Реферат: Биосинтез антител. Структура и специфичность антигенов - текст реферата. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Реферат

Биосинтез антител. Структура и специфичность антигенов

Банк рефератов / Биология

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Реферат
Язык реферата: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Архив Zip, 68 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникального реферата

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Содержание 1. Биосинтез антител 2. Структура и специфичность антигенов 3. Общая структурная характеристика молекул иммуноглобулинов 1. Биосинтез антител Иммунная система, ответственная за биосинтез антител, состоит из ряда ор ганов, основными из которых являются тимус, селезенка и периферические л имфоидные структуры в которых формируются три основных типа клеток: Т- и В-лимфоциты и макрофаги. Антитела вырабатываются В-лимфоцитами, на поверхности которых уже имею тся рецепторы, специфически связывающие антиген. В этот же комплекс вклю чаются Т-лимфоциты и макрофаги. В результате межклеточной кооперации пр оисходит активация В-лимфоцитов и их трансформация в плазматические кл етки. Большая часть образовавшихся плазматических клеток синтезирует антитела, аналогичные по специфичности рецепторам на поверхности В-лим фоцитов, и секретирует их в кровь. Другая часть превращается в клетки «им мунологической памяти», способные выделять антитела при повторном вве дении антигена. Каждый В-лимфоцит содержит на поверхности около 100 тыс. рецепторов одинак овой специфичности. Антиген, встречаясь в кровотоке с комплементарным р ецептором, проводит отбор соответствующего В-лимфоцита, который затем, т рансформируясь в плазматическую клетку и многократно делясь, образует клон клеток. Эта теория биосинтеза антител, впервые сформулированная П. Эрлихом, а затем модифицированная в соответствии с уровнем развития нау ки Ф. Бернетом, получила название клонально-селекционной. Важно отметить , что каждый клон плазматических клеток секретирует гомогенные по своей структуре антитела. Однако так как антиген активирует в крови сразу неск олько типов В-лрмфоцитов, которые содержат рецепторы различной степени специфичности по отношению к исходному антигену, такой иммунный ответ н азывается поликлональным, а антитела — поликлональными. Сыворотку животного, содержащую специфические к данному антигену анти тела, называют антисывороткой. При этом обычно указывают, против какого антигена она выработана. Например, когда говорят об антисыворотке кроли ка против эритроцитов человека, подразумевают, что в ответ на введение в кровь кролика эритроцитов человека образуются специфические к ним ант итела. Принципиально важным является то, что поликлональные антитела да же против одной-единственной антигенной детерминанты гетерогенны как по структуре активного центра, так и по физико-химическим свойствам. В то м случае, если антиген поливалентен, например белок, то в сыворотке крови образуются антитела, направленные против каждой индивидуальной детерм инанты, что еще более усложняет состав антител. Состав антител зависит о т вида животного, а также стадии иммунного процесса. Все перечисленные выше факторы влияют на гетерогенность антител и обус ловливают определенные трудности как в изучении их структуры, так и в по лучении воспроизводимых стандартных препаратов антисывороток. Работы Келера и Мильштейна по гибридизации животных клеток открыли принципиа льно новый путь получения антител. Сущность метода заключается в том, чт о из организма иммунизированного животного выделяются лимфоциты, кото рые специальным образом «сливаются» с миеломными клетками. Образующие ся клетки получили название гибридом. Особенностью таких клеток является их способность размножаться и прод уцировать антитела в искусственных условиях вне организма. С помощью сп ециальных методов клонирования можно выделить одну гибридную клетку, к оторая, размножаясь, будет секретировать в неограниченных количествах антитела только одного вида — моноклональные антитела. Подчеркнем, что моноклональные антитела гомогенны как по специфичности, так и по физико- химическим свойствам. Вопросы, связанные с получением поликлональных и моноклоиальных а 2. Структура и специфичность антигенов Понятие антигенная детерминанта включает в себя п оследовательность образующих ее химических функциональных групп и их пространственное расположение. Белки. В молекулах белков антигенная детерминанта образуется совокупн остью аминокислотных остатков. Размер антигенной детерминанты белков может варьировать от 5— 7 до 20 аминокислотных остатков. В случае длинных а нтигенных детерминант, по-видимому, только часть из них включается в соб ственно антигенную структуру, а остальные ответственны за ее конформац ию. Антигенные детерминанты белков бывают двух типов — секвенциальные, т.е . представляющие из себя последовательность аминокислотных остатков в полипептидной цепи, и конформационные, образованные аминокислотными о статками из различных частей белковой цепи, но сближенные в пространств енной конфигурации белковой глобулы. Оба типа антигенных детерминант-и меют важное значение для характеристики «иммунного.портрета» белков. В о многих случаях единичная замена аминокислоты в структуре антигенной детерминанты или изменение конформации белковой глобулы являются дост аточными для изменения антигенной специфичности макромолекулы. Термин «специфичность антигена» используется в двух смыслах: во-первых, как способность избирательно реагировать со специфическими антителам и, во-вторых, поскольку белковые антигены поливалентны, как набор опреде ленных антигенных детерминант. Если два антигена имеют только часть оди наковых антигенных детерминант, их называют перекрестно реагирующими антигенами. Примерами таких антигенов являются гомогенные белки близк ородственных видов животных. Некоторые антигенные детерминанты у белков с четвертичной структурой могут быть образованы фрагментами полипептидных цепей различных субъе диниц, как, например, в иммуноглобулинах и гемоглобине. Как уже указывало сь выше, антигенная детерминанта белков образована группой аминокисло тных остатков, среди которых можно выявить иммунодоминантную группу. Пр имером такой группы является С-концевой аргинин декапептида белка виру са табачной мозаики. Наиболее характерно эффект иммунодоминантной группы выявляется при мо дификации отдельных аминокислотных остатков химическими соединениям и, например динитрофенильной группой. Антитела, образующиеся в такой мод ифицированной антигенной детерминанте, способны реагировать не только с ней, но и с другими аминокислотными остатками, к которым будет «пришита » динитрофенильная группа. Более того, если в раствор, содержащий модифи цированный белок и антитела, добавить свободный динитрофенол, то он буде т ингибировать образование комплекса антиген — антитело. Это явление, к оторое впервые было описано и детально изучено К- Ландштейнером, послужи ло основой для получения антител против различных гаптенов. Существенный вклад в понимание структуры антигенных детерминант внесл и работы по изучению антигенности синтетических пептидов. Классически м примером являются работы по синтезу пептидной петли лизоцима, которая является самостоятельной антигенной детерминантой. Было показано, что эта петля, содержащая внутреннюю дисульфидную связь, взаимодействует с антителами, получаемыми как против лизоцима, так и самой петли, однако об разование комплекса не происходит, если дисульфидная связь восстановл ена. Это свидетельствует о том, что структура антигенной детерминанты и ее специфичность зависят как от аминокислотной последовательности, та к и от конформации данного фрагмента. Общим для антигенных детерминант я вляется то, что они, как правило, находятся на поверхности белковой глобу лы и образованы жесткими а-спиральными участками. В работах М. Села было показано, что гомополимеры, состоящие из одинаковы х аминокислот, не обладают антигенной структурой, в то время как гетероп олимеры содержат антигенные детерминанты, причем чем сложнее состав по липептида, тем больше различных антигенных детерминант он образует. Важ ными здесь являются два фактора: жесткость конформации полипептидной г лобулы и ее аминокислотный состав. Существует несколько путей исследования структуры антигенных детерми нант. Один из них основан на искусственном синтезе фрагментов первичной структуры, в которых проводятся замещения отдельных аминокислот. Друго й путь — изучение влияния избирательной модификации отдельных аминок ислотных остатков. Еще один способ — сравнение между собой гомологичны х антигенов. Эффективным методом является также использование огранич енного протеолта и выявление фрагментов, содержащих антигенные детерм инанты. Хотя ни один из этих путей не дает однозначных результатов, однак о совокупность данных позволяет построить «антигенный портрет» данног о белка. Исключительную важность знания такого «портрета» для иммунохимическо го анализа можно продемонстрировать на примере изучения антигенных де терминант раково-эмбрионального антигена и антигенно родственных ему белков. РЭА представляет гликопротеид с Мг=180 000, который содержит по массе около 50% углеводов. Он имеет 9 различных эпитопов, большинство из которых к онформационно зависимые пептидные детерминанты. В сыворотке крови сод ержится еще целая группа белков, перекрестно реагирующих с РЭА, что затр удняет использование этого антигена для диагностических целей. В насто ящее время с помощью моноклональных антител выделены три антигенные де терминанты, которые являются абсолютно специфичными для РЭА. Знание антигенной специфичности является исключительно важным услови ем для создания диагностических иммунохимиче-ских наборов, так как позв оляет проводить определение данного вещества в присутствии близкородс твенных соединений. В роли антигенов могут выступать и сами иммуноглобулины. В этом случае о рганизм вырабатывает антитела, которые часто называют вторичными. Напр имер, при иммунизации кролика иммуноглобулинами другого вида животног о вырабатываются вторичные антитела. В иммуноферментном анализе сущес твует большая группа методов, в которых используют меченные ферментом в торичные антитела. Обобщая данные о структуре антигенной детерминанта белков, можно выдел ить ее следующую характерную особенность: жесткий участок поверхности белковой глобулы, образованный одним или несколькими фрагментами поли пептидной цепи, содержащими иммунодоминантную группу. Нуклеиновые кислоты. Структура антигенных детерминант нуклеиновых кис лот остается до сих пор малопонятной. Это обусловлено тем, что сами по себ е нуклеиновые кислоты практически не иммуногенны, но в комплексе с белка ми к ним могут быть полу-чены антитела. Как и в случае белков, важную роль и грает жесткость структуры полинуклеотида. В состав антигенной детерми нанты входят три- и тетрануклеотиды. Они могут быть образованы как двусп иральными, так и односпиральными участками. Понимание структуры антиге нных детерминант имеет важное значение не только в плане иммунохимичес кой диагностики различных патологических процессов, но и в связи с актив ным развитием гибридизации ДНК, в которых антитела выступают в роли дете ктирующих систем. Полисахариды. Полисахариды — весьма сложная по своему составу и строен ию группа антигенов, входящая в структуру стенок микроорганизмов и мног их других клеток и определяющая их специфичность. Полисахариды входят в состав многих белков и также играют роль антигенных детерминант. В больш инстве случаев полисахаридные антигены представляют собой длинную цеп ь, к которой присоединены боковые короткие олигосахариды, содержащие 4— б остатков Сахаров, фактически являющиеся антигенными детерминантами. В одних случаях олигосахаридные группировки идентичны и тогда весь пол исахаридный комплекс представляет собой чередующиеся антигенные дете рминанты. В других случаях боковые цепи могут сильно различаться между с обой. Как правило, в антигенную детерминанту входят остатки Сахаров, рас положенные на конце боковых цепей, содержащие заряженную группу, котора я является иммунодоминантной группой. На специфичность олигосахаридных антигенных детерминант в структуре б елков оказывает влияние ближайшее окружение по-липептидиой цепи белка- носителя и тип связи между сахарами. В случае полисахаридных гомополимеров, таких, как декстран, антигенная д етерминанта может состоять из фрагментов, содержащих до восьми остатко в. Липиды, входящие в состав комплексов со многими полисахаридами, не облад ают антигенной специфичностью, по-видимому, из-за высокой конформационн ой подвижности. Таким образом, структура полисахаридных антигенных дет ерминант представляет собой олигосахаридные цепи длиной 4— 6 остатков, с пецифичность которых определяется химическим составом, типом гликозид ных связей и остатками, находящимися в ближайшем окружении. Гаптены. Гаптены — это вещества, которые сами не вызывают иммунного отв ета, но, будучи конъюгированы с носителями, обладают способностью стимул ировать синтез против них антитела. Обычно принято считать, что гаптены — это низкомолекулярные соединения, однако это не совсем верно. Наприме р, нуклеиновые кислоты, полипептиды D-аминокислот имеют высокую молекуля рную массу, но антитела против иих возникают только после коНъюгировани я их с белками. В этом случае гаптены в конъюгатах с белком выступают в рол и иммунодоминантной группы и поэтому в дальнейшем могут взаимодейство вать с антителами независимо от белка носителя. Структура и антигенная специфичность гаптенов определяется целым рядо м факторов. В качестве гаптенов могут выступать самые разнообразные орг анические вещества с Мг>100. С практической точки зрения важными являются с тероидные и пептидные гормоны, широкий круг лекарственных соединений, п естициды, различные продукты промышленного органического синтеза, обл адающие аллергенным действием. Антигенная специфичность гаптенов сильно зависит от их химической стр уктуры. Так, введение дополнительных групп может сильно исказить «антиг енный портрет» того или иного соединения. Например, тироксин и трийодтир онин отличаются только одним остатком I, чего вполне достаточно, чтобы ан титела против этих гормонов сильно различались перекрестной реактивно стью. Классическими примерами стали исследования с пара-, орто- и мета-ами нобензойной кислотами, которые практически не дают перекрестных реакц ий при сопоставимых концентрациях. Важным моментом является стереоспецифичность гаптенов; антитела проти в олигопептидов из D-аминокислот не реагируют с олигопептидами из L-амино кислот. На антигенную специфичность сильное влияние оказывают аминокислотный остаток белка носителя, к которому пришит гап-тен, а также молекулярные р азмеры гаптена. Так, в длинных оли-гопептидных гаптенах замена аминокисл отных остатков, которые расположены близко к белку-носителю, оказывает м еньшее влияние, чем в коротких. Напротив, замены в удаленных от носителя а минокислотных остатках оказываются драматическими для антигенной стр уктуры независимо от размеров гаптена. Аналогичны з-акономерности для о лигосахаридов. Антигенная специфичность гаптенов зависит не только от их химической с труктуры, но и от способа пришивки к белку-носителю, в частности от того, к акая функциональная группа гаптена была использована для конъюгирован ия. Часто, при получении конъюгатов для иммунизации гаптены пришивают не непосредственно к молекуле белка-носителя, а через пространственную «н ожку», содержащую обычно 4— 6 углеродных атомов. В этом случае сама «ножка » в комплексе с гаптеном выступает в качестве составной антигенной дете рминанты и образующиеся антитела могут обладать меньшей эффективность ю связывания с нативным гаптеном, чем с таким связанным через «ножку» га птеном. В некоторых видах иммуноферментного анализа в качестве одного из реаге нтов используют гаптен, меченный ферментом. Если связывание в таком конъ югате аналогично способу пришивки в конъюгате гаптена с белком-иосител ем для получения антител, то говорят, что в анализе используют гомологич ные антитела. Если же структура «ножки» и способ пришивки гаптена в обои х случаях различны, то говорят о гетерологичных антителах. Применение то го или иного вида антител или конъюгатов в иммуноферментном анализе мож ет весьма сильно сказываться на его чувствительности и некоторых други х характеристиках. Весьма существенным фактором для специфичности является химическая ст руктура «нодаскы», в частности ее длина и ближайшее окружение гаптена. В се эти моменты крайне важно учитывать при разработке методов иммунохим ического анализа гаптенов. Сильное влияние различных факторов на антигенную структуру и специфич ность гаптенов, по-видимому, объясняется их ограниченными размерами и ос обенностями структуры активных центров антител. Знание антигенной структуры и специфичности гаптенов имеет важное зна чение для создания методов иммунохимического определения различных фи зиологически активных соединений, так как многие из них претерпевают ра зличные биохимические превращения, в результате чего образуется групп а близкородственных метаболитов. 3. Общая структурная характ еристика молекул иммуноглобулинов Антитела в организме выполняют две основные функции. Первая — это распо знавание и специфическое связывание соответствующих антигенов, вторая — эффекторная, заключающаяся в индукции важнейших физиологических пр оцессов, направленных на уничтожение антигена: лизис чужеродных клеток через активацию системы комплемента, стимуляция специализированных им мунокомпетентных клеток, выделение фармакологически активных веществ и т.д. Развитие иммунохимии в течение последних 25 лет позволило установить стр оение антител, выявить стереохимические основы их функционирования. Ос обое внимание было уделено изучению структуры активных центров антите л, что привело к созданию полицентровой модели связывания антигена. Иссл едования динамических структурных свойств иммуноглобулинов способст вовало установлению характера связи между антигенсвязывающими и эффек торными функциями. Иммуноглобулины по своей химической структуре относятся к большому кл ассу природных соединений — гликопротеидам, высокомолекулярным соеди нениям, состоящим из последовательности L-аминокислот, соединенных межд у собой пептидными связями . Отдельные аминокислоты отличаются между собой бо ковыми заместителями R. В состав белков, в том числе иммуноглобулинов, вхо дят двадцать аминокислотных остатков. Полипептидн ая цепочка за счет образования водородных связей между карбонильным атомом кислорода и ато мом водорода аминогрупп отдельных аминокислотных остатков способна оп ределенным образом укладываться в пространстве, образуя так называемы е а-спиральные участки и структуру. Такая локальная упорядоченная конфо рмация отдельных участков полипептидной цепи получила название вторич ной структуры. В целом вся полипептидная цепь образует компактную трехмерную структу ру – третичную структуру: В одном растворе молекула белка сворачивается так, чтобы неполярные, или гидроф обные, боковые цепи аминокислотных остатков находились во внутренней, м алодоступной для молекул воды области, а полярные, или ионизированные, г руппы образовывали внешний контактирующий с водой слой. Такое располож ение аминокислотных остатков полипептидной цепи является термодинамическим наиболее выгодным с остоянием, причем следует отметить, что это сворачивание пептидной цепи является высокоспецифичным и обусловлено первичной структурой молеку лы. Помимо рассмотренных причин сворачивания белков, обусловленных так на зываемыми гидрофобными взаимодействиями, определенный вклад в' стабил изацию трехмерной структуры вносят дисперсионные силы Лондона, возник ающие в результате комплементарного распределения электронных облако в отдельных, рядом расположенных атомов. Энергия этого типа взаимодейст вий сильно зависит от расстояния между атомами и максимальна при так наз ываемом ван-дер-ваальсовом расстоянии контакта, равном сумме ван-дер-ваа льсовых радиусов взаимодействующих атомов. Дополнительный вклад в поддержание трехмерной структуры молекул белко в дают водородные и электростатические связи между боковыми группами а минокислот, а также ковалентные связи между отдель ными частями полипептидной цепочки, например дисульфидные, или S— S-связ и, возникающие между двумя остатками цистеина. Некоторые молекулы белков состоят из несвязанных между собой ковалентно отдельных субъед иниц. Такая пространственная организация получила название четвертичн ой структуры белков. Несмотря на огромное разнообразие антител и их гетерогенность, все они о бладают некоторыми общими структурными элементами, обеспечивающими вы полнение их основных функций. По своим антигенным, эффекторным свойствам и структурным особенностям иммуноглобулины подразделяются на пять основных классов: IgM, IgG, IgA, IgD и IgE. Т аблица 1 - Основные аминокисло ты, входящие в состав белков Общей структурной единицей всех иммуноглобулинов является комплекс из четырех полипептидных цепей — двух идентичных ме жду собой легких цепей с молекулярной массой 23000 каждая и тяжелый с молеку лярной массой по 53000. Каждая из лёгких цепей прочно соединена с концевыми участками тяжелых ц епей благодаря наличию межцепочечных ди-сульфидных связей и множеству слабых гидрофобных, электростатических и других межатомных взаимодейс твий. Аналогичные связи существуют и между свободными участками тяжелы х цепей. В целом структура такого комплекса напоминает латинскую букву « V» или «Т» и характерна для иммуноглобулинов классов IgG, IgD и IgE. При действии протеолитического фермента папаина молекула IgG распадаетс я на три фрагмента, два из которых идентичны и сохраняют способность свя зывать антигены и третий, способный к кристаллизации. Именно Fc-фрагмент о тветствен за эффекторную функцию антител — связывание белка комплеме нта Clq, транспорт через мембраны, взаимодействие с мембранными рецептора ми и т.д. Другой протеолитический фермент пепсин "разрывае т пептидную связь, расположенную ближе к СООН-концу цепи, от S— S-связи меж ду Н-цепями в Fc-фрагменте. В результате образуются так называемый pFc-фрагме нт, представляющий собой остатки тяжелых цепей, и соединенные дисульфид ными связями два Fа-фрагмента, обозначаемые как Ґ2- фрагмент. Последний также сохраняет способность к связыванию антигенов. Антигенсвязывающий центр расположен в Н2-концевых частях Н- и L-цепей. Таки м образом, каждая молекула IgG, а также Р2-фрагменты содержат по два антигенс вязывающих центра, а Fab-фрагмент — один. Необходимым условием д ля использования антител в имму ноферментном анализе является сохранение их спосо бности специфически взаимодействовать с соответствующими антигенами. Поэтому часто используют не целые молекулы антител, а только их фрагмент ы F2 или Fab, полностью сохраняющие эту способность. Такой подход позволяет в некоторых случаях устранить неспецифические реакции, обусловленные, в частности, взаимодействием Fc-фрагментов ан тител с повер хностями носителей. Молекулы антител имеют большое число S— S-связей, которые можно разделит ь на 3 категории: межцепочечные связи, образуемые внутри структурной еди ницы между Н- и L-цепями и между Н- и Н-цепями, внутрицепочечные S— S-связи, воз никающие в пределах одной и той же легкой или тяжелой цепи, и связи между Н -цепями отдельных четырехцепочечных комплексов, обусловливающих образ ование полимерных молекул — IgM и IgA. Структура иммуноглобулинов различных классов обусловлена числом и рас положением S— S-связей в молекулах, а также количеством четырехцепочечны х элементов. На рис. 2 приведено схематическое изображение молекул иммун оглобулинов различных классов. IgM присутствует в сыворотке в виде пентамера четырехцепочечных комплекс ов, соединенных S— S-связями между Н-цепями. Некоторое количество IgA сыворо тки также присутствует в виде димерной и тетрамерной формы. Полимерные IgA и IgM содержат Небольшую полипептидную цепь с Мг=14 000— 15000, которая, по-видимому , стабилизирует полимерную структуру. Кроме того, в димерный IgA входит сек реторный компонент— большой гликопротеид с Мг=80 000. Легкие цепи иммуноглобулинов бывают только двух типов — К или х. и являю тся общими для всех пяти классов, в то время как тяжелые цепи обладают стр уктурными, иммунологическими и химическими особенностями, характерным и для каждого класса иммуноглобулинов. Для обозначения тяжелых цепей, относящихся к классам IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, использую т соответствующие греческие буквы— у, ц, а, б и е. На основании различий в х имическом строении Н-цепей в пределах класса можно выделить подклассы и ммуноглобулинов: 4 — для IgG, 2 — для IgA и 2 — для IgM. В молекуле иммуноглобулина любого класса легкие цепи относятся только к одному типу.
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
— Расскажи о себе.
— Я люблю давать унизительно-ласкательные прозвища.
— Ты хотел сказать уменьшительно-ласкательные?
— Ты тут самый умный что ли, суслик с синдромом дауна?
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, реферат по биологии "Биосинтез антител. Структура и специфичность антигенов", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru