслокациями или крупными хромосомными аберрациями , а обусловлено точковыми му тациями или мелкими делециями , а также сом атическими повреждениями в организме (Шевченко , Померанцева , 1985). Исходя из этого АГС - результ ат нерепарированных генных повреждений , которые далеко не в полной мере скринируются п ри контроле качества наследств е нного материала цитогенетическими методами и . соот ветственно вносят существенный вклад в нараст ание генетического груза в популяциях. В таблице 5 (рис . 5) представлены значения коэффициента S , расчитанные для всех критериев оценки ген-эффекта. Как видно из иллюстраций , основной массив данных имеет отрицательное значение коэффициента , что явно говорит о тенденции к демонстрации антагонистического эффекта . В то же время , учитывая , что расчетный « интервал аддитивности» составил -0,71...+ 0,71, то с увер енност ь ю говорить об антагонистическо м характере взаимодействия металла и ИИ в нашем случае можно лишь при рассмотрении вариантов комплексной затравки торием и облучением в дозе 1,8 по критериям эмбрионально й смертности , где все значения S ниже «порога» аддитивно сти . В остальных случаях отмеч ены как аддитивные , так и антагонистические эффекты , причем , как правило , не позволяющие вывести закономерных связей по критерию «доза-эффект» . В целом же необходимо отметить как более информативные группы данных зн ачения S , р ассчитанные для АГС и эмбриональной с мертности , в которых выше регистрируемая доля аберрантных событий . С уверенностью можно говорить , что минимальные концентрации свинца и тория в сочетании с внешним облуче нием по указанным выше критериям вызывают антаго н истический эффект , свидетельству ющий о том что в уровни комбинированного стресса не превышают репарационных возможнос тей стабилизирующих геном систем данного уров ня , что , как правило происходит при превыш ении концентрации ТМ и ТЕРН 0,03 г /кг. Поведение сви нца и тория в ор ганизме , и в частности при их воздействии на генеративные структуры , различно , но в силу их некоторого химического сродства возможна компенсация их генотоксического воздействия одним и и теми же репаративными системами . Кроме того необходимо отметить , что слабая интенсивность б - и г- излучений тория в таких субвитальных концентрациях вряд ли может быть причиной биологического эффекта ( Blaylock, Shugart , 1972). Веро ятно, интерпре тация данных была бы более корректна и информативна при расширении градиентов д оз и конц ентрации в эксперименте. 4. Выводы В большинстве вариантов обработке мышей мутагенами отсутствует прямая дозовая зависи мость . За исключением воздействий свинца и облучения 1,8 сГр по критерию РЛМ и при воздействии тория и облучения 1,8 сГр ; сочетанное действие факторов характеризуется либо аддитивным , либо антогонистическим дейс твием практически по всем критериям оценки генетического эффекта ; концентрации тория и свинца 0,03 г /кг в сочетании с внешним г – облучением вызывают ант огон истический эффект при оценке уровней АГС и эмбриональной смертности. ЛИТЕРАТУРА Ауэрбах Ш . Проблемы мутагенеза . М .: Мир . 1978. С . 253-335. Ватти К.В . О зависимости частоты мутац ии от дозы облучения в связи с чувств ительностью примейотических и постмейот ическ их стадий сперматогенеза // Генетика . 1965. № 4. С .94-99. Ватти К.В ., Тихомирова М.М . Адаптация и мутагенез // Радиационный мутагенез и его роль в эволюции и селекции . М . 1987. С .127-141. Ватти К.В ., Тихомирова М.М . Спонтанные и индуцированные радиации ДЛМ у самок и самцов дрозофилы // Исследования по генети ке . Л .: ЛГУ . 1976. вып .6. С . 32-44. Верховская А.И . Радионуклиды в организме . М . 1988. С . 20-44. Витвицкий В.Н ., Бахитова Л.М ., Соболева Л. С ., Шевченко В.А . Модификация мутагенных эффекто в гамма-излу чений солями тяжелых металлов // Известия РАН . Серия биологическая . 1996. № 4. С .495-498. Владимиров Ю.А ., Арчаков А.И . Перекисное окисление липидов в биологических мембранах . М . 1972. С . 20-35. Гончаренко Е.И ., Кудряшов Ю.Б . Химическая защита от лучевого п оражения . М . 1985. С . 24-37. Жестянников В.Д . Репарация ДНК и ее биологическое значение . Л . 1979. 285 с. Зайнулин В.Г . "Доза-эффект " в исследовании эффектов малых доз радиации // Радиочувствительн ость растений и животных биогеоценозов с повышенным естестве нным фоном радиации . С ыктывкар . 1988. 93 с. Корогодин В.И . Проблемы пострадиоционного восстановления . М . 1966. С . 50-60. Кудряшов Ю.Б . Лучевое поражение . М . У . 1987. С . 48-60. Кузин А.М . Молекулярная радиобиология клет очного ядра . М . 1973. 208 с. Левина Э. Н . Общая токсикология мет аллов . Л .: Медицина . 1972. 221 с. Ли Д.Е . Действие радиации на живые клетки . М . 1963. 288 с. Лобашев М.Е Физиологическая гипотеза мута ционного процесса // Вестн.ЛГУ 1947. Т .8. № 1. С .10-29. Мендельсон Г.И ., Сергеева А.С . Исследовани я генетической детерминированности ДЛМ у дрозофил // Генетика . 1990. Т . 26. № 6. 1019 с. Москалев Ю.И . Отдаленные последствия иониз ирующего излучения . М .: Медицина . 1991. 300 с. Москалев Ю.И . Современные представления о действии ионизирующего излучения на м лекопитающих и проблемы нормирования // Мед ицинская радиобиология . 1985. № 6. С . 66-72. Петин В.Г . Генетический контроль модификац ии радиочувствительности клеток . М . 1987. 125 с. Плохинский Н.А . Алгоритмы биометрии . М .: МГУ . 1980. 150с. Померанцева М.Д ., Ра майа Л.К . Мутаген ный эффект излучений разных видов на поло ве клетки самцов мыши // генетика . 1969. Т .5. № 5. С . 103-112. Померанцева М.Д ., Рамайя Л.К . Генетический эффект инкорпорированного Cs у самцов мыши у однократ ном введении изотопа // Радиобиология . Н аука . 1993. Т .33. № 1(4). 564с. Ракин А.О . Хроническое действие тяжелых естественных радионуклидов и металлов на г енетическую структуру популяций дрозофилы : Дисс… канд . биол . наук . Сыктывкар . 1990. 146 с. Рамайя Л.К ., Померанцева М.Д . Изучение му тагенного действия кадмия на половые кл етки самцов мыши // Генетика . 1977. Т .13. № 1. 89с. Спитковский Д.М . // Радиобиология 1992. Т . 32 вып . 3. С .382-400. Стаканов В.А . Влияние ионизирующей радиаци и на ДНП и ДНК клеток семеника : Авторе фера дис.б.н . Медицина : ин-т би офизики АН СССР . 1972. С . 29. Хансон К.П ., Комар В.Е . Молекулярные меха низмы радиационной гибели клеток . М . 1985. С . 6-14. Харченко Т.Н ., Андреева С.К . Гонадотоксическ ое действие ацетата свинца в эксперименте на белых крысах // Доклад АН УССР . 1987. Т . 6. № 5. 81с. Шапиро И.И . Генетическое действие малых доз . М .: Наука 1964. С . 131-188. Шварцман П.Я ., Анисимов А.И . Изучение мех анизма инактивации и мутагенеза при действии этилена на половые клетки Drosophila melanogaster . Частота ДЛМ при хранении обработанны х сперматозоидов // Генетика . 1973. Т . 9. № 3. С . 76-83. Шевченко В.А . Оценка генетического риска облучения популяции человека // Последствия Черн обыльской катастрофы : Здоровье человека / Под р ед . Е.Б . Бурлаковой . М . 1996. С . 50-67. Шевченко В.А ., Померанце ва М.Д . Генет ические последствия действия ионизирующих излуче ний . Наука . 1985. 57 с . Adler I.D. Jem-cell sensitet: ly:n mammals // Prog. cein Biol. Res. 1982. 109. P. 137-148. Craig A.T., Tuler J.M.R. Combiner Vitragonic and gamma-irradiation of E.Coli // I bid. 1997 V. 22. N 15. P. 415-430. Hesstrich M.L. Biomet Phanmacother. Stage-specificsensitivity of spermatogonia to different chematherapeufic drups. 1984. P. 132-142. Kristiansen P., Eilertsen S., Einarsdottir E., Overbo S. Effect modification by inorga nic lead in the dominant lethal assay. // Mutat.Res. 1993. V.302. N 1. P. 33-38. Martins B.J., Raju M.E. Survival of cuitured mamalian cells exposet to ultrasount // Radiat. Environm. Biopbus. 1977. V2, № 3. P.243-250. Soares E.R., Sheridan W., Segall M. In creased frequencies of aberrant sperm as indicators of mutagenic in mice // Metal. Res. – 1979. – V.64, № 1 . – P.27-35.
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
Сторож сексшопа после просмотра фильма «Ночь в музее» решил уволиться от греха подальше.
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, диплом по биологии "Комбинированное действие солей тория, свинца и гамма-излучения на мужские половые клетки лабораторных мышей", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru