Курсовая: Биологическая роль каротиноидов - текст курсовой. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Курсовая

Биологическая роль каротиноидов

Банк рефератов / Химия

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Курсовая работа
Язык курсовой: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Microsoft Word, 366 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникальной курсовой работы

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Тюменская Государственная Ме дицинская Академия кафедра медицинской химии Биологическая роль каротина и каротиноидов. Научный руководитель: профессор Сторожок Н.М. Преподаватель : Дарюхина Е.Н. Исполнитель: Севоди н Н.Н. Тюмень - 1998 г. СОДЕРЖАНИЕ: 1. Введение 1.1. Исторические данные 1.2. Установление химической структуры каротина 2. Основная часть 2.1. Природные изомеры каротина 2.2. Каротиноиды 2.3. Свойства каротина 2.4. Каротин как провитамин А 2.4.1. Общие сведения 2.4.2. Усвоение организмом и образование витамина А. 2.5. Биологическая активность каротина и каротиноидов 3. Заключение 3.1. Витамин А и злокачественный рост 3.2. Физиологическое действие каротина ИСТОРИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ Впервые каротин был выделен в 1831 году Вакенродером из желтой репы и моркови. По имени этой последней - Daucus carota - он и получил свое название. Несколько лет спустя, в 1837 году, Берцел иус путем экстрагирования спиртом выделил из осенних листьев зелены х растений желтое красящее вещество, названное им ксантофиллом. В 1847 го ду Цейзе описал пигмент моркови, присвоив ему предположительно эмпир ическую формулу С 5 Н 8 . Позднее, в 1861 году, Гуземан приписал каротину новую эмп ирическую формулу С 18 Н 24 О на основании данных элементарного анализа н а углерод и водород ( С = 84,14, Н = 9,80 и С = 83,98, Н = 9,77 ). Серия работ Арно ( 1885 - 1889 гг. ) была направлена к дальнейшему выяснению хим ической природы каротина. Арно высказал предположение, что желтое кра сящее вещество, присутствующее в зеленых листьях разных растений ( кса нтофилл Берцелиуса ), идентично красящему веществу моркови ( каротину В акенродера ). Элементарный анализ пигмента, проведенный Арно, дал следу ющие результаты в трех определениях: I. С = 88,55 II. С = 88,75 III. С = 88,70 Н = 10,59 Н = 10,67 Н = 10,62 Арно приписал исследованному желтому красящему веществу новую эмпир ическую формулу С 26 Н 38 ( теоретически для такой формулы С = 89,14 и Н =10,86 ) и назвал ег о каротеном. Однако этот термин впоследствии не привился, и за пигмент ом осталось его прежнее название - каротин. Выводы Арно, за исключением констатации несомненного углеводородног о характера каротина, были в последующем подвергнуты переоценке. Еще в 1883 году Бородиным было сделано наблюдение, легшее в основу всех дальн ейших исследований в области красно - желто - оранжевых природных пигме нтов. Бородин доказал, что желтый пигмент, извлеченный из зеленых раст ений, не вполне идентичен каротину моркови и состоит из смеси минимум двух различных пигментов, в которой каротин присутствует лишь как сос тавная часть в тех или иных количествах. Предложение Бородина подтвер дилось в работах еще одного русского ботаника - Монтеверде и других ис следователей. Так было положено начало изучению комплекса каротиновы х красящих веществ, которое продолжается и до настоящего времени. Предложенная Арно эмпирическая формула для каротина оставалась не о провергнутой в течении 20 лет. Усилия ученых в конце XIX и в первые годы XX с т. были направлены к тому, чтобы внести какую-либо определенность в хар актеристики и классификацию желто-оранжевых растительных пигментов. Бугарель получил каротин из зеленых листьев в кристаллическом виде и назвал его эритрофиллом. Другие исследователи пытались разделить и к лассифицировать спутников каротина. В своих работах они приняли прос тейшие физико-химические приемы - фильтрование через активный уголь, о бработку различными растворителями и т.д. Некоторая наметка на возмож ность классификации желтых пигментов появилась тогда, когда в Сорби и Краус обратились к помощи спектрального анализа, определив полосы по глощения растворов веществ, выделенных из различных растворительных материалов. Однако и тут, как правильно отмечает Любименко, “несмотря на наличность оптических отличий у исследованных Краусом пигментов, этот ученый не склонен был придавать им большого значения и вместо то го, чтобы ближе изучить химические и физические признаки отдельных пр едставителей намеченных групп, он просто объявил их формами ксантофи лла”. Некоторое оживление в исследовании природных красящих наметилось в начале текущего столетия. Оно связано с работами Вальштеттера по иссл едованию хлорофилла, разделению и идентификации пигментов, сопутству ющих ему в растительных органах. В своей работе “Исследование хлорофи лла” Вильштеттер посвящает отдельную главу “желтым спутникам” этого распространенейшего в природе пигмента. Вильштеттер и Миг в 1907 году выделяли каротин из сушенных листьев жгуч ей крапивы путем экстрагирования петролейным эфиром. По своим свойст вам этот пигмент оказался совершенно идентичным каротину из моркови. Анализ очищенного вещества дал следующие результаты в трех пробах: I. С = 89,09 II. С = 89,50 III. С = 89,23 Н = 10,48 Н = 10,59 Н = 10,54 Среднее соотношение между С и Н в анализах Вильштеттера и Мига было п олучено равным 1,406 ( у Арно - 1,428 ). Такой результат более всего приближается к эмпирической формуле С 5 Н 7 . Определения же молекулярного веса вещества п о точке кипения в хлороформе и сероуглероде привели авторов к окончат ельной формуле С 40 Н 56 . Вильштеттер и Миг подтверждают правильность своих вы водов также на примере анализа иодида каротина, в результате которого было получено: I. С = 51,62 II. С = 51,69 Н = 6,20 Н = 6,25 I = 41,53 I = 41,71 Эти данные более соответствуют формуле С 40 Н 56 I 3 ( С = 52,35; Н = 6,15; I = 41,50 ), чем формуле для иодида, предположенной Арно ( С 26 Н 38 I ). Вольштеттер разграничил понятия “каротин” и “ксантофилл” и характе ризовал ксантофилл, как оксипроизводное каротина. Вольштеттер указал также на ошибку Гуземана, принимавшего свое оксисоединение за кароти н, в то время как по расчетам Вильштеттера оно как раз соответствовало ксантофиллу, имеющему формулу С 40 Н 56 О 2 . Таким образом из работ Вильштеттера вытекает, что в растениях обнаруж ено как будто только два желтых пигмента - каротин и ксантофилл. Эмпири ческая формула каротина, данная Вильштеттером, получила впоследствии подтверждение согласно структурному анализу. Существование же, кром е каротина, только одного ксантофилла было сомнительным, так как еще д о исследований Вильштеттера , ботаниками был накоплен значительный м атериал по извлечению растительных желтых пигментов, обладающих разл ичными спектральными характеристиками и растворимостями. Имеется в в иду цитированные выше работы Бородина и других авторов. Впрочем и сам Вильштеттер, в конце концов, выразил сомнение в однородности полученн ых им препаратов, что в последствии целиком оправдалось. Замечательное открытие русского ботаника Цвета, опубликовавшего в 1910 году свою работу “Хромофиллы в растительном и животном мире”, показал о единственно эффективный путь к разрешению данного вопроса. Цвет пре дложил пользоваться для разделения желтых, красных и оранжевых пигме нтов методом хроматографической адсорбции, сделавшимся впоследствии одним из наиболее тонких орудий в органическом анализе. Цвету удалось, изолировав каротин, расположить ту смесь, которую Виль штеттер назвал “ксантофиллом”, еще на четыре отдельных пигмента. Авто р назвал их ксантофиллами , ’ ’ ’ и , но не успел подвергнуть всесторон нему изучению. Однако путь для дальнейшего дифференцирования растите льных пигментов был намечен совершенно правильно и обеспечил успех п оследующих исследований. Разнообразие желтых, красных и оранжевых красящих веществ растений в это время было подтверждено также фактом выделения углеводорода лик опина в целом ряде растений, где он сопутствует каротину ксантофиллу. Было установлено также наличие ликопина в томатах. Назревала необход имость ввести хотя бы предварительную рациональную классификацию ка ротиновых красящих веществ. Первая попытка в этом направлении сделана в 1916 году Любименко в его ра боте “О превращениях пигментов пластид в живой ткани растения”. Класс ификация Любименко базировалась на двух признаках - растворимости пиг ментов в одном и том же органическом растворителе и сходстве спектро в поглощения в сероуглеводороде, определяющихся визуально при помощи спектроскопа. Автор делил, прежде всего, все пигменты хлоропластов на желтые и красные. Желтые, в свою очередь, по отношению к муравьиной кис лоте делились на группу каротина, представители которой нерастворимы в кислоте, и группу ксантофилла, члены которой легко растворимы в мур авьиной кислоте. К красным пигментам Любименко относил группу ликопи на и группу родоксантина. Группа каротина, согласно Любименко, насчитывала шесть отдельных пре дставителей. Автор располагал их в следующие два ряда (см. табл.). ГРУППА КАРОТИНА спектры поглощения в сероуглероде (в m ) интенсивность полос 1 полоса 2 полоса первый ряд Каротин , нераствор. в спирте 538 - 510 492 - 475 I = II Пигмент плодов Lycium ovatum, раствор. в горя чем спирте 538 - 503 491 - 472 II > I Каротин легко раствор. в спирте 538 - 505 492 - 472 II > I второй ряд Каротин ’ , раствор. в кипящем спирте 53 - 508 492 - 473 I = II Пигмент плодов Solanum pseudocapsicumpseudocapsicum, раствор. в холодном спирте 533 - 502 490 - 470 II > I Каротин ’ , легко раствор. в спирте 580 - 505 490 - 470 II > I Каждый ее ряд, состоящий из трех представителей, объединяется сходной спектральной характеристикой. Пигменты в пределах каждого ряда расп олагаются в порядке улучшения их растворимости в спирте. Автор отмеча ет, что лучшая растворимость в спирте сопровождается также улучшение м растворимости в уксусной кислоте. У каротина , легко растворяющегося в обоих растворит елях можно предположить наличие в молекуле кислорода, находящегося , о днако, не в хромофорной группе. Таким образом Любименко включал в груп пу каротина не только типичный углеводород каротин , который он идентифицировал с пигм ентом моркови, но также и кислородсодержащие соединения. Новый и наиб олее плодотворный период в изучении каротина и родственных ему пигме нтов начался начался после первой мировой войны, когда у биохимиков на чал накапливаться интересный материал о возможной взаимосвязи между каротином и недавно открытым витамином А и об общности их физиологич еского действия. В период 1928 - 1933 годов каротин и каротиноиды явились объ ектом углубленных исследований целого ряда химиков-органиков. Целью этих работ было окончательное выяснение химической природы и свойст в каротина и сопутствующих ему родственных пигментов. В 1928 году Цейхмейстер и его сотрудники, каталитически гидрируя кароти н, установили, что его молекула содержит большую алифатическую группи ровку. Дальнейшие работы по выяснению строения каротина принадлежат, главным образом, Карреру, широко использовавшему хроматографический метод Цвета для разделения пигментов и их изомеров. В 1930 году, т.е. почти через сто лет после открытия каротина, была установлена его структурн ая формула. В этот же период времени были выделены и изучены некоторые изомеры каротина и ряд каротиноидов. Возникла новая современная классификация каратиновых красящих веще ств. Согласно этой классификации все известные нам каротиновые крася щие вещества по структурному признаку можно разделить на две основн ых группы: соединения с 40 углеродными атомами в молекуле и соединения с числом атомов углерода в молекуле меньшим 40. К первой группе принадл ежат углеводороды (каротин, его изомеры и ликопин), оксисоединения - неп рерывные спирты, получившие собирательное название “ксантофиллов”, и оксосоединения (кетоны). Вторая группа каротиновых красящих веществ п редставлена карбоновыми и оксикарбоновыми кислотами. Кроме того, обн аружено еще несколько специфических каротиноидов, выделенных из орга нов животных. Число углеродных атомов в их молекуле достигает 80 ( афани цин ). УСТАНОВЛЕНИЕ ХИМИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ КАРОТИНА Количество двойных связей в молекуле каротина было о пределено по подсчету количества молекул водорода, расходуемых при к аталитическом гидрировании. Было обнаружено, что одна молекула карот ина принимает 11 молекул Н 2 и, следоват ельно, содержит 11 двойных связей. Такие же результаты получены при реа кции каротина с хлоридом. Ряд цепных выводов сделан из результатов опытов окислительного расщ епления каротина. Окисление бензольного раствора каротина водным рас твором перманганата при встряхивании влечет за собой выявления запа ха фиалок. Такое же явление, но в меньшей степени, наблюдалось и при сам оокислении каротина кислородом воздуха. Известно, что химическим фак тором, обусловливающим запах фиалки, является -ионон: который при окислении пермангантом способен давать следующий ряд пр одуктов расщепления: - -диметилглута ровую кислоту (1), - -диметилянтарную ки слоту (2) и диметилмалоновую кислоту (3): Подобный же ряд продуктов расщепления был отмечен и Каррером при дли тельном окислении перманганатом каротина. Таким образом было доказан о присутствие в молекуле последнего -иононового цикла. Подтверждение этого факта вытекает также и из исследований сравнит ельного озонирования -ионона и каротина, произведенных Пуммерером и сотрудниками. В о боих случаях в продуктах расщепления было установлено наличие герон овой кислоты: При этом, при идентичных условиях эксперимента, из одной молекулы кар отина получается вдвое большее количество героновой кислоты, чем из -ионона, что дало пра во вывести заключение о наличии в молекуле каротина двух -иононовых циклов. О наличии д вух циклическх систем в молекуле каротина можно судить также и по эмп ирической формуле С 40 Н 78 его восстановленного производного - бесцветно го пергидрокаротина. Таким образом на основании сказанного выше, молекулу каротина можно представить состоящей из 2-ух -иононовых колец, соединенных между собой цепной алифатич еской группировкой, в которой имеется девять ненасыщенных связей (две остальные находятся в циклах). Принимая во внимание интенсивную окра ску каротина, которая обычно связана с конъюгацией двойных связей, пр омежуточную алифатическую цепь каротина можно было рассматривать, ка к хромофор полиенового типа, состоящий из восемнадцати метиновых гр упп, у которых, согласно балансу брутто -формулы, некоторые водородные атомы замещены метильными группами. Наличие метильных групп в промежуточной алифатической цепи молекул ы каротина было подтверждено Куном и его сотрудниками. При окислении каротина пермангонатом калия получается 4,4 молекулы уксусной кислоты . Окисление более жестким окислителем - хромовой кислотой - дает шесть м олекул уксусной кислоты группировки типа а хромовая кислота также и более насыщенные, как например: Можно было утверждать поэтому, что промежуточная полиметиновая цепь молекулы каротина содержит четыре метильных группы. На основании совокупности всех накопленных экспериментальных данны х Каррер выдвинул предположения о том, что промежуточная цепь молекул ы каротина состоит из четырех метилбутадиеновых (изопреновых) остатк ов, попарно расположенных с обеих сторон центра симметрии молекулы. Структурная формула каротина, установленная Каррером, имеет следующ ий вид: ПРИРОДНЫЕ ИЗОМЕРЫ КАРОТИНА Исследования по выяснению структуры каротина провод ились первоначально с пигментом, выделенным из моркови и принятым за чистый каротин. Вскоре была выяснена причина некоторых количественны х неувязок в результате опытов, обьясняющаяся тем, что каротин морков и представлял собой смесь отдельных изомеров. Приведенное выше строе ние оказалось присущим лишь одному изомеру каротина. Пигмент моркови хроматографически был разделен на три изомерных ком понента. Изомер симметричного строения составлял около 85% смеси. В коли честве около 15% был представлен второй изомер. В продуктах его окислен ия было обнаружено меньшее количество героновой кислоты и наличие из огероновой кислоты, получающейся, обычно, в результате окислительного распада -иононовог о цикла: Отсюда, вполне естественно, можно было заключить, что в молекуле второ го изомера с той же эмпирической формулой С 40 Н 56 содержатся два различных цикла - один -иононов ый и второй -иононов ый: Правильность такой структурной формулы подтверждается и оптической активностью ( правым вращением ) этого соединения, обусловленной налич ием асимметрического атома углерода. Изомер симметричного строения был назван -каротином, изомер с одним -иононовым циклом - - каротином. Третий изомер пигмента моркови - -каротин - был выделен и исследован Куном и Брокманом. Пр и каталитическом гидрировании он присоединяет двенадцать молекул во дорода и, следовательно, содержит уже двенадцать ненасыщенных связей. В продуктах озонирования -каротин был обнаружен ацетон в количестве 0,85 молекул на моле кулу -каротина. Из э тих данных был сделан вывод о наличии на одном конце молекулы -каротина открытой ненасы щенной алифатической группировки ( с одной дополнительной двойной св язью ) которую можно рассматривать, как разорванное кольцо ионона, т.е. как пс евдоионон: Таким образом молекула -каротина будет иметь следующий вид: -, - и -каротин являются наиболее распространенными прир одными структурными изомерами каротина. Имея одинаковую эмпирическу ю формулу С 40 Н 56 , они отличаются один от другого рядом свойств - температурой плавления, способностью адсорбироваться на окисях металлов, спектрал ьными характеристиками. Структурной причиной, обусловливающей эти из менения, как видно из всего изложенного выше, является различное расп оложение двойных связей на одном из концов молекулы. За последнее время развитие техники чрезвычайно тонкого хроматогра фического разделения пигментов по Цвету позволило при исследовании растительных объектов обнаружить новые изомеры каротина, встречающи еся в природе, правда, в значительно меньших количествах. Так, Винтершт ейн из плодов гонокариума, наиболее богатого -каротином, выделил 4-й изомер, названный -каротином. Судя по м аксимумам поглощения -каротина, лежащим между таковыми для -каротина и для каротиноида ликопина, новому и зомеру приписана следующая предположительная формула: Пятый природный изомер каротина обнаружен в 1941 году Фрепсом и Кеммере ром при хроматографическом разделении пигментов желтой кукурузы. На хроматограмме он давал светло-желтое кольцо, расположенное несколько выше четкоотделенного оранжевого кольца -каротина. Новый пигмент, названный к-каротином , принимали сначала за -каротин, но спектроскопическое исследование показало, что новы й изомер обнаруживает максимум поглощения, не соответствующий таково му для -каротина. Ст роение нового изомера окончательно еще не установлено. Известно лишь , что в его молекуле имеется один -иононовый цикл. За последние годы также обнаружено еще два природных растительных п игмента, которые есть основания рассматривать, как изомеры каротина. Э то -каротин Стрейна , найденный в моркови, и -каротин Стрейна и Маннинга, выделенный из диатомовых водоросле й. Последний получен авторами в кристаллическом состоянии. По своим х имическим свойствам этот углеводород почти идентичен -каротину. Однако его спектрал ьная характеристика приблежается к таковой каротиноида виолаксанти на. Природные структурные изомеры каротина под влиянием естественных и ли специально созданных условий способны, в свою очередь, изомеризова ться. При этом может быть получено большое количество, главным образо м, стериоизомеров. До последнего времени принято было считать эти сте риоизомеры каротина продуктами исключительно искусственного происх ождения. Однако современные данные ряда исследователей свидетельств уют о наличии таких стериоизомеров в некоторых растениях. Таким образ ом разделение изомеров каротина на природные и искусственные станов ится уже до некоторой степени условным. Из всех известных до настоящего времени природных изомеров каротина наибольшее значение имеет -каротин. К тому же он обладает чрезвычайно обширным распрост ранением в природе. Очень часто ему сопутствует в том или ином количес тве - и -каротин. Оба этих последних, к ак будет указано далее, также являются провитаминами А, с вдвое меньше й по сравнению с -ка ротином биологической активностью. Поэтому при изготовлении каротин овых препаратов обычно нет необходимости в разделении трех изомеров. Смесь этих изомеров, выделенная из какого либо сырьевого источника, н апример из моркови, очищенная и перекристаллизованная, носит обобщаю щее название “каротин”. Неперекристаллизованная смесь изомеров каро тина известна как “сырой каротин”. КАРОТИНОИДЫ В подавляющем большинстве случаев изомеры каротина в природных исто чниках сопровождаются тем или иным количеством чрезвычайно родствен ных им по строению других растительных пигментов - каротиноидов. Некот орые из этих каротиноидов, как будет указано далее, обладают также про витаминной активностью. Другие лишены этих свойств, но, будучи частыми спутниками каротина в и сходных материалах, являются балластом, от которого нужно освобождат ься при приготовлении чистых препаратов каротина и при аналитическо м определении активности. Каратиноиды, так же как и изомеры каротина, принадлежат к полиеновым естественным красящим веществам. Их молекулы построены по аналогично му с каротином структурному принципу - циклы или псевдоциклы соединен ы алифатической группировкой из изопреновых остатков. Между каротино м и каратиноидами существует, повидимому, также и определенная генети ческая связь. Следует отметить, что некоторые растительные продукты накапливают в себе, наряду с каротином, преимущественные количества какого-либо или нескольких каротиноидов ( например, ликопин в томатах, криптоксантин в желтой кукурузе и др. ) Количество различных каротиноидов, образующих ся в органах растений, может быть чрезвычайно разнообразным и насчиты вает иногда несколько десятков отдельных представителей. Каротиноид ы в настоящее время еще далеко не полностью изучены. Более или менее т очные данные о строении и свойствах известны лишь для основных пигме нтов данной группы. Из каротиноидов углеводородного характера известен один ликопин, ши роко распространенный в природе ( томаты, некоторые фрукты и ягоды ). По своей структуре он отличается от -каротина наличием на концах молекулы не -иононовых циклов, а псевдоион онов: Хотя ликопин и принято относить к каротиноидам, но он фактически явля ется алифатическим изомером каротина, так же как и последний, углевод ородом с эмпирической формулой С 40 Н 56 . Отдельную группу каротиноидов составляет ряд ненасыщенных спиртов производных каротина. Они носят общее название ксантофиллов, благода ря тому, что их первый представитель был обнаружен в желтых листьях. Из ксантофиллов наиболее близок к каротину криптоксантин ( пигмент к укурузы ), имеющий эмпирическую формулу С 40 Н 56 О и следующую структуру: Как видно, криптоксантин отличается от -каротина лишь структурой одного из циклов, кот орый является гидроксилированным. Другой представитель подгруппы ксантофиллов с эмпирической формуло й С 40 Н 56 О - рубиксантин. У него имеется также один гидроксилированный ато м -иононовый цикл, в торой же раскрытый (псевдоионон): Каротиноид-ксантофилл с двумя гидроксилированными -иононовыми циклами и эмпирической формулой С 40 Н 56 О 2 ( пигмент яичного желтка ) н осит название зеаксантин: Изомером зеаксантина является ксантофилл желтых листьев (лютеин), у к оторого первый гидроксилированный цикл -иононовый, второй же -иононовый : Далее в списке каротиноидов подгруппы ксантофиллов следует флавокс антин ( пигмент лютика ) с эмпирической формулой С 40 Н 56 О 3 , два изомера -виолаксантин ( пигмент анютиных глазок ) и тар аксантин ( пигмент одуванчика ) с эмпирической формулой С 40 Н 56 О 4 . Строение этих оксипроизводных каротина еще н едостаточно выяснено. К ксантофиллам относится также фукоксантин ( пигмент бурых водоросле й ) с эмпирической формулой С 40 Н 60 О 6 . Структу ра ксантина выяснена недавно и представляется в следующем виде: Капсантин С 40 Н 58 О 3 - главный пигмент кожиц ы плодов паприки - подобно криптоксантину имеет в своей молекуле один гидроксилированный -иононовый цикл. На другом же конце молекулы капсантина - псевдоц икл: Следующая подгруппа каротиноидов принадлежит к оксосоединениям. Из них наиболее изучен родоксантин С 40 Н 50 О 2 : В свое время родоксантин считался единственным кетопроизводным кар отина. Однако теперь известны также афанин С 40 Н 54 О, являющийся монокетопроизводным -каротина: и миксоксантин С 40 Н 54 О - аналогичное производное -каротина: К монокетонам относится также, как выяснилось, и каротиноид животного происхождения эхиненон С 40 Н 58 О + Н 2 . Из каротиноидов с числом углеродных атомов, меньшим 40, наиболее извес тны кроцетин и биксин ( карбоновые кислоты ) и азафрин (оксикислота). Воо бще говоря, представители этой группы каротиноидов гораздо реже встр ечаются в природе и накапливаются только в растениях. Среди них не най дено углеводородов. Существуют предположения, в связи с этим, что каро тиноиды с числом углеродных атомов 40 образуются в органах растений пу тем окисления каротиноидов с 40 углеродными атомами в молекуле. Кроцетин С 20 Н 24 О 4 является желтым пигменто м шафрана. В нем четыре кислородных атома находятся в двух карбоксиль ных группах: Популярный краситель для пищевых жиров биксин С 24 Н 30 О - красный пигмент с емян Bixa orellana - представляет собой метиловый эфир дикарбоновой кислоты нор биксина С 24 Н 28 О 4 : Другой краситель для жиров - азафрин С 27 Н 38 О 4 , получаемый из тропических растений видов Scrophulariacea, является оксики слотой со следующим строением: Из каротиноидов животного происхождения нельзя еще не упомянуть ре тинен, извлеченный из сетчатки глаза, адаптированной в темноте. Ретин является продуктом распада зрительного пурпура - родопсина и играет в ажную роль в механизме процесса зрения. СВОЙСТВА КАРОТИНА Кристаллический каротин представляет собой вещество темного медно-к расного цвета с блестящим металлическим оттенком. Чистые изомеры кар отина отличаются по оттенку окраски. Кристаллы -каротина - оранжево-красные с ярким блеско м, -каротин образует фиолетовые кристаллы с металлическим блеском, -каротин -темнокрасные. Форма кристаллов каротина еще недостаточно изучена. Следует предпол агать наличие полиморфизма, главным образом в зависимости от природы растворителя. Олкович и Маттилл отмечают, кроме того, зависимость форм ы кристаллов от условий кристаллизации - температуры, концентрации, ск орости охлаждения, продолжительности стояния раствора. По Цехмейстер у, каротин из смеси сероуглерода и спирта выкристаллизовывается в чет ко выраженных кубиках, из петролейного эфира, выпадает в виде призм; -каротин из бензина выкристаллизовывается в виде призм или пучков игл. Олкович и Маттилл наблюдали при кристаллизации каротина образование ромбоэдров ( из пе тролейного эфира ), треугольных пластинок (из ацетона), игл (из хлороформ а и метанола ), пучков игл (из сероуглерода и абсолютного спирта), квадра тных пластинок (из петролейного эфира и метанола). Авторы считают, что, несмотря на различие формы, каротин всегда кристаллизуется в гексаго нальной системе. Совершенно чистый каротин не имеет запаха. Однако в связи с тем, что д аже при самом тщательном хранении каротина в нем всегда образуется н екоторое количество продуктов разложения, каротин приобретает прият ный запах корней флорентийской фиалки, вызываемый -иононом. КАРОТИН КАК ПРОВИТАМИН А общие сведения Провитаминная сущность каротина заключается в том, что этот пигмент способен расщепляться в организме человека и многих животных с образ ованием витамина А. Таков, повидимому, единственный путь образования в итамина А, не синтезирующегося самостоятельно в природных условиях. В 1931 году Каррер установил, что витамин А является ненасыщенным спиртом состава С 20 Н 29 ОН с пятью конъюгированными двойными связями и -иононовым циклом: Иначе говоря, витамин А представляет собой гидролизованную половину молекулы симметричного -каротина и получается из него путем окислительного распада по средней (центральной) двойной связи: С 40 Н 56 + 2Н 2 О = 2С 20 Н 29 ОН Однако прошло довольно много времени, пока была обнаружена эта взаимо связь между каротином и витамином А. В течении почти столетия каротин рассматривался исключительно, как широко распространенный раститель ный пигмент - спутник хлорофилла, не имеющий перспектив практического использования в качестве красителя вследствие своей легкой окисляем ости. Окончательному установлению взаимосвязи между каротином и витамино м А предшествовала длительная научная дискуссия между биохимиками и физиологами. В 1918 году в печати появилась статья Стинбока и сотрудников. Авторы при водили результаты своих наблюдений над физиологической ростовой акт ивностью многих растений и растительных вытяжек, которая была аналог ична по своему характеру активности ранее уже известного фактора А р ыбьих жиров. В этой работе и в последующих исследованиях Стинбока и ег о сотрудников, было отмечено, что специфическое физиологическое дейс твие растительных материалов находится в прямой зависимости от соде ржания в них липохромов, т.е. жирорастворимых красно-оранжевых и желты х пигментов. Дреммонд в 1919 году высказал первоначально предложение о т ом, что один из этих пигментов должен быть идентичен витамину А. Стинбо к обратил внимание на каротин и нашел, что он способен стимулировать р ост крыс в отсутствии витамина А. Однако в последующих своих работах Д реммонд и сотрудники выступили с возражением против идентичности ка ротина с витамином А. Чистый кристаллический каротин в опытах этих ав торов не оказывал ожидаемого физиологического эффекта. Дреммонд утве рждал, что положительный результат у Стинбока получен за счет каких-л ибо примесей к недостаточно чистому препарату каротина. Другое возра жение, выставленное Дреммондом, заключалось в том, что наиболее эффект ивный препарат витамина А - жир печени рыб, а также и ряд других жиров, о бладающих А-витаминной активностью, не содержат каротина и не окрашен ы в характерный для него красно-оранжевый цвет. Дискуссия между американским биохимиком Стинбоком и английским физ иологом Дреммондом шла по явно неправильному пути. Вопрос был разреше н лишь после появления экспериментальных работ Эйлера и его сотрудни ков и Мура. Обнаружилось, что каротин способен быть фактором роста лиш ь при наличии витамина D, который сопутствует витамину А в рыбьих жирах , но в применяемой Дреммондом диете для крыс, кормящихся каротином, пол ностью отсутствовал. Вторая ошибка Дреммонда заключалась в том, что о н не учитывал незначительной степени ресорбции кристаллического кар отина организмом без жировой Среды. В 1929-1930 гг. была окончательно установлена А-витаминная физиологическая активность каротина, полученного из различных растительных материал ов, и впервые обнаружено, что в печени кроликов, питающихся морковью, о ткладывается не каротин, а какое-то более бледно окрашенное вещество. Вскоре выяснилось, что это вещество и является витамином А. При кормле нии крыс жировой диетой, лишенной витамина А, но содержащей определенн ые дозы простейшего, двенадцать раз перекристаллизованного каротина , Мур обнаруживал появление в печени витамина А с характерной для него полосой поглощения при 328 m , дающего по Карр-Прайсу интенсивную окраску с треххлористой сурьмой в хлороформе с максимумами поглощения 606 и 572 m . Каппер, подвергнув спектральному исследованию препараты Мура, пришел к аналогичному заключению. Наличие доказанной связи между каротином и витамином А уже значитель но облегчило расшифровку строения последнего. Анализ витамина А, прои зведенный Каррером, дал эмпирическую формулу соединения С 20 Н 30 О. В 1933 году был синтезирован пергидровитамин А ( С 20 Н 39 ОН ), совершенно идентич ный пергидросоединению природного витамина А, а в 1937 году осуществлен с интез и самого витамина А. Таким образом окончательно подтвердилось с троение молекулы витамина А и его взаимосвязь с каротином. усвоения каротина организмом и образование витамин а А Витамин А присутствует в пищевых продуктах в виде эфи ров ретинола, в основном, с пальмитиновой кислотой. Наряду с ними, чрез вычайно важным источником витамина А в питании служит каротин. Каротин, попадая в организм человека, всасывается через стенки кишеч ника, накапливается, преимущественно, в печени, где и расщепляется с об разованием витамина А. Такова общая схема усвоения каротина. Однако эф фективность данного процесса на отдельных его этапах подвержена зна чительным колебаниям в зависимости от большого количества различных факторов. Эфиры ретинола и каротиноиды, поступившие с пищей в желудочно-кишечн ый тракт, в виде жировых глобул поступают в тонкую кишку, где в присутс твии желчных кислот происходит их эмульгирование и образование мице лл. Гидролиз эфиров ретинола до ретинола и свободных жирных кислот осущ ествляется неспецифической панкреатической липазой. Свободный ретин ол и -каротин образу ют в просвете кишечника смешанные мицеллы, в состав которых входят же лчные кислоты, жирные кислоты, моноглицериды, холестерин и др., и в тако м виде достигают поверхности микроворсинок энтероцитов. Образование мицелл существенно повышает эффективность всасывания каротина и рет инола. Всасывание каротина и каротиноидов происходит, главным образом, в ве рхней трети кишечника путем пассивной абсорбции с участием переносч иков - при физиологических концентрациях витамина, или пассивной дифф узии - при более высоких концентрациях. По другим данным, всасывание ре тинола идет по активному механизму или путем пиноцитоза. Ресорбция каротина в кровь через кишечный эпителий зависит, прежде в сего, от характера воспринимаемого организмом каротинового препарат а. Само собой разумеется, что каротин сырых неизмельченных овощей и пл одов ресорбируется в минимальной степени, ибо он находится внутри неп одвижной клетки и окружен водной средой, не являющейся для него раств орителем. Значительно лучше протекает для него ресорбция в случае при менения мелко измельченного препарата или подвергнуто предваритель ной обработке, ослабляющей клеточные стенки. Решающим фактором для ресорбции каротина является наличие жировой с реды. Богатая жиром диета облегчает усвоение каротина. При бедной жир ами диете даже чистый кристаллический каротин, принятый внутрь без жи ра, не обладает почти никаким физиологическим действием. Отсюда ясно, что наилучшей формой препарата каротина является его масляный раств ор или концентрат. Наибольшее количество каротина, растворенного в ма сле, способны усваиваться организмом на 70-80 и даже 90%. При этом природа са мого масла имеет существенное значение, о чем свидетельствуют многоч исленные наблюдения. Тут играет роль, повидимому и растворимость каро тина в масле и наличие в масле окисляющих каротин примесей или стабил изаторов, химический состав масла и другие факторы, влияющие на степе нь ресорбции каротина. Проведенные на крысах опыты Бомсков и Руфа пок азали, что ресорбция каротина, растворенного в маргарине, практически равна нулю. При добавлении к маргарину одного процента ненасыщенных ж ирных кислот ресорбция каротина превышает 20%. Приведенные данные, прав да, не согласуются с позднейшими исследованиями Абрамсона и Брюниуса , которые нашли, что - каротин одинаково выявляет свойства фактора роста, будучи растворенн ым в арахидном масле или маргарине. Очевидно, рецептура маргарина име ет существенное значение. Усвояемость организмом каротина и витамина А значительно повышается в присутствии -токо ферола (витамин Е), являющегося стабилизатором-антиоксидантом. Лучше в сего ресорбируется каротин тех продуктов, которые обладают наиболее высоким содержанием витамина Е. Искусственное добавление -токоферола к каротину в олиф ковом масле и к моркови также влечет за собой увеличение усвояемости. Характерно, что при этом увеличивается и содержание каротина в кале ж ивотных, что также может быть объяснено предохраняющим действием -токоферола. Гуггенгейм считает наличие витамина Е важнейшим фактором усвоения каротина и ви тамина А. Автор изучал влияние природы масла на усвояемость каротина. В специально поставленных опытах животным давался масляный раствор к аротина с концентрацией 1,6 мг пигмента в 1 мл. Получены следующие резуль таты: Масло Содержание витамина Е Биологическая в мг% ценность Оливковое рафинированное............................................................ 0,08 44 Кокосовое нерафинированное..........................................................0,03 45 Сезамовое нерафинированное..........................................................0,05 44 Хлопковое нерафинированное......................................................... 0,92 72 Льняное нерафинированное..............................................................0,23 61 Данные таблицы свидетельствуют о несомненном влиянии содержания ви тамина Е в маслах на биологическую ценность растворенного в них карот ина. В процессе всасывания каротина кишечником принимают участия желчны е кислоты, прямо или косвенно играющие роль в переносе каротина через кишечный эпителий. Опыты, проведенные на крысах, показали, что наибольш ий эффект ресорбции каротина из кишечника имеет место тогда, когда ка ротин растворен в триолеине или 40% растворе желчи. При применении коко сового и коровьего масла ресорбция понижалась. Нарушение желчного ап парата отрицательно сказывается на усвояемости каротина, что наблюда ется у лиц, страдающих растройством желчного пузыря. В случае хрониче ской диарреи и закупоривание желчных протоков, а также и при других ра сстройствах, связанных с длительным нарушением жирового обмена, ресо рбция каротина может быть полностью исключена, а усвояемость витамин а А значительно снижена. Мак Бейн склонен приписывать желчным продукт ам по отношению к каротину и витамину А действие, аналогичное таковом у инвертных мыл (улучшение растворимости). Существуют указания о том, ч то скорость ресорбции каротина может снижаться при определенных инф екционных заболеваниях и в течение некоторого времени после них. Кроме всех отмеченных выше факторов, на усвояемость каротина животны м организмом оказывает заметное влияние и степень предварительного насыщения этого организма провитамином А, а также и размеры дозировки . При неумеренном потреблении организмом каротина неусвоившийся его избыток разлагается в кишечнике или, при наличии стабилизаторов, выхо дит из организма с калом в частично не поврежденном состоянии. Если ж е, вследствии хорошо работающего ресорбционного аппарата, чрезмерное количество каротина всосалось в кровь из пищеварительного тракта, из быток каротина способен выделяться даже через кожу, которая благодар я этому приобретает желтый цвет. Ресорбция каротина и витамина А в масляных растворах при прочих равн ых условиях протекает, примерно, с одинаковым конечным эффектом, если это относится к умеренным дозировкам. Однако большие количества каро тина не усваиваются так хорошо, как витамин А. В особенности это правил ьно, когда каротин вводится без жира или при низкой жировой диете. Ско рость ресорбции каротина и витамина А также не одинакова, что зависит, видимо, от величины молекулы. Девис и Мур определили, что максимальный уровень каротина в крови у крыс достигается при ресорбции спустя 7-8 ча сов после введения препарата. В случае витамина А аналогичный эффект достигается за 3-5 часов. После поступления в энтероцит ретинол этерифизируется жирными кисл отами, преимущественно пальмитиновой, тогда как каротин подвергается расщеплению с образованием двух молекул ретинола. Этерификация рети нола в энтероцитах происходит путем его взаимодействия с ацил-КоА, ка тализируемого микросомальной ацил-КоА: ретинолацилтрансферазой. Превращение -карот ина в ретинол происходит в две стадии. На первой стадии под влиянием -каротин-15,15’ -диоксиг еназы каротин расщепляется по месту центральной двойной связи полие новой цепи, соединяющей два его -иононовых кольца, до двух молекул ретиналя. На второй стад ии ретиналь восстанавливается в ретинол при участии другого НАДН-(НАД ФН)-зависимого фермента слизистой тонкой кишки - ретинальдегидредукта зы. По мнению некоторых исследователей, большая часть каротина в кише чнике расщепляется не по центральной, а по периферическим двойным свя зям, с образованием апокаратиналей и низкомолекулярных продуктов оки сления. Апокаротинали при участии НАД-(НАДФ) - зависимой каротинольокси дазы превращаются затем в апокаротиноевые кислоты. Однако убедительн ые эксперименты доказательства в пользу физиологической значимости подобного механизма не получены. Перейдя в кровь, каротин, как уже отмечалось выше, концентрируется пре имущественно в печени. Известно также, что определенное количество ка ротина через кровь откладывается в жировых тканях человека, коровы, л ошади. Известный уровень содержания каротина поддерживается постепе нно в крови. У млекопитающих каротин частично переходит в молоко, откл адывается в надпочечниках и желтых телах яичника. Доказано, что у большого количества животных каротин, поступающий в п ечень, подвергается расщеплению по оси симметрии молекулы с образова нием витамина А. Конверсия происходит в клетках Купфера и представляе т собой медленный, изменчивый процесс, по всем вероятиям ферментативн ого характера. Каротин постепенно исчезает, и параллельно с этим нака пливаются значительные количества витамина А. Динамика данного проце сса, а также способность печени аккумулировать в себе каротин и витам ин А зависят от особи. Начало конверсии у крыс, кроликов, кур и коров на блюдается только через несколько дней после введения каротина в орга низм животного. Способность печени некоторых животных накапливать в себе большие ко личества витамина А поистине изумительна. Крыса может за несколько дн ей отложить такое количество витамина А, которое хватило бы на пищевы е потребности нескольких месяцев. Известен опыт Мура, который специал ьной диетой добился насыщения печени крысы запасами витамина А на сто лет жизни. Наряду с этим кролик и морская свинка удерживают сравнител ьно малое количество витамина А даже при богатой каротином диете. У че ловека накопление витамина А в печени имеет тенденцию увеличиваться с возрастом. Относительно невысокая степень конверсии каротина наблюдается у ко ров. Поэтому и молоко коров, в зависимости от породы животного, может с одержать в себе преобладающие количества или каротина или витамина А. Способность конвертировать каротин в витамин А обладают не все живот ные. Ее лишен организм кошек. Гаррис отрицает ее вообще у всех плотояд ных, которые вынуждены, таким образом, поддерживать нормальный уровен ь витамина А в организме за счет животной пищи. Факт конверсии каротина именно в печени выяснен с достаточной убеди тельностью. Доказано, что при различных заболеваниях печени, при фосфо рном отравлении, при определенных болезнях скота, связанных с нарушен ием функции печени, каротин остается неконвертированным в клетках Ку пфера в больших количествах. Скорость расщепления каротина в печени з начительно понижается также при заболевании диабетом. Чрезвычайно интересный с химической точки зрения процесс конверсии каротина, согласно современным представлениям, происходит при участи и специального фермента, названного каротиназой. Существование этого фермента, впрочем, нельзя считать еще полностью доказанным. Каротина зу изучали Олькотт и Мак Кэнн, которые демонстрировали реакцию конвер сии каротина in vitro при действии печеночной ткани или водного экстракта печени животных. Подобные же опыты были осуществлены впоследствии и д ругими исследователями. Однако целый ряд авторов сообщает о том, что и м не удалось воспроизвести этой реакции. Эйлер склонен отрицать сущес твование каротиназы, приписывая ее роль крови. При действии на кароти н свежей кровяной сыворотки быка ему удалось добиться некоторого эфф екта конверсии. Капланский и Балаба установили, что превращение каротина в витамин А может происходить в тканях щитовидной железы под действием тиреогло булина. При иодировании казеина, сывороточного глобулина и некоторых других белков авторам удалось получить препараты, приблежающиеся к т иреоглобулину по своему гормональному действию. При обработке коллои дного раствора каротина иодированным казеином отмечено образование некоторого количества витамина А, обнаруживаемого спектофотометриче ским путем. Разрешение вопроса о возможности конверсии каротина химическим пут ем имеет исключительно большое практическое значение. При наличии та кого метода, не связанного со слишком сложными операциями и дающего у довлетворительные выходы, была бы разрешена проблема получения препа ратов витамина А из растительного сырья. Из приводимых фактов видно, ч то хотя каротин при оптимальных условиях его усвоения и равноценен п очти полностью витамину А, все же непосредственному введению в органи зм препаратов витамина А сопутствует более быстрая ресорбция. Отпада ет при этом и обусловленный факторами процесс конверсии. Литературны е данные, касающиеся вопроса об искусственной конверсии каротина без применения каких-либо вытяжек животного происхождения, очень немного численны. Амад установил, что некоторые анаэробные бактерии обладают способностью переводить каротин в вещества, по спектральной характер истике приближающиеся к витамину А. Бауден и Снау подвергали растворы каротина в циклогексане облучению в атмосфере азота монохроматичес ким ультрофиолетом (265 m ) и получили продукты, близкие по характеристике к витамину А. Аль дегид витамина А был получен Хантером и Вильямсом с очень малым выход ом при действии на раствор -каротина в хлороформе и ледяной уксусной кислоте перекисью водорода при тщательно контролируемых условиях. После хроматографич еского отделения от прочих продуктов окисления альдегид восстанавли вался по Пондорффу в витамин А - спирт, обладавший ожидаемой биологичес кой активностью. С точки зрения общепринятой гипотезы о происхождении витамина А искл ючительно из каротина, на первый взгляд, кажется неясным - каким образо м в жире печени целого ряда морских и пресноводных рыб накапливается огромное количество витамина А, в полторы тысячи раз превышающие макс имальное содержание каротина в растениях. Существует заслуживающая в нимания теория происхождения витамина А в рыбьих жирах из каротина зе леных водорослей. Путь этих превращений, однако, гораздо более сложен, чем при описанной выше непосредственной конверсии. За счет богатых ка ротином диатомовых водорослей развивается фитопланктон, являющийся пищей для мелких рыб. Хищные рыбы, питаются мелкими, сами уже не способ ны конвертировать каротин. Следовательно, где-то в средней цепи этих п ревращений должно происходить образование витамина, так как большему количеству фитопланктона в море соответствует большее содержание в итамина А в печени крупных рыб. способность средних рыб увеличивать с одержание витамина А при искусственном добавлении им в пищу каротина также говорит в пользу этой теории. Однако у копепод, являющихся основ ной составной частью фитопланктона северных морей, найдены лишь след ы каротина и неактивный каротиноид астацин. Последний обнаружен такж е в яйцах некоторых видов фарели. Есть предложение, что астацин являет ся промежуточным продуктом при образовании витамина А в организме ры б. Конверсия каротина протекает, повидимому, иногда и не по центральной двойной связи, а по соседней с ней. В таком случае из одной половины мол екулы каротина может образоваться -апо-5-каротинол - гомолог витамина А - с 22 углеродными атом ами и 6 конъюгированными двойными связями. Наличие этого гомолога наз ванного витамином А 2 , отмечено в жира х пресноводных рыб. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КАРОТИНА И КАРОТИНОИДОВ Биологическая активность каротина, т.е. степень способности его оказы вать на организм такое же действие, как и витамин А, зависит эффективно сть процесса его усвоения и нормальной функции конвертирующего аппа рата. Витамин А, как было указано выше, ресорбируется в кишечнике быстр ее каротина и в увеличенных дозах совершеннее. К тому же витамин А, как препарат, поступает в организм исключительно в жировом растворе. Этап конверсии при применении витамина А полностью отпадает. Каротин же м ожет вводиться в организм в самом разнообразном виде, происходя из ра зличных источников. Таким образом А-витаминная активность каротиновы х препаратов - функция многих переменных факторов. Первые исследования каротина, как провитамина А, считали его активнос ть равной активности самого витамина (в равных весовых количествах). Э то справедливо в идеальном случае, когда чистый -каротин, растворенный в масле, содержащем антиоксиданты, вводится небольшими дозами в нормально функционирующ ий организм. Тогда усвояемость того и другого препарата должна быть, примерно, одинаковой, и конверсия каротина в печени произойдет количе ственно. Следовательно, будет ли введен в организм витамин А или -каротин в том же количе стве - результирующей физиологический эффект должен быть тот же самый . Само собой разумеется, что подобное явление может иметь место только при наличии одного - изомера каротина, симметричная молекула которого при конверсии распа дается на две равноценных молекулы витамина А. В весовом количестве в итамин А получается при этом даже немного больше, если принять в расче т две присоединяющихся при конверсии молекулы воды. Целый ряд экспериментальных наблюдений действительно свидетельств ует о том, что -карот ин и витамин А в разных весовых количествах почти одинаково восстанав ливают рост крыс при небольших дозировках. Однако, наряду с этим, имеет ся значительное количество данных, свидетельствующих о более низкой активности каротина по сравнению с витамином А. Джилем с сотрудниками считают, что, вообще говоря, активность витамина А в 1,66 раза выше активн ости каротина. Андерхилл и Кауерд на основании биологической проверк и пришли к заключению о вдвое высшей активности витамина А по сравнен ию с каротином. Каррером была найдена даже в десять раз высшая активно сть витамина А. Все эти разноречивые данные с трудом поддаются сравнению, так как раз ным исследователям почти невозможно создать идентичные условия биол огической пробы. К тому же и пределы ошибок при биологическом испытан ии активности могут превышать 100 процентов (Кауерд).С другой стороны, во зможны ошибки и при химическом определении каротина в продуктах всле дствии неучитываемого разложения и изомеризации. Кроме того, А-витами нная активность каротина может колебаться в зависимости от вида живо тного. Установленные закономерности для крыс нельзя механически пере носить на других животных. Играет, повидимому, некоторую роль и возрас т особи. Унгер утверждает, что для здорового взрослого человека нет ра зличия усвояемости между витамином А и каротином. Однако для детей и с тариков каротин, будто бы, не может заменить витамин А. Наряду с этим Са ндлер подчеркивает благотворное влияние каротина на детей, что между прочим, подтверждается и известной нам практикой отечественных терап евтов. Большое значение для А-витаминной активности каротина имеет состав и зомеров в препарате. Если молекула -каротина при конверсии нацело распадается на две моле кулы витамина А, то при конверсии молекулы - или -каротинов должна быть равна только половине активности -каротина, что и доказан о еще Куном и Брокманом в 1933 году. Однако и в этом, казалось бы вполне яс ном вопросе, не обошлось без противоречий. Эйлер, Каррер и Цубрис не ус тановили большой разницы между - и -к аротинами, как факторами роста крыс. Впрочем ростовая функция каротин а, согласно современным представлениям, уже не считается главнейшим и характерным признаком его физиологического действия. Биологическая активность каротина, вводимого с естественными продук тами, зависит также от происхождения этих продуктов, от их обработки п еред употреблением в пищу, от способа введения их в организм и величин ы дозировки, от влияния сопутствующих веществ и от степени насыщеннос ти организма каротином. Литературные данные по этому вопросу, однако, достаточно разноречивы. Согласно Грейвсу каротин зеленых растительн ых материалов более активен, чем каротин желтых и оранжевых продуктов . Так, например, активность каротина в варенной моркови, по данным авто ра достигает лишь 25% активности витимина А. Активность же каротина спар жи равна активности витамина А. По данным Эриксена и Хейгаарда кароти н сырой моркови усваивается организмом только на 1%, каротин вареной мо ркови - на 19%. Для шпината же эти данные соответственно равны 45 и 48%. Шерман нашел, что каротин в шпинате обладает вдвое большей биологической акт ивностью, чем каротин в моркови. Наряду с этим Смис и Отис утверждают, ч то активность каротина в шпинате равна активности чистого кристалли ческого каротина, растворенного в масле; активность же моркови - в шест ь раз меньше. Такие же несовпадения имеют место и для люцерны, если сра внить данные различных авторов. Подобных примеров можно было бы приве сти еще большее количество. Предпринятые Шерманом, а также Грейвсом, п опытки обобщить все эти наблюдения, следует признать несостоятельным и. В вопросе о сравнительной биологической активности витамина А и ка ротина, попадающего в организм с различными продуктами, нет еще оконч ательно установившейся определенности. Биологическая активность содержащих каротин или витамин А препарато в или продуктов выражается в настоящее время в интернациональных еди ницах ( I. U.). Международная конференция по витаминам, состоявшаяся в 1931 год у в Лондоне, приняла в качестве стандарта А-витаминной активности чис тый, многократно перекристаллизованный каротин, полученный из морков и. За интернациональную единицу активности условились считать ту акт ивность, которой обладает 1 (одна тысячная миллиграмма) этого международного стандарта каротина. Впоследствии, однако, выяснилось, что каротин моркови состои т из смеси изомеров и что -изомер отличается по активности от -изомера. Поэтому на следующей конференции, 1934 го ду, в качестве стандарта А-витаминной активности был принят чистый -каротин, растворенн ый в кокосовом масле. На основе сравнения активности старого стандарт а с активностью -кар отина было найдено, что интернациональная единица равна 0,6 -каротина. Такое выражение А-витаминной активн ости существует и до сих пор. Гораздо реже можно встретить в литератур е выражение А-витаминной активности в так называемых “крысиных едини цах”. Крысиная единица - это то минимальное ежедневное количество -каротина, которое дост аточно, чтобы предохранить крысу от А-авитаминоза (1,8-3,0 -каротина). Следует помнить, что количество интернациональных единиц в единице в еса какого-либо каротинсодержащего продукта выражает именно биологи ческую А-витаминную активность данного продукта, но отнюдь не являетс я мерилом количественного содержания каротина, что должно быть ясным на основе всего, сказанного выше. Интернациональной единице соответс твует только 0,6 чис того -каротина в кок осовом масле, но не 0,6 каротина, воспринимаемого с различными продуктами. Бутс и сотру дники ошибочно критикуют опубликованные Пайком данные о А-витаминной активности овощей, полученной в результате биологических испытаний. Сделав простой пересчет каротина, определенного химическим путем в м оркови, на витамин А, эти авторы не основательно утверждали, что биолог ическая активность моркови должна быть гораздо большей, чем это было определенно Пайком. Это, к сожалению, не единичный случая. Другие иссле дователи иногда также склонны характеризовать активность препарато в путем простого деления в них каротина на эквивалент интернациональ ной единицы. Такие данные соответствуют, конечно, не действительной, а, так сказать, “потенциальной активности”, т.е. такой, которая имела бы ме сто, если бы каротин препарата при идеальных условиях максимально усв оился организмом. Действительная же активность любого препарата или продукта может быть установлена в результате биологического его исп ытания по сравнению с принятым международным стандартом. Большой интерес представляет вопрос о зависимости между биологичес кой активностью и строением изомеров каротина и родственных им соеди нений. Вдвое меньшая активность - и -к аротинов по сравнению с -каротином свидетельствует о том, что как перемещение двойной св язи в цикле, так и раскрытие цикла влечет за собой потерю активности. П оследнее подтверждается также полным отсутствием А-витаминной актив ности у каротина и ликопина. Однако и без раскрытия -иононового цикла присоединение к н ему кислорода с образованием кетогруппы также связанно с потерей акт ивности. Аналогично влияет на активность и введение в цикл гидроксила . Так, например, каротиноиды афанин (моно-кето- -каротин) и криптоксантин (моно-гидрокси- -каротин) имеют половин ную по сравнению с - каротином А-витаминную активность за счет сохранившихся в одной поло вине молекулы неизмененных -иононовых циклов. Обобщая эти наблюдения, можно было бы вывести общее заключение, что п оловинной, по сравнению с -каротином, витаминной активностью обладают только те кароти новые красящие вещества, у которых в одной половине молекулы имеется неизмененный -ионон овый цикл (криптоксантин, афанин, миксоксантин, семи- -каротинон, дигидро- -каротин, -каротин-моно-эпоксид, мутатохром и др.). Результаты биологических испытаний соответствуют этим заключениям. В 1940 году Шормиллер экспериментально подтвердил на большом количестве объектов, что наличие в молекуле неизмененного -иононового цикла является как бы непреме нным условием биологической активности соединений подобного типа. Однако из этого правила есть некоторые исключения. Специальные иссле дования показали, что живой организм способен переводить некоторые п ервичные продукты окисления, гидрирования и галоидирования -иононового цикла обратно в -ионон. Сказанное относится к -кароти н-моно- и ди-эпоксиду, дигидрокаротину и -каротин-ди-иодиду, переходящем в организме в то й или иной степени снова в -каротин. Винтерштейн и Функ утверждают, что таким путем можн о получить А-витаминно-активное соединение из заведомо неактивного к аратиноида родоксантина. Дигидросоединение последнего имеет -иононовое строение, в прот ивоположность самому родоксантину, обладающему -иононовым строением. Эйлер, Каррер и Цубр ис получили активные соединения из неактивных каротиноидов зеаксант ина и лютеина, имеющих гидроксилированные циклы, путем замещения гидр оксилов на бром действием трехбромистого фосфора. Способность животного организма восстанавливать эпоксиды до образо вания свободных от кислорода соединений отмечена в последнее время т акже Каррером и его сотрудниками. А-витаминная активность -каротин-эпоксида, -каротин-ди-эпоксида и лютеохр ома была установлена экспериментально на крысах. Обнаружено, что -каротин-эпоксид активе н в дозе 10 , -каротин-ди-эпоксид в дозе 17 и лютеохром в дозе 18 . Следовательно, ж ивотный организм способен частично переводить эти соединения соотве тственно в -каротин , -каротин и мутатох ром. Становится также понятным отсутствие активности у аурохрома, так как последний обладает кислородными атомами, заключенными в двух фур аноидных группировках, не способных к восстановлению. Второй структурный элемент молекулы - промежуточная алифатическая це пь - представляется, с первого взгляда, не имеющей никакого влияния на а ктивность, так как она совершенно одинакова у всех каротиновых красящ их веществ - активных и неактивных. Однако это не так. Один -ионон, как известно, А-витамин ной активностью не обладает. Наличие полиметиновой цепи является неп рерывным условием физиологического действия его производных. Каррер в упоминавших выше работах по получению -апо-каротиналей и соответствующих им каротино лов установил, что - апо-2- и -апо-4-каротина ли и каротинолы обладают А-витаминной активностью. Обладает ею, естест венно, и -апо-6-кароти нол. При дальнейшем же укорочении алифатической цепи активность исче зает. Следовательно активность при наличии -иононового цикла обусловливается также и нал ичием определенной длины цепи конъюгации, включающей в себя не менее пяти двойных связей. Таким образом витамин А является наиболее эконом ной природной формой активного соединения, содержащего одни лишь нео бходимые для биологической активности структурные элементы. Нарушение конъюгации в алифатической цепи влечет за собой потерю ак тивности. К такому же результату приводит и полное насыщение двойных связей (пергидрокаротин). Активность сохраняется лишь тогда, когда при мыкающая к -иононов ому циклу часть алифатической цепи построена минимум из двух изопрен овых остатков. Исследования последних лет показали, что А-витаминную активность -каротина, находящег ося в полной трансформе, за 100, то получается следующая картина относит ельных активностей некоторых стериоизомеров (по результатам биологи ческого испытания на крысах): -каротин ..................................................................100 нео- -карот ин U........................................................38 -каротин ...................................................................53 нео- -карот ин U.......................................................13 -каротин ....................................................................28 про- карот ин..............................................................44 Из приведенных данных вполне очевидно, что наличие ци с-конфигураций в молекуле каротина связано с заметным понижением акт ивности. Таким образом с целью предохранения от потери активности изо меризации (длительное нагревание, действующих кислот, света и при прои зводстве препаратов каротина необходимо избегать условий, благоприя тствующих его т.д.). КАРОТИНОИДНЫЙ СОСТАВ СЫВОРОТКИ КРОВИ При исследовании в 1992-97 гг. метод ом ВЭЖХ содержания каротиноидов в сыворотке крови различных групп на селения России недостаточная обеспеченность этими пищевыми веществ ами ( суммарный уровень в крови <80 мкг\дл ) была выявлена у 31% взрослого на селения г. Москвы, у 53% - г. Норильска, у 59% здоровых детей г. Норильска и у 69-87% д етей, страдающих различными заболеваниями, ( г. Москва ). В каротиновом сп ектре обследованных жителей России преобладают три основных каротин оида: ликопин, -карот ин, лютеин, на долю которых приходится в среднем 32,0%, 24,0% и 23,6% ( лютеин с зеак сантином ) соответственно. За ним следует -каротин (7,0%), -криптоксантин (5,4%), -криптоксантин (0,9%) и неидентифицированные каротиноиды (7,1%). Женщины обеспечены каротиноидами лучше, чем мужчины, что, в первую оче редь, обусловлено более высоким содержанием в их сыворотки крови -каротина. Среднее значения суммарного содержания каротиноидов в сыворотке кро ви частоболеющих детей, детей с хроническими заболеваниями ЖКТ и врож денными нарушениями обмена веществ (фенилкетонурия, гликогеноз, митох ондриальная патология ) существенно снижены и составляют 41 - 67 мкг/дл. Установлены средние арифметические значения и пределы колебаний со держания отдельных каротиноидов ( мкг/дл ) в сыворотке крови характерны е для взрослых людей, обеспеченность которых всей суммой каротиноидо в соответствует норме ( 80 - 230 мкг/дл ): ликопин - 42,3 ; -каротин - 32,2; лютеин+зеаксантин - 27,3; -каротин - 8,5; -криптоксантин - 7,9; -криптоксантин - 1,4. Каротиновый спектр сыворотки крови мужчин, женщин, беременных женщин и детей с низким содержанием суммы каротиноидов ( ниже 80 мкг/дл) отличае тся от спектра соответствующих групп людей с нормальной обеспеченно стью этими пищевыми веществами ( сумма каротиноидов в пределах 80 - 230 мкг/ дл ) преимущественным снижением содержания основных каротиноидов: лик опина, лютеина, -каро тина и -криптоксант ина, на долю которых приходится от 62,6 до 96,0% всей суммы каротиноидов, прис утствующих в крови. Включение в рацион взрослых людей и детей, страдающих различными заб олеваниями, пищевых продуктов (крекеры, кукурузные палочки, раститель ное масло), обогащенных -каротином, в количестве, обеспечивающем дополнительное потребл ение 5 мг этого каротиноида в сутки в течении трех недель, приводило к увеличению концентрации -каротина в сыворотке крови обследуемых в среднем в 2-4 раза, не вл ияя существенным образом на содержание других каротиноидов. ВИТАМИН А И ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЙ РОСТ Это вопрос служит в последние годы предметом многочисленных исследо ваний, получивших отражение в ряде обстоятельных обзоров. Исследования на экспериментальных животных показали, что ретиноиды обладают способностью тормозить развитие опухолевого процесса. Наиб олее убедительный эффект ретиноиды проявляют в отношении химическог о канцерогенеза, в особенности, в случае рака кожи, грудной железы и мо чевого пузыря. Во всех этих случаях развитие рака происходит, как пола гают, в соответствии с двухстадийной схемой (стадия инициации и стади я промоции), причем ретиноиды выступают в качестве типичных антипромо торов, то есть соединений, блокирующих не инициацию канцерогенеза, а е го прогрессирование. В связи с этим их действие оказывается эффективн ым и при достаточно значительном временном интервале между воздейст вием канцерогена и применением ретиноидов. Алиментарная недостаточность витамина А у животных ведет к повышени ю их чувствительности к действию канцерогенов, в частности, афлатокси на, диметилгидрозина, 3-метилхолант-рена и др. В то же время имеются данн ые и о противоположном эффекте: дефицит витамина А подавлял рост опух олей толстой кишки, вызванный интраректальным введением N - метил-нитро - N - нитрозомочевины. В отличии от данных о преимущественно ингибирующем действии ретинои дов на химический канцерогенез, данные об их эффектах в отношении вир усного канцерогенеза, трансплантируемых опухолей, а также опухолей, в ызываемых УФ-облучением, противоречивы и, в основном, указывают на отс утствие способности ретиноидов к торможению роста опухолей этого пр оисхождения. В серии массовых эпидемиологических исследований была выяснена свя зь между сниженным потреблением с пищей витамина А и повышенной часто той возникновения рака. При этом была обнаружена особая роль достаточ ного потребления с пищей -каротина, который, как было уже отмечено, может оказывать эффект ы, не связанные с его превращением в организме в витамин А. Была показана возможность использования ретиноидов не только для пр офилактики, но и для лечения злокачественных новообразований, в частн ости, рака легкого, головы и шеи у людей. Исключительно важным достоин ством ретиноидов является их способность повышать, а не понижать, в от личии от других противоопухолевых препаратов и лучевой терапии, имму нный ответ организма, которому принадлежит важнейшая роль в борьбе ор ганизма с опухолями. В связи с этим указывают на особую перспективнос ть сочетания лучевой терапии с ретиноидами при лечении больных с нов ообразованиями. ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ КАРОТИНА Как было отмечено выше, каротин в животном организме расщепляется с образованием витамина А. В соответствии с этим и оказываемое каротино лом физиологическое действие, в основном, такое же, как и действие вита мина А. Авитаминозы и гиповитаминозы А чрезвычайно разнообразны. Они выража ются в задержке развития и роста организма, падение в весе, поражении кожных покровов и слизистых оболочек и в связанном с этим понижением сопротивляемости инфекционным заболеваниям. Недостаток витамина А в ызывает понижение остроты зрения и болезни глаз - куриную слепоту, кер атомаляцию и ксерофтальмию. Авитаминозы и гиповитаминозы А сопровожд аются также общим исхуданием, потерей аппетита, растройством нервной системы и деятельности кишечника, нарушением деятельности полового а ппарата, поражением дыхательных путей и слизистых оболочек носа и гор тани и пр. Патологические последствия авитаминоза А одинаковы для людей и боль шого количества животных, для которых при этом особенно характерно за болевание дыхательной и пищеварительной систем, медленное эмбрионал ьное развитие плода, склонность к абортам, потускнение волосяного пок рова. У птиц снижаются инкубационные качества и витаминность яиц, пов ышается смертность цыплят. В настоящее время известно, что большинство витаминов отличается мно госторонним физиологическим действием. Однако для целого ряда из них характерна, наряду с этим, все же определенная специфичность (витамин С - цынга, витамин В 1 - бери-бери, витамин D - рахит и т.д.). Для каротина и витамина А такой специфичности установит ь нельзя. Первоначально каротин и витамин А считались факторами роста. Известн о, что отсутствие в пище витамина А влечет за собой приостановку роста молодых животных и детей и падение их веса. Однако подобные явления н аблюдаются и при отсутствии других витаминов, некоторых минеральных солей, аминокислот и пр. Обнаруженное впоследствии свойство каротина и витамина А способствовать стойкости организма против инфекционных заболеваний дало право назвать витамин А “антиинфекционным”. С друго й стороны, предохраняющая роль витамина А (и каротина) против глазных б олезней, в частности ксерофтальмии, послужила основанием назвать его “антиксерофтальмическим”. За последние время исследователи физиолог ического действия каротина и витамина А склонны рассматривать их гор мональную функцию, как одну из наиболее существенных для организма че ловека и животных. Последнее дает право предполагать наличие если не общности, то во всяком случае определенных точек соприкосновения в ро ли каротина для растительных и животных организмов. Здоровый организм человека и животных нуждается в систематическом в ведении извне с пищевыми продуктами или препаратами необходимыми дл я его нормального функционирования определенных количеств витамина А или каротина. Применение последних в качестве профилактических и ле чебных агентов показано также и в ряде специфических случаев. Каротин или витамин А необходим беременным женщинам и кормящим матерям для н ормального питания и роста плода. Чрезмерное употребление витамина А на ранних стадиях беременности может в некоторых случаях привести к появлению дефектов у новорожденных. Как показало исследование специа листов Бостонского университета, для женщин, принимающих витамин А в д озе свыше 10 тысяч МЕ (международных стандартных единиц) в день, существ ует вероятность рождения детей с деформацией лица, головы, сердца или дефектами нервной системы. В ходе исследования, которое проводилось с середины 80-х годов, были об следованы 22748 беременных женщин. В 339 случаях у новорожденных обнаружили врожденные дефекты. При этом исследователи выяснили, что примерно 2% б удущих мам слишком “налегали” на витамин А. В наборах поливитаминов, продающихся в США без рецепта, как правило, в итамин А содержится около 5 тысяч МЕ. В то же время в продажу поступает и витамин А в капсулах, содержащих до 25 тысяч МЕ. “Все будущие матери до лжны знать о потенциальной опасности чрезмерного употребления витам ина А”, - отметил автор исследования доктор Кеннет Ротман. Предостереже ние не распространяться на -каротин, содержащийся в моркови и других овощах. Эту “растит ельную” форму витамина А исследователи считают совершенно безвредно й. Детям витамин А полезен для нормального роста и правильного развития организма. Каротин и витамин А оказывают благотворное влияние на теч ение инфекционных детских болезней (корь, дифтерит, коклюш, бронхит, пн евмония и др.). Поддерживая в нормальном состоянии слизистые оболочки носа, горла и др., каротин и витамин А повышают сопротивляемость органи зма людей всех возрастов к инфекционным заболеваниям и являются необ ходимыми при лечении хронических насморков, ларингитов, болезней дых ательных путей и пр. Препараты каротина и витамина А рекомендуется принимать при камнях п ечени, почек, мочевого пузыря, при заболеваниях сальных, потовых и слез ных желез, при гиперфункции щитовидной железы и базедовой болезни, а т акже при лечении пораженных участков кожи, ожогах, обмораживаниях, асе птических и гнойных ранах. У здоровых людей каротин и витамин А улучша ют способность применяться к изменению освещения, повышают остроту з рения. Каротин и витамин А являются, повидимому, единственным радикаль ным средством для предупреждения и излечения перечисленных выше гла зных болезней - гемералоптии (куриной слепоты), кератомаляции и ксерофт альмии. Не следует, однако, считать, что физиологическое действие каротина св язано только лишь с фактом перехода его в витамин А. В ряде случаев кар отин, повидимому, обладает и самостоятельным физиологическим действи ем. Достаточно убедительные данный в пользу этого предположения прив одится, например, Рачевским. Истинная природа физиологического действия каротина на животный ор ганизм не поддается еще в настоящее время сколько-нибудь точной обобщ енной интерпретации, несмотря на обилие накопленного эмпирического м атериала. Наиболее ясна картина участия структурных элементов молеку лы каротина в химических процессах, происхождения в зрительном аппар ате (главным образом работы Гехта с сотрудниками и Вальда). Установлен о, что структурные элементы молекулы каротина входят в состав ретинен а, являющегося простетической группой белкового вещества родопсина ( зрительного пурпура). Последний выполняет роль в процессе зрения, как фотосенсибилизатор и автоматический регулятор чувствительности гла за к свету. Случаи гиперкаротиноза значительно более редкий, чем случаи гиперви таминоза А. При чрезмерном снабжении организма каротином последний о бычно ресорбируется отчасти. Если же ресорбция достигла значительных размеров, избыточное количество каротина может выделяться даже чере з кожу (“ксантоз”). Редкий случай гипервитаминоза, повлекший за собой р асширение печени катаракт и другие серьезные расстройства. Потребность человеческ ого организма в каротине или витамине А, согласно современным данным, равна 3-5 мг для взрослых и 2-3 мг для детей. Интересно отметить возникнове ние за последние годы новой области применения каротина и витамина А в животноводстве - при разведении пушных зверей. Витаминизация кормов, при этом, способствует получению блестящего, красивого и прочного мех а. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ: 1. Савинов Б.Г. Каротин (провитамин А) и получение его препаратов. - Киев: Издательство Академии Наук Украинской ССР, 1948 . 2. Душейко А.А. Витамин А - Киев: Наукова Думка, 1988. 3. Дмитровский А.А. Экспериментальная витаминология, Ред. Островский Ю.М. - Минск: Наука и техника, 1979. 4. Поздняков С.П. Успехи современной биологии - 1985. - 100, вып. 2 (5). 5. Плецитый К.Д., Лидак М.Ю. Витамин А и синтетические ретиноиды в иммунологии и онкологии. - Рига: Зинатне, 1984. 6. Сисакян Н.М., Биохимия и физиология витаминов. 1953 7. Таранова А.Г. Каротиновый состав сыворотки крови разных групп населения и влияние на него пищевых продуктов, обогощенных бета- каротином: Автореф. - Москва , Ин-т питания АМН России, 1998. 8. Потапов В.М Органическая химия. - Мо сква: - Просвещение, 1983 9. Механизм межвитаминных взаимодействий. Минск, Наука и техника, 1973 г. 10. Стайлер Л. Биохимия ( в 3-х томах) - Мос ква: Мир, 1985. 11. Конъ И.Я. Биохимические механизмы действия витамина А: Автореф. дис. док. мед. наук. - Москва, Ин-т питания АМН СССР, 1987. 12. Журнал “Здоровье” , март, 1998.
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
Дорогой, это не я тебе на шею села... это ты мне между ног залез.
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, курсовая по химии "Биологическая роль каротиноидов", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru