Курсовая: Противовирусные препараты - текст курсовой. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Курсовая

Противовирусные препараты

Банк рефератов / Медицина и здоровье

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Курсовая работа
Язык курсовой: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Microsoft Word, 897 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникальной курсовой работы

Узнайте стоимость написания уникальной работы

50 МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ УКРАИНЫ УКРАИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ХИМИКО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Кафедра ХТОВ КУРСОВАЯ РАБОТА На тему: «ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ» Днепропетровск 2 005 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕ НИЕ 3 1. ОБЩИ Е ПОЛОЖЕНИЯ 5 2. ИСТО РИЯ СОЗДАНИЯ ПРОТИВОВИРУСНЫХ ПРЕПАРАТОВ 9 3. КЛАС СИФИКАЦИЯ противовирусных средств 12 А) Интерферон 13 Индук торы интерферона 13 Б) Про изводные амантадина и других групп синтетических соединений 13 В) Нукл еозиды 14 Г) Прот ивовирусные препараты растительного происхождения 14 4. МЕХАНИЗМ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ 15 4. 1. Противогриппозны е препараты [6] 15 4.2. Противогерпе тические и пртивоцитомегаловирусные препараты [6] 15 4.3. Лека рства, влияющие на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) [6] (зидовузин, фосфо ноформат) 16 4.4. Противовирус ные препараты широкого спектра действия (интерфероны) [6] 16 4.5. Амиксин – воз можности и перспективы применения в клинической практике 17 4.5.1. Название и описание препарата Амиксин 19 4.5.2. Про тивовирусная активность и индукция клеток – продуцентов интерферона. 19 4.5.3. Дей ствие на иммунную систему и воспалительный процесс. 20 4.5.4. Фар макокинетика 20 4.5.5. Док линические исследования противовирусная активность препарата 20 5. ПОЛУЧЕНИЕ противовирусных ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРА ТОВ 21 5.1. Новые пути синтеза хлоргидрата тилорона [8, 9] 21 5.2. Полу чение бонафтона (6-бром-1,2-нафтохинон) 22 5. 3 . ГОССИПОЛ 22 5. 4 . ПОЛУЧЕНИЕ ЛЕЙК ОЦИТАРНОГО АЛЬФА-ИНТЕРФЕРОНА 24 7. ТАБЛИЦА противовирусных ПРЕПАРАТОВ 35 ЛИТЕР АТУРА 40 СЛОВА РЬ ТЕРМИНОВ 41 ВВЕДЕНИЕ Вирусы [3] – неклеточные формы жизни, обладающие собств енным геном и способные к воспроизведению лишь в клетках более высокора звитых существ. Для вирусов характерны две формы существования: внеклет очная и внутриклеточная (репродуцирующаяся). Вирусы по составу различаю тся на две большие группы: простые и сложные. Первые состоят только из бел ка и нуклеиновой кислоты, тогда как вирусы сложные наряду с этими компон ентами содержат в своем составе липиды, углеводы в виде гликопротеидов. Для вирусов характерно большое разнообразие форм нуклеиновых кислот, в том числе таких форм РНК и ДНК, которые отсутствуют у клеточных форм жизн и. Размножение вирусов происходит в клетке. Многие вирусы поглощаются кле ткой путем пиноцитоза. Попав в клетку, они освобождаются от оболочки. Пер вые этапы развития вирусов в клетке в общих чертах состоят в том, что стро ятся так называемые ранние белки, т.е. белки ферменты, необходимые вирусу для репликации их нуклеиновых кислот. Так называемые поздние белки учас твуют в образовании белковых оболочек дочерних вироспор. Из ферментов у вирусов содержащих ДНК, одним из первых синтезируется полимераза РНК, ко торая строит на нити ДНК информационную РНК. Эта РНК попадает на рибосом ы нити и происходит синтез других белков вирусной частицы. Вирусы, содержащие РНК, синтезируют полимеразу, катализирующую синтез н овых частиц вирусной РНК; эта РНК переходит на рибосомы и контролирует с интез белка капсида. Вирус, содержащий РНК, не нуждается в ДНК для размнож ения и передачи генетической информации. Вирусы вызывают различные болезни. Вирусные болезни весьма разнообраз ны и зависят от природы вирусов, их вирулентности, путей проникновения в организм и преодоления естественных защитных барьеров организма. Зара жение может произойти через воздух, пищу, молоко, воду, через различные пр едметы, через укус кровососущих членистоногих (комаров, москитов и клеще й). Один из факторов естественной защиты клетки от вирусов – выработка к летками интерферона – вещества, создающего резистентность клетки к ви русу, хотя это защитное действие и кратковременно. Интерферон [3] – низкомолекулярный белок с противовирусными свойствами , содержащий некоторое количество углеводов, включая глюкозамин. Открыт в 1957г. Айзеком и Линденманом [3]. Основное свойство интерферона заключается в противовирусном действии, проявляющемся в подавлении размножения ин фекционных и онкогенных вирусов. Самым активным интерфероном является интерферон человека. Интерферон не обладает избирательной противовиру сной активностью и действует практически на все вирусы. Интерферон непосредственно не инактивирует вирусы или их нуклеиновые кислоты, не препятствует адсорбции и проникновению вируса в клетку, а та кже его депротеинизации. Интерферон проявляет свое действие на внутрик леточном этапе репродукции вируса. Механизм взаимодействия интерферон а с клетками, в которых он индуцирует антивирусное состояние, остается н еясным. По данным одних авторов, интерферон может индуцировать антивиру сное состояние в клетках без обнаружения потери активности, по другим за щитное действие интерферона связано с интенсивностью его поглощения. Допускается действие интерферона на уровне, как трансляции, так и транскрипции. В пользу первого свидетельс твуют данные о том, что интерферон, не влияя на синтез вирусоспецифической РНК, ингибирует синтез вирусных белков. Он не только уменьшает количество образующихся вирусоспецифических полипептидов в зараженных клетках, но приводит также к укор очению полипептидных цепей. Предполагают, что интерферон может модифиц ировать вирусную РНК настолько, что она утрачивает способность участвовать в образовании полисом. Сторонники действия интерферона на уровне транскрипции опираются на д анные об ингибиторном действии интерферона на транскрипцию ранней вир усной РНК. Эта ингибиция связана с подавлением вирусиндуцированного си нтеза, обусловленного вирионной РНК – зависимой полимеразой. Наиболее распространенным является предположение о том, что в результате воздей ствия интерферона нарушается трансляция, что обуславливает невозможно сть осуществления последующих этапов в репродукции вируса. Существует множество агентов, котор ые способствуют образованию интерферона в клетках и тканях. Их называют индукторами интерферона . 1. О БЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ Создание противовирусных средств [2] является одной из наиболее сложных задач химиотерапии инфекций. Связано это с тем, что РНК- и ДНК-содержащие вирусы являются облигатными внутриклеточными паразит ами. В процессе размножения вирусы в основном используют аппарат биосин теза клеток макроорганизма, определенным образом модифицируя его. В свя зи с этим крайне трудно находить избирательно действующие средства, кот орые поражали бы вирусы , не повреждая клетки «хозяина». Тем не менее за по следние годы появились отдельные противовирусные препараты, которые о бладают определенной избирательностью действия в отношении зараженны х вирусом клеток и подавляют репликативный цикл вируса. В этом отношении привлекают внимание некоторые аналоги нуклеозидов, обладающие относи тельно избирательным действием на вирусы. Такая возможность основана н а том, что некоторые вирусы (например, вирус простого герпеса, вирус опояс ывающего лишая) после проникновения в клетки индуцируют образование св оих ферментов, которые могут отличаться по распознанию субстрата по сра внению с аналогичными ферментами самой клетки. К числу таких ферментов относятся, н апример, дезокситилендинкиназы и ДНК-полимеразы. Так, напрмер, ацилогуан озин (ацикловир), проникая в клетку, фосфорилируется вирусной дезокситим идинкиназой и в виде трифосфата угнетает ДНК-полимеразу вируса простог о герпеса (в большей степени, чем ДНК-полимеразу клетки). Кроме того, это со единение встраивается в ДНК вируса. Рибавирин действует по иному принци пу: в виде 5 – трифосфата, он специфически угнетает РНК-полимерную транск риптазу ДНК вирусов. Полученные данные весьма перспективны для создани я новых избирательно действующих противовирусных средств. Направленность действия противовирусных средств может быть различной . Она касается разных стадий взаимодействия вируса с клеткой. Так извест ны вещества, которые действуют следующим образом[2]: 1. Угнетают адсорбци ю вируса на клетке и(или) проникновение его в клетку, а также процесс высво бождения («депротеинизации») вирусного генома (мидонтан, ремантадин). 2. Угнетают синтез «р анних» вирусных белков-ферментов (гуанидин). 3. Угнетают синтез ну клеиновых кислот (зидовудин, ацикловир, видарабин, идоксуридин). 4. Угнетают «сборку» вирионов (метисазон). 5. Повышают резистен тность клетки к вирусу (интерфероны). Одни препараты предназначены для лечебных целей, другие – преимущественно для профил актики вирусных средств. Мидантан (адамантанамина гидрохлорид, амантадин, вирегит, симметрел) вли яет на микровирусы, которые относятся к РНК-содержащим вирусам. Считают, что мидантан затрудняет прохождение вируса в клетку «хозяина», а также и нгибирует процесс высвобождения в клетке вирусного генома. Хорошо всас ывается из желудочно-кишечного тракта. Выделяется в основном почками. Основное применение мидантана – профилактика гриппа типа А2. В качестве лечебного средства он неэффективен. Мидантан может оказывать отрицательное влияние на ЦНС (повышенная возб удимость, сонливость, тремор, атаксия). Возможны диспепсические нарушени я, кожные поражения. Аналогичными свойствами и показаниями к применению обладает ремантадин (ремантадина гидрохлорид), сходный по химической ст руктуре с мидантаном. Глобальной проблемой является лечение синдрома приобретенного иммуно дефицита (СПИД). Вызывается он специальным ретровирусом. Терапия СПИДа т ребует применения противоретровирусной, иммуномодулирующей, а также с имптоматической терапии. Из пртивовирусных препаратов применяется тол ько азидотимидин ( 3-азидо-3-дезокситимидин). Коммерческий препарат азидот имидина получил название зидовудин (азидотимидин, ретровир). Принцип дей ствия зидовудина заключается в том, что он, фосфорилируясь в клетках, гин гибирует обратную транскриптазу ДНК вирусов. Препарат хорошо всасывае тся. Биодоступность примерно 65%. Хорошо проникает через гематоэнцефалич еский барьер. Около 75% препарата метаболизируется в печени (образуется гл юкоронид азидотимидина). Часть зидовудина выделяется в неизменном виде почками (по ряду данных 16 – 18%). Применение зидовудина следует начинать возможно раньше. Терапевтическ ий эффект его проявляется в основном в первые 6-8 мес. от начала лечения. К со жалению, зидовудин не излечивает больных, а лишь задерживает развитие за болевания. Кроме того, к нему развивается лекарственная устойчивость ре тровируса. В настоящее время ведутся широкие поиски новых лекарственны х препаратов и вакцин, которые остро необходимы для изменения крайне неб лагоприятной эпидемиологической ситуации со СПИДом. Из побочных эффек тов зидовудина на первое место выступают гематологические нарушения: а немия, нейтропения, тромбоцитопения, панцитемия. Возможны голвная боль, бессоница, миалгия, угнетение функций почек. Значительным достижением я вляется создание высокоэффективного противогерпетического средства анцикловира (зовиракс). Химически является производным геданина. В клетк ах анцикловир фосфорилируется. В инфицированных клетках анцикловира т рифосфат оказывает ингибирующее влияние на ДНК- полимеразу вируса. Из же лудочно-кишечного тракта всасывается около 1/5 введеного вещества. Макси мальная концентрация накапливается через 1 – 2 часа. Биодоступность око ло 20%. С белками плазмы связывается 12 – 15% вещества. Вполне удовлетворитель но проходит через гематоэнцефалический барьер. Эффективным противовирусным препаратом является также видоробин (аден ин, арабинозид). Проникнув в клетку, видоробин фосфорилируется. Угнетает вирусную ДНК-полимеразу. При этом подавляется репликация крупных ДНК-со держащих вирусов. В организме частично превращается в менее активный в о тношении вируса гипоксонтина арабинозид. С успехом применяется при герпетическом энцефалите (вводят путем внутр ивенной инфузии), снижая летальность приэтом заболевании на 30 – 75%. Иногда используют при осложненном опоясывающем лишае. Эффективен при герпети ческом пиротоконъюктивите. Идоксуридин (керицид, идуридин, офтон-УДИ), являющийся аналогом тимидина, встраивается в молекулу ДНК. В связи с этим он подавляет репликацию отде льных ДНК-содержащих вирусов. Применяют идоксуридин местнопри герпети ческой инфекции глаз (кератитах). Может вызывать раздражение, отек век. Дл я резорбтивного действия мало пригоден, так как токсичность у препарата значительная. Выраженной противовирусной активностью обладает метисазон (мирборан). Он эффективен в отношении вируса оспы. Механизм действия, повидимому, св язан с тем, что метисазон нарушает процесс сборки вирионов, угнетая синт ез вирусного структурного белка. Препарат оксолин обладает умеренной эффективностью при аденовирусном керитоконъюктивите, герпетическом кератите, некоторых вирусных заболе ваниях кожи. Для профилактики вирусных инфекций используют также интерфероны. Это г руппа биогенных веществ, относящихся к низкомолекулярным гликопротеин ам, вырабатываемых клетками организма при воздействии на них вирусов. Он и вызывают устойчивость клеток к поражению их вирусами. Образуются инте рфероны в самом начале вирусной инфекции. Характеризуются широким прот ивовирусным спектром (специфичностью действия в отношении отдельных в ирусов не обладают). Однако они имеют выраженную видовую специфичность в отношении клеток микроорганизмов. Интерфероны иногда называют против овирусными антибиотиками широкого спектра действия. Резистентность к интерферонам у вирусов не возникает. Через несколько недель после выздо ровления интерфероны в крови не обнаруживаются. Для организма практиче ски безвредны. Сенсибилизации, по имеющимся данным, как правило, не вызыв ают. Интерфероны проникают в клетку и прочно с ней связываются. Механизм их противовирусного действия , по-видимому, обусловлен тем, что они вызыв ают образование рибосомами клеток макроорганизма ряда ферментов, кото рые ингибируют и РНК и ее трансляцию в вирусный белок. Это приводит к угне тению репродукции вируса. Через гематоэнцефалический барьер интерферо ны практически не проходят. В клинической практике используют человече ские лейкоцитарный ( б-) и фиброблас тный ( в-) интерфероны. Интерферон по лучен также методом генной инженерии. Место интерферона в лечении вирус ных инфекций точно не определено. Отмечена более или менее выраженная эф фективность интерферонов при профилактике гриппа, при герпетических к ератитах, герпетических поражениях кожи и половых органов и т.д. 2. И СТОРИЯ СОЗДАНИЯ ПРОТИВОВИРУСНЫХ ПРЕПАРАТОВ Первым препаратом, предложенным в качестве специфиче ского противовирусного средства, был тиосемикарбазон, вирулоцидное де йствие которого описал Г.Домагк (1946) [1]. Препарат этой группы тиоцетозон обл адает некоторой противовирусной активностью, но недостаточно эффектив ен; его используют в качестве противотуберкулезного средства. Производ ные этой группы 1, 4-бензохинон-гуанил-гидразинотио-семикарбазон под назв анием «фарингосепт» ( faringosept , Ру мыния) применяют в виде «перлингвальных» (рассасываемых в полости рта) т аблеток для лечения инфекционных заболеваний верхних дыхательных путе й (тонзиллит, стоматит и др.) В дальнейшем был синтезирован метисазон, эффективно подавляющий репро дукцию вирусов оспы, а в 1959 г. [1] - нуклеозид идоксуридин, оказавшийся эффект ивным антивирусным средством, подавляющий вирус простого герпеса и вак цинии (вакцинальная болезнь). Побочные эффекты при системном применении ограничили возможность широкого использования идоксуридина, но он сох ранился как эффективное средство для местного применения в офтальмоло гической практике при герпетических керотитах. Вслед за идоксуридином стали получать другие нуклеозиды, среди которых выявлены высокоэффект ивные противовирусные препараты, в том числе ацикловир, рибамидин (рибов ирин) и другие. В 1964г. [1] был синтезирован амантадин (мидантин), затем реманта дин и другие производные адамантана оказавшиеся эффективными противов ирусными средствами. Выдающимся открытием явилось открытие эндогенног о интерферона и установление его противовирусной активности. Современ ная технология рекомбинации ДНК (генетической инженерии) открыла возмо жность широкого использования интерферонов для лечения и профилактики вирусных и других заболеваний. Выдающимся событием явилось открытие эндогенного интерферона и устано вление его противовирусной активности. До 1957 года интерфероны рассматри вали как любопытный биологический феномен. Период 1957 – 1967 гг был посвящен исследованию общих закономерностей продукции и действия интерферона. В процессе этой работы установлена универсальность феномена образован ия этого белка клетками всех позвоночных (от рыб до человека) и разработа ны основные методы его получения и очистки. В 1967 году была доказана ведущая роль высокомолекулярных двунитевых РНК в индукции интерферона и начат поиск наиболее активных препаратов , имеющ их перспективу клинического использования [14]. В течении следующих тринадцати лет (1967 – 1980 годы) был изучен антитулюроген ный эффект интерферона и его индукторов, экспериментально обоснованны принципы супериндукции интерферона. В этот же период было теоретически обоснованно существование сложного многокомпонентного механизма про дукции и действие интерферона , что в дальнейшем завершилось выявлением генов и информационных РНК для интерферона и ферментов, осуществляющих его действие. 80 – е годы ознаменовались такими крупными событиями в изуч ении интерферона и его индукторов: 1) окончательно оформилось учение о системе интерферона; 2) с помощью методов генной инженерии получены перспективные для клиниче ского использования препараты интерферона; 3) доказана множественность генов интерферона (у человека их число прибл ижается к 30); 4) определены показания и противопоказания для клинического использова ния интерферонов и их индукторов. В 80 – 90 годы установлено, что действие ряда иммуностимулирующих и против овирусных средств (продигнозан, полудан, арбидол и др.) связано с их интерф ерогенной активностью, т. е. способностью стимулировать образование энд огенного интерферона [14]. Отечественными исследователями разработан ряд синтетических и природ ных (растительного происхождения) препаратов для системного и местного применения при вирусных заболеваниях (бонафтон, арбидол, оксолин, дейтиф ормин, теброфен, алпизарин и др.). В настоящее время установлено, что дейст вие ряда иммуностимулирующих и противовирусных средств связано с их ин терферонной активностью, т.е. способностью стимулировать образ ование эндогенного интерферона. Хронологическая таблица противовирусных событий Год Событие 1946 Предложен в качестве прот ивовирусного средства тиосемикарбазон. Действие описал Г. Домагк 50-е г. Откры т метисазон 1957 Открыт интерферон Айзекс ом и Линденманом 1957– 1967 Исследованы общие зак ономерности продукции и действия интерферона. Установлена универсальн ость феномена образования этого белка клетками всех позвоночных (от рыб до человека) и разработаны основные методы его получения и очистки 1959 Открыт и доксуридин, действующий против вируса простого герпеса 1964 Синтезирован а дамантан, затем ремантадин и другие производные адамантана 1970 Открыт т илорон, индуктор интерферона 1967– 1980 годы Был изучен антиту люрогенный эффект интерферона и его индукторов, экспериментально обос нованны принципы супериндукции интерферона 80– 90 годы Установ лено, что действие ряда иммуностимулирующих и противовирусных средств ( продигнозан, полудан, арбидол и др.) связано с их интерферогенной активно стью, т. е. способностью стимулировать образование эндогенного интерфер она [14] 3. КЛАССИФИКАЦИЯ противовирусных средств Противовирусные средства, как противогрибковые, прот ивопаразитные средства, относят к антиинфекционным средствам.[2] Вирусы – внутриклеточные паразиты. Оказать на них влияние с помощью лек арства, не повредит при этом клетки макроорганизма, практически невозмо жно. В большинстве случаев применение противовирусных препаратов мало эффективно, а опасность возникновения нежелательных эффектов очень ве лика. Противовирусные средства – препараты с малой широтой терапевтич еского действия. Максимальной эффективности можно достигнуть при их ис пользовании с профилактической целью или местно, когда удается создать высокую концентрацию. Направленность действия противовирусных средств может быть различной . Она касается разных стадий взаимодействия вируса с клеткой. Так, извест ны вещества, которые действуют следующим образом: 1. угнетают адсорбци ю вируса на клетке и проникновение его в клетку, а также процесс высвобож дения вирусного генома. К ним можно отнести такие препараты как мидантан и ремантадин; 2. угнетают синтез ра нних белков вируса. Например, гуанидин; 3. угнетают синтез ну клеиновых кислот (зидовудин, ацикловир, видарабин, идоксуридин); 4. угнетают «сборку» вирионов (метисазон); 5. повышают резистен тность клетки к вирусу (интерфероны) [2] Это был а представлена классификация противовирусных средств по механизму дей ствия . По строению противовирусные средства можно разделить на : 1. Производные адамантана (мидантан, ремантадин) 2. Аналоги нуклеозидов(зидовудин, ацикловир, видарабин, идоксуридин) 3. Производные тиосемикарбазона – метисазон 4. Биологические вещества подуцируемые клетками макроорганизма (интер фироны)[2] Но более доступно для понимания противовирусные препараты можно разде лить, взависимости от рода заболевания, на группы: 1. Противогриппозные препараты (ремантадин, оксолин и т.д.) 2. Противогерпетические и противоцитомегаловирусные (теброфен, риодок сон и т.д.) 3. Лекарство влияющие на вирус иммунодефицита человека (азидотимидин, ф осфаноформат) 4. Препараты широкого спектра действия (интерфероны и интерфероногены) [2] Машковский М.Д.[5] создал такую классификацию противовирусных препаратов : А) Интерфе рон 1. интерферон. Лейкоцитарный интерферон из донорской крови человека. 2. интерлок. Очищенны й б- интерферон, полученный из донор ской крови. 3. реаферон. Рекомбин антный б 2 -интерф ерон, продуцируемый бактериальным штаммом псевдомонады, в генетически й аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного б 2 -интерферона. 4. интрон А. Рекомбин антный интерферон альфа-2в. 5. бетаферон. Рекомби нантный человеческий в 1 -интерферон. Индукторы интерферона 1. полудан. Порошок или пористая масса бе лого цвета, обладает иммуностимулирующей активностью, т.е. способностью стимулировать выработку эндогенного интерферона и оказывает противов ирусное действие. 2. неовир. Дей ствие такое как и у полудана. Б) Произво дные амантадина и других групп синтетических соединений 1. Ремантадин. Применяется как антипарки нсоническое средство, указывает профилактическое действие в отношении грипозной инфекции, вызванной определёнными штаммами вирусов. 2. Адапромин. Близок к ремантадину. 3. Дейтифорин. Сходен с ремантадином. 4. Арбидол. Противови русный препарат, оказывающий ингибирующее действие на вирусы гриппа А и В. 5. Бонафтон. Обладает противовирусной активностью в отношении вируса простого герпеса и нек оторых аденовирусов. 6. Оксолин. Обладает вируцидной активностью, эффективен при вирусных заболеваниях глаз, кож и, вирусных ринитах; оказывает профилактическое действие при гриппе. 7. Теброфен. Применяю т в виде мази при вирусных заболеваниях глаз, а также при заболеваниях ко жи вирусной или предпологаемой вирусной этиологии.Может приминятся та кже для лечения плоских бородавок у детей. 8. Риодоксол. Обладае т противовирусной оптимальностью и оказывает противогрибковое действ ие. 9 .Флореналь. Открывает ней трализующее действие в отнашении вирусов. 10 Метисазон. Пода вляет репродукцию вируса основной группы: обладает профилактической а ктивностью в отнашении вируса оспы и облегчает течение поствакцинальн ых осложнений, задерживает распространение кожного процесса, способст вует более быстрому подсыханию эффеораций. Имеются данные об эффективн ости метисазона при лечении рецидивирующего генитального герпеса. В ) Нуклеоз иды 1. Идоксуридин. Примен яют при кератитах в офтальмологии. 2. Ацикловир. Эффекти вен в отношении вирусов простого герпеса и опоясывающего герпеса. Оказы вает иммуностимулирующее действие. 3. Ганцикловир. По ср авнению с ацикловиром ганцикловир более эффективен и, кроме того, действ ует не только на вирус герпеса, но и на цитомегаловирус. 4. Фамцикловир. Имеет такие же функции, как и ганцикловир. 5. Рибамидил. Рибамид ил, подобно ацикловиру, обладает противовирусной активностью. Ингибиру ет синтез вирусных ДНК и РНК. 6. Зидовудин. Противо вирусный препарат, ингибирующий репликацию ретровирусов, включая виру с иммунодефицита человека (ВИЧ). Г) Противо вирусные препараты растительного происхождения 1. 1.Флакозид. Получают из листьев бархата амурского семейства рут овых. Препарат эффективен в отношении ДНК-вирусов. 2. Алпидарин. Получена из травы Koneermena альпийского и копеечника жел теющего, семейства бобовых. Эффективен в отношении ДНК-содержащих вирус ов группы герпеса. Ингибирующее действие на репродукцию вируса простог о герпеса проявляется преимущественно на ранних стадиях развития виру са. 3. Холепин. Очищенный экстракт из ча сти растения мепедеци копеечковой, семейства бобовых. Обладает противо вирусной активностью в отношении ДНК-содержащих вирусов группы герпес а. 4. Лигосин. Применяют при герпетичес ких заболеваниях кожи. 5. Госсипол. Продукт получаемый при переработке семян хлопка или из корней хлопчатника, семейства мальвовы х. Препарат обладает активностью в отношении различных штаммов вирусов, в том числе дерматотропных штаммов вируса герпеса. Оказывает сл абое действие на грамположительные бактерии. 4. М ЕХАНИЗМ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ 4. 1. Противогриппозные препар аты [6] Все препараты это группы защищают клетки человека от п роникновения в них вируса гриппа, т.к. блокируют места связывания вируса с поверхностью клеточной мембраны. На вирусы, проникшие внутрь клетки, о ни не влияют, поэтому их применяют для индивидуальной или массовой профи лактики гриппа у лиц, находящихся в контакте с больными или в период эпид емии. Все препараты (кроме оксолина) назначают внутрь. Из желудочно-кишеч ного тракта они неплохо всасываются. В очень небольшом проценте они связ ываются с белками плазмы крови, хорошо проникают во все ткани и жидкости, в том числе и в ликвор. Элиминация осуществляется частично печенью, а в ос новном почками (90%). Поэтому у больных с нарушением функции почек повторны е приемы препаратов могут привести к кумуляции и сопровождаться нежела тельными эффектами. 4.2. Противо герпетические и пртивоцитомегаловирусные препараты [6] Противогерпетические (теброфен, риодоксол, идонеурид ин, видарабин, оцикловир, валацикловир). Противоцитомегаловирусные (ганц икловир, фосфоноформат). Все эти препараты блокируют репликацию, т.е. нарушают синтез нуклеиновых кислот вируса. Видарабин применяют местно, а при дисиминированной герпе тической инфекции (энцефалит) вводят внутривенно капельно. Но препарат п лохо растворяется, поэтому его инфузия в большом количестве жидкости дл ится около 12 часов, что нежелательно для больного с энцефалитом, отеком мо зга. Применение видарабина через гематоэнцефалический барьер составля ет примерно 30% от концентрации препарата в плазме крови. В печени происходит превращение препарата в арабинозин гипоксантин, эт от метаболит сохраняет активность и быстро распределяется в тканях. Эли минация происходит с мочой (50%) и калом. Ацикловир, валацикловир, ганциклов ир – назначают внутрь во время еды, а также вводят внутримышечно и внутр ивенно. Биоусвоение из желудочно-кишечного тракта равно 15 – 20%, тем не менее этого достаточно для оказания эффекта. У препаратов высокая активность, и они обладают способностью избирательно накопляться в клетках, инфицирован ных вирусом, но не в интактных клетках. Связывание с белками плазмы крови всего 9 – 30%, поэтому препараты хорошо проникают в различные ткани и жидко сти. В организме человека валацикловир быстро и почти полностью превращ ается в ацикловир и валин под действием фермента валацикловиргидролаз ы. 10 – 15% ацикловира и ганцикловира подвергается биотрансформации в пече ни. Большая часть препаратов (80 – 90%) в неизменном виде и в виде метаболита 9- карбоксиметоксиметилгуанина выводится почками. 4.3. Лекарства, влияющие на вирус иммунодефицита человек а (ВИЧ) [6] (зидовузин, фосфоноформат) После проникновения лимфотропного ВИЧ в лимфоцит про исходит синтез вирусной ДНК на матрице (вирусной РНК) под влиянием обрат ной транскриптазы (ревертазы), что и приводит к повреждению лимфоцитов. М еханизм действия аредотимидина и фосфоноформита заключается в блокаде названного фермента. В основном препараты эффективны у носителей вирус а до появления признаков заболевания. Кроме названных препаратов сейча с появились новые противоретровирусные средства: дидеоксимицетин и ди деоксицидин. Азидовудин назначают внутрь или вводят внутривенно. Биоус вояемость из желудочно-кишечного тракта 60%. Связь с белками плазмы крови 3 5%. Азидотимидин легко проникает в различные ткани и жидкости, включая лик вор. Он подвергается биотрансформации в печени, его главный метаболит 5 | -о-глюкуронид. Экскреция – с помощь ю почек в неизменном виде (90%) и в виде метаболитов. 4.4. Противо вирусные препараты широкого спектра действия (интерфероны) [6] Под влиянием индукторов интерферона (многочисленных синтетических и природных агентов) осуществляется индукция, итогом кот орой является депрессия генов интерферона, которые локализуются во 2-й, 9-й и ,возможно, в 5-й и 13-й хромосомах человека. В ответ на индукцию происходит ф ормирование, синтез интерферона в клетках человеческого организма. Основным показателем активности индукторов интерферона является прод укция так называемого «сыворо-точного» интерферона в крови. При энтеральном способе введения индукторов в организм, интерфероновы й ответ обеспечивается лимфоцитами (эритроцитами) системы GALT лимфоцитной ткани желудочно-кишеч ного тракта, сконцентрированной в виде вальдеерова кольца, пееровых бля шек, подслизистых монону-клеаров и мемфоцитов тонкой кишки и аппендикса , куда они могут быть доставлены популяцией специализированных мембран ных клеток, способных транспортировать макромолекулы из стенки тонкой кишки через эпителиальный барьер. Большая часть продуцируемого при это м интерферона может быть утилизирована окружающими клетками кишечника локально и не достигает циркулирующей крови (паракринный тип). Другая ча сть продуцированного интерферона попадает в кровь или непосредственно из тканевой жидкости (эндокринный тип), или через мигрирующие лимфомоно циты и макрофаги. Продукция интерферона в кишечнике опережает и превосх одит уровень его образования в других органах [12]. При пероральном введении высокомолекулярных индукторов интерферона, з аключенных в липосомы (полигуацил, ларифан), преимущественным местом обр азования интерферона становится печень, а именно – гепатоциты и купфер овы клетки. Хотя и в этом случае первой линией взаимодействия индуктора с организмом является кишечник, в нем синтезируется значительное колич ество интерферона, но в составе липосом более 80% индуктора транспорти-руе тся в печень, поэтому уровень продукции интерферона в этом органе в 2-4 раз а выше, чем в кишечнике [12]. Таким образом, при поступлении индукторов интерферона в организм наряду с пр одукцией сывороточного интерферона в организме происходит автономная ,локальная продукция интерферона органами .При этом ведущая роль в прод укции интерферона тем или иным органом определяется в равной степени ка к путями индукции интерферона , так и составом индуктора , а , следовательн о, и чувствительностью интерферонокомпетентных клеток к использо-ванн ому индуктору. После образования интерферона в органах, он поступает в кровь и присоединяется к так называемому «сывороточному» интерферон у (синтезировался в крови, сыворотке под влиянием индукторов). Дальнейше е противовирусное действие интерферона может быть представлено в виде схемы [13]. 4.5. Амиксин – возможности и перспективы применения в клинической практике Изыскание и изучение новых фармакологических средст в является одной из важнейших проблем современной медицины. Успех в прои зводстве нового лекарственного препарата – это результат глобальной долгосрочной стратегии. При этом шансы на успешное завершение работ по с озданию нового лекарства весьма незначительны, примерно 1 к 5000 – 10000, а проц есс разработки и продвижения на рынок нового препарата занимает 12-15 лет. Разработка новых лекарственных средств борьбы с заболеваниями 21 века яв ляется приоритетным направлением деятельности компании «ЛЭНС-Фарм». О собый интерес вызывают препараты, повышающие сопротивляемость организ ма к инфекционным факторам. Одним из таких препаратов является Амиксин. СХЕМА ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ СИСТЕМЫ ИНТЕР ФЕРОН Путь Амиксина в клиническую практику включал в себя ряд последовательных этапов прохо ждения разрешительных инстанций. Все параметры эффективности и безопа сности подтверждены документально, начиная с исходного состояния до из мерений, проводимых в процессе экспериментального лечения (форма дозир овки, способ применения, режим приема, план подбора дозы, срок лечения). К н астоящему времени сформировалось представление о потенциально эффект ивных курсах лечения Амиксином и потребности в нем в первую очередь при заболеваниях, для лечения и профилактики которых не существует удовлет ворительных методов. При этом уточнялись влияние выбранных заболевани й на пациентов и общество в целом, недостатки, которые присущи существую щим способам лечения, характеристики, которыми обладает Амиксин для улу чшения любого из имеющихся способов лечения. Экономическая оценка осно вывалась на данных сравнения с альтернативными действиями. Особое вним ание уделялось ответам на вопросы, во что обходится пациенту и (или) общес тву получение желаемого результата. Доказательства эффективности и эк ономической целесообразности лечебно-профилактических возможностей Амиксина явились основанием для включения препарата в стандарты лечен ия и профилактики, а также компенсации стоимости лечения Амиксином при таких заболеваниях, как вирусные гепатиты, грипп и другие острые респира торные инфекции, геморрагические лихорадки. Весьма важным явилось создание по результатам исслед ований информационно-аналитического сборника. При обобщении опыта при менения Амиксина определяющая роль отводилась формализованным метода м, что позволило выработать наиболее согласованные рекомендации для ре альной практики. Ценность представляемой в настоящем сборнике информа ции определяется с одной стороны - научной обоснованностью, признаваемо й ведущими учеными и специалистами, с другой - связью с решением вопросов целенаправленного и рационального использования Амиксина в реальной практике. 4.5.1. Название и о писание препарата Амиксин · Регистрац ионный номер 96/252/1; 96/252/3. · Междунаро дное непатентованное название – Тилорон (2,7,-bis 2-(diethylamino) ethoxy -9h-fluoren-9-one-dihydrochloride). · Низкомоле кулярное синтетическое соединение ароматического ряда, относящееся к классу флуоренонов. · Таблетки, покрытые оболочкой по 6 и 10 штук в упаковке в дозе 0.125 г (взрослая форма) и 0.06 г (д етская форма) 4.5.2. Противовирусная активность и индукция клеток – пр одуцентов интерферона. Амиксин обладае т противовирусным действием в отношении широкого круга вирусов. Амиксин индуцирует образование интерферона как первого (альфа, бета), та к и второго (гамма) типов. Амиксин «включает» синтез интерферона в отличие от поликлональной инд укции в определенных популяциях клеток. Индукция интерферона осуществляется без вспомогательных клеток, что д оказано в экспериментах с чистой культурой, в частности - Т клеток. По интенсивности и продолжительности действия Амиксин проявляет лучши е качества индукторов: «выработка» позднего интерферона, время максима льного ответа 10 - 18 часов. 4.5.3. Действие на иммунную систему и воспалительный проц есс. · Экспресси я на мембранах клеток молекул HLA 1 класса, антигенов HLA - DR 2 класса. · Рост и акт ивация NK -клеток. · Восстанов ление функциональной полноценности антител. · Целенаправленная поляризация Th 0 Th 1. · Моделиров ание воспалительной реакции в зависимости от фазы воспаления. 4.5.4. Фармакокинетика · Всасывание. После приема в нутрь Амиксин быстро абсорбируется из желудочно-кишечного тракта. · Распределение. Биодоступность составляет 60%, около 80% препарата с вязывается с белками плазмы. · Выведение. 99% препарата выводится в неизмененном виде, период по лувыведения составляет 48 часов. 4.5.5. Доклинические исследования противовирусная актив ность препарата Противовирусная активность Амиксина оценивалась на лабораторных животных, инфицированных возбудителем геморрагической л ихорадки с почечным синдромом (ГЛПС) - вирусом Хантаан. Использовались пр офилактическая, лечебно-профилактическая и лечебная схемы введения пр епарата белым мышам. Установлена наибольшая противовирусная активност ь Амиксина при использовании лечебно-профилактической схемы пероральн ого введения в дозе 10 мг/кг. Противовирусная активность Амиксина и его влияние на интерфероновый статус при гепатите исследовались на самцах белых нели нейных мышей массой 16-18 г. Вирус (штамм Мещерина) пассировали путем внутриб рюшинного заражения белых мышей. Для воспроизведения энтерального геп атита мышам перорально вводили по 0,2-0,3 мл 30-40% суспензии печени зараженных ж ивотных на физиологическом растворе. За 1-7 дней до заражения животным опы тной группы перорально вводили Амиксин в дозе 4 мг. За животными наблюдал и 14 дней. Однократное введение амиксина 4 мг обеспечивало 40-50% защиту животн ых от энтерального заражения мышей в течение 72 часов после введения преп арата. Изучено профилактическое и лечебное действие Амиксин а в концентрации 0,25 г на кг веса против вируса лихорадки Западного Нила в о пытах на белых мышах. Профилактическое введение Амиксина приводило к сн ижению летальности в опытной группе в среднем на 23,4%. 5. П ОЛУЧЕНИЕ противовирусных ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ 5.1. Новые пути синтеза хлоргидрата тилорона [8, 9] (2,7-бис-[2-(диэтиламино)этокси]-флуорен-9-он Синтезирован дв умя способами тилорон-2,7-бис[(диэтиламино)этокси] флуоренон-9( I ) Нитрованием флуоренона-9( II ) HNO 3 получен 2,7-( O 2 N ) 2 - II (Т. пл. 289 – 91 є), восстановленный ZnCl 2 в HCl и AcOH до 2,7-( H 2 N ) 2 - II (Т. пл. 287 – 9 є), диазотирован ием которого NaNO 2 в 50%-ной HBF 4 получено соответственно бис-диазосоединение ( III ) переведенное действием 50%-ной H 2 SO 4 в 2,7-( HO ) 2 - III ( IV , т. пл. 320 – 2 є). Ацетилиро ванием флуорена ( V ) AcCl и AlCl 3 синтезирован 2,7- Ac 2 - V (т. пл. 180 – 2 є), превращенный действием 3- ClC 6 H 4 COOOH в присутствии F 3 CCOOH в 2,7-( AcO ) 2 - V ( VI ), который окислен Na 2 Cr 2 O 7 в AcOH до 2,7-( AcO ) 2 - II ( VII ). Взаимодействие м IV или VII с KOH и Et 2 NCH 2 CH 2 Cl * HCl получен I . 0,099 моля 85%-ной 3- ClC 6 H 4 COOOH прибавляют к охлажденной смеси 0,037 моля 2,7-Ас 2 - V , 400мл ХЛФ и 0,3мл F 3 CCOOH , защищают от света, нагревают до 20 є С, выдерживают три дня, хлороформный раствор промывают насыщенным раствором Na 2 CO 3 и насыщенным раствором NaCl , орган ический слой сушат безводным MgSO 4 , фильтрат упаривают, получают IV , выход 62%, т. пл. 165 – 7 є С (МеОН – хлф1). 0,034 моля VI , 0,01 моля Na 2 Cr 2 O 7 *2 H 2 O , 30мл АсОН кипятят 45 минут, раствор охл аждают, прибавляют 50мл воды, выделяют VII , выход 53%, т.пл. 224,5-6,5 є ( СП). 0,04 моля Et 2 NCH 2 CH 2 Cl * HCl , 0,08 моля KOH , 0,01 моля IV или VII 0,5г PhCH 2 NMe 3 Br , 200мл толуола и 50мл воды кипятят 24 часа, после охлаждения отделяют органиче ский слой, промывают водой, насыщенным раствором NaCl и высу шивают безводным MgSO 4 , толуол упаривают в вакууме, масло растворяют в 5мл МеОН приб авляют к 50 мл эфирн. ненасыщенного HCl . Выделяют ди- ХГ ( I ) 50%, т.пл. 232 – 4 є ( изо- PrOH - MeOH , 3:1). 5.2. Получение бонафтон а (6-бром-1,2-нафтохинон) Получение 6-бром нафтохинона-1,2 с нитрозодисульфонатом калия [10] Реакцией в- нафтол с Br 2 , в лед АсОН получ ен с выходом 76% 6-бромнафтол-2( I ), т.кип. 200 - 5 є /20 т.пл. 128 є С. Взаимодействием I c ON ( SO 3 K ) 2 в ди стиллированной воде при добавлении 1/6 н KH 2 PO 4 приводит к 6-бромнафтохинону-1,2, т.пл. 170 є( разл). Бонафтон – 14 С [11] Разработан метод синтеза [8 – 14 С]-6-бром-1,2-нафтохинона ( I , бонафтона), обладающего противовирусной активностью, взаимод ействием 4- MeOC 6 H 4 CH 2 CH 2 CH 2 Br с Mg и 14 CO 2 получают 4- MeOC 6 H 4 CH 2 CH 2 CH 2 - 14 COOH ( II ). Циклизация ( II ) ПФК дает [1- 14 С]-7-метокси-1-тетралон ( III ), восстановление которого на Pd /С приводит к [1- 14 С]-7-меток ситетралину ( IV ). Дегидрирова ние IV при помощи тетрахлор-1,2- бензохинона приводит к [1- 14 С]-7-метокс инафталину( V -неролину- 14 С) из V и HBr получают [8- 14 С]-2-нафтол( VI ), бромирование которого дает [1- 14 C ]-3,8-дибром-7-окс инафталин ( VII ). Из VII получают [8- 14 C ]-6-бром-2-нафтол ( VIII ). Реакция VIII с ON ( SO 3 K ) 2 приводит к ( I ). 5. 3 . ГОССИПОЛ 2,2-бис-(1,6,7-триокси-3-метил-5-изопропил-8-альдегидонафтил) C 30 H 30 O 8 Мол. масса 518.57 Т.пл. 180-181 Госсипол представляет собой кристаллический канареечно-желтый порошо к без запаха. Растворим - в спирте, эфире, ацетоне, хлороформе, пиридине. Не растворим - воде. Качественные реакции . Кристалл ик госсипола с каплей конц. серной кислоты на часовом стекле дает пурпур но-красное окрашивание. Диоксим C 30 H 32 O 8 N 2 . В колбе с обратным холо дильником нагревают на водяной бане 0.5 г госсипола, 1 г гидроксиламина гид рохлорида, 5 мл пиридина и 5 мл абсолютного спирта. Растворитель концентри руют под тягой, к остатку прибавляют спирт. Выпадают кристаллы; их отделя ют и перекристаллизовывают из спирта. Т.пл. 312 . Госсипол является одним из главных пигментов хлопчатника, известен в тр ех таутомерных формах. Обладает свойствами антиоксиданта, щелочные рас творы поглощают свободный кислород воздуха. Ядовит. В ядрах семян и других частях хлопчатника содержание госсипола в средне м составляет 1%. В процессе производства хлопкового масла он превращаетс я в глубокоокрашенные не токсичные соединения, затрудняющие рафинацию масла. В настоящее время наряду с фармацевтической отраслью применяется для п олучения полимерных материалов, преимущественно лаков. Л АБОРАТОРНЫЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Сырье и реа ктивы . Исход ное сырье Количеств о Примечание Кора корней хл опчатника 250 г В коре корней хлопчатника содержится больше госсипола, чем в других частях растения. Отсутствие в ней жирных веществ облегчает выделение и очистку. Эфир 1000 мл Для удаления перекисей эфир встряхивают с 5% раствор ом сернокислого железа(II), подкисленного серной кислотой. Уксусная кисл ота 25 мл Петролейный э фир 25 мл Гидросульфит натрия 1 г Э тиловый спирт 50 мл Пиридин 5 мл Гидроксиламин гидрохлорид 1 г 1 Стадия. Выделение госсипола в виде госсиполацетата. Госсиполацетат - молекулярной комплекс состава C 30 H 30 O 8 * CH 3 COOH, легко гидролизуемое горячей водой. Грубоизмельченную воздушно-сухую кору корней хлопчатника перколируют при пониженной температуре 1 л эфира, свободного от перекисей. Эфирный эк стракт концентрируют при небольшом разрежении до объема 40-50 мл, добавляют 15 мл ледяной уксусной кислоты, хорошо перемешивают и, не закрывая колбы, о ставляют в холодильнике для кристаллизации. При медленном испарении эф ира выпадает госсиполацетат. Первую порцию зеленовато-желтых кристалл ов отфильтровывают на стеклянном фильтре и промывают 10 мл смеси эфира и у ксусной кислоты в соотношении 3:1. Фильтрат и промывную смесь объединяют и оставляют в стакане при комнатн ой температуре, пока не испарится половина объема. В это время выпадает в торая половина госсиполацетата. Соединив вместе полученные осадки, их р астворяют в 50 мл эфира, добавляют 5 мл уксусной кислоты и оставляют на сутк и. Выпадает чистый госсиполацетат в количестве 3 гр. 2 Стадия. Получение свободного госсипола. На холоду растворяют 3 г госсиполацетата в 50 мл эфира, св ободного от перекисей, и переносят в коническую колбу, содержащую равный объем 0.4%-ного водного раствора дитионита натрия (неверно называемый гидр осульфитом натрия). Эфир отгоняют при температуре бани около 60 под уме ренным вакуумом. По мере испарения эфира на поверхности воды выделяется свободных госсипол в виде корочки. Для полноты гидролиза госсиполацета та эту операцию повторяют еще раз, т.е. отфильтрованный осадок снова раст воряют в эфире, добавляют равный объем воды, эфир отгоняют. Полученный та ким образом госсипол высушивают на воздухе. Получают 2 гр. Для очистки всю порцию госсипола растворяют в 25 мл эфира и добавляют петр олейный эфир до помутнения раствора. Раствор оставляют на кристаллизац ию. Кристаллический госсипол - канареечно-желтый порошок, хранят в проби рке из темного стекла. Получают чистого госсипола 1-1.2 г, имеющего т. пл. 180-181 . 5. 4 . ПОЛУЧЕНИЕ ЛЕЙКОЦ ИТАРНОГО АЛЬФА-ИНТЕРФЕРОНА Способность лейкоцитов человека продуцировать интер ферон была показана вскоре после открытия системы интерферона Айзексо м /Франция/. Методика заключается в следующем. Из периферической крови доноров выделяют лейкоцитарную массу и подвер гают культивированию в суспензии. Используют среду №1, в которую добавля ют 0,0015 ед/мл инсулина и 100-200 ед/мл нативного интерферона. К лейкоцитам в конце нтрации (5-10)*10 6 клеток/мл в качестве инд уктора добавляют вирус болезни Ньюкасла с инфекционным титром не ниже 10 8 /мл ТЦД 50 в культуре куриных фиброластов. Продуцированный интерферон о тделяют от культуральной среды путем центрифугирования. ПОЛУЧЕНИЕ БЕТА -ИНТЕРФЕРОНА Еще в 60-е годы было показано, что интерферон, провоцируе мый клетками амниона человека, а также кожно-мышечными фибробластами, по своим свойствам отличается от лекоцитарного интерферона. В настоящее в ремя для получения бета-интерферона используют диплоидные клетки чело века. Супериндукцию осуществляют различными воздействиями - дихлоро-1-бе та- D -рибафуранозилбенэимид азолом, хлороквином, нейтральным красным, УФ~радиацией и др. ПОЛУЧЕНИЕ ГАММА-ИНТЕРФЕРОНА Гамма-интерферон является продуктом Т-лимфоцитов чело века. За последнее десятилетие благодаря усиленному изучению иммунног о ответа и свойств иммуннокомпетентных клеток значительно расширились представления о функциях Т-лифоцитов, а также о продуктах, выделяемых Т-л имфоцитами - лимфокинах, обладающих свойствами биорегуляторов. Гамма-интерферон, или иммунный интерферон, также является одним из актив ных регуляторов иммунного ответа, так как обладает супрессорной активн остью в отношении продукции антител, вызывает активацию естественных к иллеров. Гамма -интерферон продуцируют активированные Т-лимфоциты. Для получения больших количеств гамма-интерферона из периферической к рови выделяют Т-лимфоциты и обрабатывают митогеном или антилимфоцитар ной сывороткой. Например, к культуре с концентрацией лимфоцитов ( I -2)*10 5 в 1 мл прибавляют стафилококковый энтеротоксин в концентрации 0,02 мкг/мл. Культуры инкубируют в среде с человеческим альбумином. Интерферон выде ляют из культуральной среды. Возможно повторное стимулирование культу ры и повторное продуцирование интерферона. ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ ЛЕЙКОЦИТАРНЫЙ ИНТЕРФЕРОН Характеристика готового продукта, Человеческий лейкоцитарный интерферон является видоспецифическим гл икопротеидом, синтезируемым донорскими лейкоцитами в ответ на воздейс твие интерфероногена. Специфичность препарата определяется следующими признаками: А) противовирусной активностью . В р азведении, соответствующем титру активности, препарат должен защищать культуру человеческих клеток от цитопатического действия индикаторно го вируса, взятого в дозе 100 ТЦД 50 Б) устойчивостью активности к действию нуклеаз-РНК-азы и ДНК-азы; В) чувствительностью активности к действию трипсина - при концентрации фермента 300 мкг/мл в течение I часа при 37°С препарат полностью инактивируется; Г) чувствительностью активности к действию специфической антисыворот ки - антиинтерфероновая сыворотка в разведении, соответствующем титру д олжна снижать защитное действие интерферона, взятого я количестве 10 ед, в реакции нейтрализации. Основные требования к препарату. Препарат должен быть вирусологически стерильным, нет оксичным и безвредным. В разведении, соответствующем титру активности, препарат должен защища ть культуру человеческих клеток от цитопатического действия индикатор ного вируса. Сухой препарат - пористый порошок серовато-коричневого цвета, легко раст воримый в 2 мл дистиллированной воды. Остаточная влажность не должна пре вышать 2%, Раствор препарата должен иметь различные оттенки красного цвета и желт оватый оттенок. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАР АТА Кровь заготавливают на станциях переливания крови в с оответствии с действующими инструкциями, в стерильные многокамерные м ешки или флаконы, заполненные консервирующим раствором. Пластикатные мешки центрифугируют 4 мин при 4°С и из них выжимают последо вательно - плазму, а затем 40 мл верхнего слоя с поверхности клеточной фрак ции (эритромасса) или 40 мл верхнего слоя клеточной фракции (лейкомасса), ко торые используют в дальнейшем в качестве источника лейкоцитов для биос интеза препарата. Образец крови, плазмы, эритромассы или лейкомассы от каждого донора, дол жен контролироваться на отсутствие инфицирования сифилисом, гепатитом , СПИДом в соответствии с действующими инструкциями. При отрицательных р езультатах контроля эритромасса и лейкомасса могут использоваться для производства интерферона не позднее, чем спустя сутки после забора кров и от донора. Хранение их допускаетс я при температуре не выше 4°С. Плазма или сыворотка донорской крови входят в состав культуральной сме си на всех стациях биосинтеза интерферона. Культивирование и контроль проиизводственных штам мов вирусов, получение культур куриных и человеческих фибробластов. В производстве интерферона в качестве интерфероноге на используется вакцинный штамм "Н" вируса болезни Ньюкасла. Это предста витель группы парамиксовирусов, для которых характерна сферическая фо рма вирусов, и спиральная структура нуклеокапсида. Вирус легко репродуц ируется в куриных эмбрионах и культуре куриных фибробластов, оказывая ц итоплазтическое действие. Вирус неопасен для человека, однако может выз вать воспалительные явления при случайном попадании массивной дозы в глаз. Индикаторным вирусом служит штамм "Индиана" вируса везикулярного стома тита. Это представитель группы рабдовирусов, также имеющих спиральную струк туру нуклеокапсул, но инфекционный вирион по форме напоминает пулю. Виру с хорошо репродуцируется в куриных эмбрионах, а также в культурах курины х и человеческих фибробластов, оказывая цитопатическое действие. Необходимо соблюдать осторожность при работе с этим вирусом. Методы культивирования вирусов Вирус болезни Ньюкасла культивируют в 9-10-дневных куриных эмбрионах. Эмбр ионы просматривают через овоскоп, павшие отбраковываются, а у жизнеспос обных карандашом обводятся границы воздушной полости. При исходном титре вируса 10 8 -10 9 ТЦД 50 /мл заражающая доза составляет 0,2 мл разведения 10 -4 . Эта доза вводится в эмбрион шприцем через воздушную полость с соблюдением условий стерильности. Место прокола в с корлупе заливается парафином и эмбрионы инкубируются 2-е суток при 37°С. После инкубации эмбрионы охлаждают при 4°С в течение 3-4 часов, затем в стро го стерильных условиях вскрывают со стороны воздушной п оло сти и визуально оценивают их жизнеспособность. Павшие - отб раковывают, а из остальных пастеровской пипеткой (с помощью вакуума или груши) отсасывают алантоисную жидкость, которая и служит в дальнейшем ис точником вируса. Вируссодержащую аллантоисную жидк ость контролируют на бактериологическую стерильность. Определяют инфе кционный титр в культуре куриных фибробластов и титр гемагглютининов. Контроль на стерильность. осуществляют высевом I мл аллантоисной жидкости из каждог о флакона на питательные cpe д ы - сахарный бульон и среду Сабуро. Посевы инкубируют в течение 7 суток, на с ахарном бульоне при 37°С, а на среде Сабуро - при комнатной температуре. Инфекционный титр определяют в кул ьтуре фибробластов. В 3-х суточную культуру со сформировавшимся монослое м клеток вводятся различные разведения (от 10 -7 до 10 -10 ) алантоисной жидкост и. Культуры инкубируют 3-е суток при 37°С и затем просматривают под микроск опом. Максимальные разведения, оказывающие в культуре цитопатическое действ ие, принимаются за ТЦД вируса (титр цитопатического действия). _Титр гемагглютининов определяетс я стандартным методом постановки реакции гемагллютинации с использова нием куриных эритроцитов (0,5%). Титр гемагглютининов не является ведущей характеристикой вирусов и по становка реакции гемагглютинации не является обязательной для каждой партии вируса. В производстве допускается использование только бактериологически ст ерильного вируса с инфекционным титром 10 -8 -10 -9 /1 мл ТЦЦ 50 и титром гемагглютинин ов 250 - 1000. Вирус болезни Ньюкасла представляет большую ценность для производства , поэтому должны быть приняты меры к тому, чтобы сохранить его чистоту и ин терфероногенные свойства. Категорически запрещается непрерывное испо льзование пассирование вируса: в качестве исходного материала при зара жении используют лучшую партию вируса, которую после контроля разливаю т по I мл в ампулы и лиофилизи руют. После лиофилизации эта партия в даль нейшем считается рабочим стандартом вируса. Рабочий стандарт вируса контролируют описанными методами на бактериол огическую стерильность, инфекционный титр и титр гемагглютининов. Зате м в обязательном порядке вирус идентифицируют. Идентификацию вируса болезни Ньюкасла проводят постановкой стандартной реакции торможения гемаггл ютинации с антисывороткой. Антисыворотка в разведении, соответствующе м титру, но не ниже, чем 1:1000, должна полностью подавлять агглютинацию курин ых эритроцитов /0,5%/ при дозе вируса, равной 4АЕ. Получение первично-трипсинизированных, культур кожн о-мншечной ткани куриных и человеческих эмбрионов. Культуры кожно-мь ш ечной ткани курин ых и человеческих эмбрионов широко используют в производстве интерферона для контроля вир усов, а также для определения отсутствия токсичности и противовирусной активности препарата. Успешная работа производства в значительной сте пени зависит от уровня ведения культур клеток. Для получения культур клеток применяют стандартные методы, основанные на дезинтеграции ткани эмбриона трипсином. При выращивании культур сле дует обратить самое серьезное внимание на качество сред, сыворотки, вспо могательных растворов и чистоту посуды. Получение культуры куриных ф ибробластов Источником ткани являются 9-10-дневные куриные эмбрионы с соблюдением условий строгой стерильности эмбрион извлекают из скорл упы на стерильную чашку Петри. Отбирается кожно-мышечная ткань, переноси тся в колбу Эрленмейера и промывается раствором Хенкса с антибиотиками (50 ед/мл пенициллина + 100 ед/мл стрептомицина или 20 ед/мл мономицииа). Промывны е воды сливают и ткань измельчают, размеры кусочков 1-5 мм. Затем ткань зали вают подогретым до 37°С раствором трипсина (0,2%), разведенным раствором Хенк са (1:1). Колбу с тканью помещают на магнитную мешалку, включают вращение. Чер ез 5 мин. вращение прекращают и после оседания кусочков ткани надосадочн ую жидкость сливают с соблюдением условий строгой стерильности. В колбу вновь заливают подогретую до 37°С смесь растворов трипсина и Хенкса. Сусп ензию перемешивают 5-7 мин. Затем вращение останавливают и после оседания крупных кусочков ткани надосадочную жидкость переливают в стерильные центрифужные стаканы с пробкой. Суспензий центрифугируют при 1250 об/мин, в течение 10 мин. Надосадочную жидкость отбрасывают, а осадок клеток суспен дируют в культуральной жидкости следующего состава: среда №199 - 30%, гидроли зат лактальбумина - 50%, нормальная бычья сыворотка - 20% и антибиотики. Такую операцию трипсинизации повторяют 4-6 раз, но клетки собирают в один ф лакон с культуральной жидкостью. После окончания сбора суспензию тщательно перемешивают и клетки подсч итывают в счетной камере Горяева. Суспензию разводят культуральной жид костью до такой степени, чтобы в I мл содержалось 650 000 – 750 000 клеток. Затем суспензию разливают в стер ильные пробирки по I мл и инк убируют при 37°С в течение 2-3 суток, до образования монослоя клеток. Технологический процесс изготовления лейкоцитарного интерферона под разделяют на 7 стадий и 12 операций, Стадия 1- Выделение лейкоцитов. Биосинтез интерферона проводят с ис пользованием лейкоцитов, освобожденных от примеси эритроцитов. В тех сл учаях, когда примесь эритроцитов превышает 100 клеток на I лейкоцит, например, в эритромассе дл я их отделения необходимо применить фракционирование с последующим ге молизом лейкоцитсодержащей фракций. Если содержание эритроцитов меньш е 100 клеток на I лейкоцит, огра ничиваются только гемолизом. Операция.1. Фракционирование. В стерильные стеклянные колбы - отстойники грушевидной формы с герметично закрывающим ися верхним и нижним отводами, емкостью не ниже 5 л заливают 2 л стабилизир ующего раствора следующего состава: апирогенная дист иллированная вода - I л, глюкоза фармацевтическая - 20 г, аскорбиновая кислота - 0,25 г, х лористый кальций - 5 г, цитрат натрия трехзамещенный - 15 г. Стабилизирующий р аствор при 20°С должен иметь плотность 1,05 г/мл. Раствор стерилизуется авток лавированием или фильтрацией и може т храниться продолжительное время при температуре 4°С. Однако, концентри рованный раствор цитрата натрия целесообразно автоклавировать отдель но и вводить непосредственно в отстойник. В отстойник со стабилизирующим раствором вводят равный (2л) об ъ ем клеточной фракции. Суспензию тщательно п еремешивают и добавляют раствор оса дителя эритроцитов в количестве 1/10 от суммарного об ъ ема суспензии (около 400 мл). В качестве осадителей используют декстран фармацевтический с молек у лярной массой не ниже 80 000 Дальтон (исх одный раствор 100г/л), поливиниловый спирт фармацевтический (исходный раст вор 50 г/л или смесь 1:1 по об ъ ему). Раствор ы осадителей стерилизуют автоклавированием или фильтрацией и могут хр аниться продолжительное время при температуре +4°С, Под действие осадителей происходит агрегация эритроцитов, что ускоряе т их выпадение из суспензии, В результате происходит расслоение суспензии на 2 фракции - темно-окрашенную н ижнюю (фракция эритроцитов) и светлую верхнюю (фракция лейкоцитов). Через нижний отвод отстойника фракцию эритроцитов сливают. Затем сливают и фр акцию лейкоцитов. Клетки отделяют центрифугированием. Надосадочную жи дкость отбрасывают, а осадок клеток ресуспедируют в питательной среде с конечной концентрацией 0,5% этилендиаминотетрауксусной кислоты (ЭДТА). Операция 2. Гемолиз остаточных эритроцитов. Для гемолиза используют 0,83%-ный раствор хлористого аммония в апирогенной дистиллированно й воде, охлажденной до 4°С. Раствор стерилизируют автоклавированием. Кле точную суспензию заливают не менее чем 10 об ъ емами гемолитика, выдерживают в течение 10 мин при 4°С, в затем кле тки отделяют центрифугированием (600*Д, 10 мин, 4°С). Надосадочную жидкость сливают и не используют на последующих стадиях. О садок клеток суспендируют в питательной среде 199 или минимальной "игла", с одержащей 3 ед/мл гепарина, 5% донорской плазмы или сыворотки, 0,1 трилона Б и 5 ед/мл мономицина, среда № I . Операция 3. Подсчет жизнеспособных лейкоцитов. Для определения количества жизнеспособных клеток ис пользуют 1%-ный водный раствор эозината натрия. Эозинатом, окрашиваются в красный цвет только погибшие клетки. Отбирают 0,5 мл тщательно перемененной суспензии и объединяют ее с 0,5 мл рас твора эозината. Выдерживают смесь 30 сек при комнатной температуре и разв одят физраствором в 100 раз. Разведение вводят в счетную камеру Горяева и с читают количество окрашенных и неокрашенных клеток под микроскопом с у величением 100 во всей камере, количество жизнеспособных клеток ( X ) определяют по формуле: X = А х 200 х 1100, где А - количество неокрашенных клеток в камере. Количество нежизнеспособных (окрашенных клеток) не должно превышать 3% о т общего числа клеток в суспензии. Стадия 2. Стимуляция интерфероногенеза - прайминг. На этой стадии преследуют 2 основных цели; активизиров ать метаболизм лейкоцита (для этого в культуральную среду вводят нативн ую плазму и инсулин) и стимулировать интерфероногенез действием интерф ерона. При правильной постановке прайминг обеспечивает повышение выхо да активности не менее, чем в 4 раза. Операция 4. Составление культуральной среды. Лейкоциты, освобожденные от примеси эритроцитов, сусп ендируют из расчета 10-20 млн клеток в I мл среды №1, в которую добавлены 0,0015 ед/мл инсулина и 100-200 ед/мл нативн ого интерферона. Суспензию переливают в плоскодонные колбы емкостью 5 л, заполняя только половину об ъ ема. В к олбу помещают стержень из мягкого железа с некоррозирующим покрытием, к оторый предварительно стерилизуют автоклавированием или прожиганием в пламени горелки. Операция 5. Суспензионное культивирование. Колбы с клеточной взвесью перекрывают стерильной алю миниевой фольгой и помещают в водяную баню из магнитно-проводящего мате риала (пластика любого типа или оргстекла), подключенную к ультратермост ату. Ультратермостат должен обеспечивать устойчивое поддержания темпе ратуры в клеточной взвеси в пределах 37,5°С. Под баней помешают магнитные м ешалки, вращение которых передается стержню в кул ьт уральной колбе. При скорости вращения 100 об/мин лейкоцит ы не травмируются, но устойчиво поддерживаются в суспензии. Клетки инкубируют не менее 2-х часов (биологическое время). Если возникает необходимость, продолжительность прайминга можно увеличить до 12- час ов. Однако в этом случат в культуральную среду необходимо добавить 0,005 М сукцината натрия. Стадия 3. Индукция интерферона. Для индукции используют бактериоло гический стерильный вирус болезни Ньюкасла с инфекци онным титром не ниже 10 8 /мл ТЦД 50 в культуре куриных фибробластов. Вирус предварительно подогревают по 37,5°С. Операция 6. Введение вируса-интерфероногена. Культуральные колбы вскрывают под пламенем горелки и вирусосодержащую аллантоисную жидкость переливают в суспензию из расч ета 10 -100 ТЦД 50 на I лейкоцит. Та к, при содержании лейкоцитов 25 млрд. добавляют 250 млн вируса с интерфероног еным титром 10 9 ТЦД 50 . Колбу перекрывают алюминиевой фольгой с с облюдением условий стерильности и инкубируют в течение I часа при 37,5°С. Стадия 4. Отделение индуцированных лейкоцитов. На стадии индукции завершают подготовительные этапы интерфероногенеза. Для улучшения переносимости препарата, после индукции необходимо удал ение культуральной жидкости неадсорбировавшихся частиц вируса-индукт ора и антигенов куриной аллантоисной жидкости. Для этих целей оказалось целесообразным отделение индуцированных лейкоцитов и переведение их в среду нового состава. Операция 7. Отделение индуцированных лейкоцитов. Суспензию индуцированных лейкоцитов центрифугируют при 600хД 15 мин 4°С, или сепарируют в условиях стерильности. Надосадочную жид кость отбирают в отдельную емкость для обеззараживания, а осадок клеток суспендируют в питательной среде следующего состава: среда № 199 или миним альная "Игла", 3 ед/мг гепарина, 5% плазмы или сыворотки донорской крови, моно мицин 50 ед/мл, рН 7,2-7,4 /среда №2/. Стадия 5. Биосинтез Биосинтез интерферона проводят в стационарной культу ре лейкоцитов. При этом происходит весьма прочное прикрепление лейкоци тов к поверхности культурного сосуда. Оказалось, что важнейшим параметр ом, определявшим выход активности, при стационарном культивировании яв ляется плотность посадки, то есть количество клеток на единицу поверхно сти. Экспериментально установлено, что оптимальным для интерфероноген еза является плотность в 5-7 млн лейкоцитов на I см поверхности. Показательно, что при такой плотности п осадки лейкоциты создают пласт толщиной в 3 клетки. Хорошему прикреплению клеток способствует нанесение на внутренние поверхности культурального сосуда гидрофобного покрыти я - силикона любой марки. Для обеспечения питательной потребности культуры совершенно достаточ но 0,1 л среды №2 на I млн лейкоци тов. Основой энергетического обмена для лейкоцитов является анаэробны й гликолиз. Из-за дефектности ферментных систем начальных стадий цикла К ребса, окисление глюкозы в этих клетках завершается на стадии лактата и лишь небольшое количество (в пределах 3%) подвергается дальнейшему расще плению. Поэтому, об ъ ем воздушной фазы в культуральном сосуде мало в лияет на выход активности. Однако, заполнение средой культурального сос уда, более чем на половину его об ъ ема не рекомендуется. Указанные выше рекомендации следует использовать при составлении клет очной взвеси в конкретных условиях. Для каждого типа культурального сосуда необходимо подобрать оптимальн ые соотношения количества клеток и среды №2 (сохранив и газовую фазу), учит ывая выходы активности и экономичность процесса биосинтеза. Операция 8. Стационарное культивирование индуцирова нных лейкоцитов. В матрицы, со строгим соблюдением стерильности, залива ют рассчитанное количество среды №2 и вводят необходимое количество лей коцитов. Перекрывают матрицы стерильными пробками, суспензию клеток тщ ательно перемешивают и устанавливают матрицы в соответствующе положен ие (норма "ребро") на стеллажи термального помещения с температурой 37°С. Ку льтивирование продолжают 18-20 часов. Допускается роллерное культивирова ние лейкоцитов на стации биосинтеза при соблюдении вышеуказанных прин ципов. Операция 9. Отделение отработанных лейкоцитов. После завершения синтеза интерферон-содержащую куль туральную среду подвергают центрифугированию или сепарированию с собл юдением условий стерильности для отделения отработанных клеток. Надосадочную жидкость собирают в стерильные бутыли емкостью – 10 л. Зате м, для инактивации вируса - интерфероногена в каждой бутыли доводят вели чину рН до 2,5 добавлением при тщател ьном перемешивании (пипеткой, постепенно) 20%-ного раствора соляной кислот ы. Правильность доведения величины рН необходимо контролировать с помо щью потенциометра любой системы. Из каждом бутыли отбирают образец (10 мл) для проведения контролей, после чего бутыль перекрывают стерильной рез иновой пробкой и запечатывают, на бутыль приклеивают этикетку с указани ем номера серии и даты изготовления. Перед розливом по ампулам доводят р Н раствора до 7,0-6,5. Операция 10. Розлив и лиофильная сушка. В ампулы и флаконы емкостью 5-10 мл препарат разливают по 2 мл. Во флаконы емкостью 500 мл по 50 мл. Препарат вводят мерно с помощью дозатора или бюретки со строгим соблюде нием условий стерильности. Ампулы или флаконы с препаратом перекрывают стерильными марлевыми (2 слоя) тампонами и устанавливают вертикально в к ассеты сушильного аппарата. Кассеты с препаратом подвергают заморажив анию при З6-40°С в течение 48-72 часов, Лиофилизацию проводят в вакуумсушильных аппаратах любой системы. Препарат хранят в сухом, защищенном от света месте при температуре от +4 до 10°С. Срок годности препарата 1,5 года с момента изготовления. 7. ТАБЛИЦА противовирусных ПРЕПАРАТОВ № п/п Структурная формула Назван ие, синонимы Систематическое название Методы получения Анализ Разное 1 Ремантадин (полирем, флумадин) альфа-Метил-1-адамантил-метиламина гидро хлорид 2 Де йтифорин 1-Норборнилэтил-амина гидрохлорид 3 Адапромин альфа-Метил-1-адамантил-етиламина гидрохлорид 4 Арбидол этилового эфира 6-бром-5-гидрокси-1-метил-4-диметил- аминометил-2-фенилтиометил-индол-3-карбоновой кислоты гидрохлорид, моног идрат 5 Бонафтон 6-бром-1,2-нафтохинон [10], [11] 6 Оксолин 1,2,3,4-тетраоксо-1,2,3,4-тетрагидро-нафталина дигидрат 7 Теб рофен 3,5,3Ч,5Ч- тетрабром-2,4,2 Ч,4Ч- тетраокси дифенил 8 Риодоксол 2,4,6-трийодрезорцин 9 Флореналь бисульфитное соединение 2-флуоренонил-глиоксал я 10 Метисазон тиосемикарбазон N-метилгуанина 11 Идо ксуридин (перецид, офтан-IDU, iduviran) 5-йод-2 Ч- дезоксиуридан 12 Ацикл овир (ацивир, виролекс, зовиракс, цевирин) 9-(2-гидрокси) этоксиметилгуанин 13 Ганцикловир (цимевен, cymevene) 9-(1,3-дигидрокси-2-пропоксиметил) цинин 14 Фармцикловир (фамвир, famvir) 2-[-(2-амино-9H-пурин-9-ил)этил]-1,-1-пропиндио ла диацетат 15 Риб амидил (виразол, рибавирин) 1-бета-Д-рибофуринозил-1H-1,2,4-тиазол-3-карбоксами д 16 Зидовудин (озидотимидин, ретровир) 1-(3Ч- азидо-2 Ч- дезоксирибозил) тимидин 17 Фланозид 7-бета-Д-глюкопиранозид-8-(3-метилбут-2-енил )-4 Ч,5,7- триоксилфливанон 18 альпизарин 2-С-бета-Д-(глюкопиранозид)-1,3,6,7-тетраоксиксантон 19 Мегосин 1,1Ч,6,6Ч- тетраокси-5,5 Ч- ди изопропил-3,3 Ч- диметил-7,7 Ч- диоксо-8,8 Ч- диметиламиноэтан-сульфокислоты дина триевая соль-2,2 Ч- динафтали на 2 0 Госсипол 2,2Ч- Ди-(1,6,7-триокси-3-метил-5-изопропил-8-нафтальдегид 2 1 Полудон полиаденил-уридиловая кислота 2 2 Камедон (camedon) неовир натриевая соль 10-метиленкарбоксилат-9-акридина 2 3 Тилорон 2,7-бис-[2-(диэтиламино)э токси]-флуорен-9-он [7], [8], [9] ЛИТЕРАТУР А 1. Машковский М.Д. Лекарственные препараты. Т.2. – Москва «Мед ицина», 1993.367с. 2. Харкевич Д.А.Фармакология. – Москва «Медицина», 1996. 425с. 3. БМЭ/ Под ред. Б.В. Петровского. – М. «Сов. Энциклопедия», 1976. БСЭ/Под ред. Прохорова. – М. «Сов. Энциклоп едия», 1976.673с. 5. Машковский М.Д. Лекарственные препараты. Т.2. – Харьков « Торсинг»,1997.423с. 6. Михайлов Клиническая фармакология. – М. «Медицина»,1983, 258с. 7. Andrews. Edwin R, Fleming Roberts W, Girisar J. Martin, Kihm James C. ,Wenstup David L, Mayer Gerald D. «J. Med. Chem », 1974, 17, № 8 882 – 886 (англ). (Р ЖХ, 8ж326, 1975). 8. О синтезе 2,7-бис-[2-(диэтиламино)этокси]-флуорен-9-он. Богатский А. В. Грень А. И. Литвинова Л. А. Лемпарт Г. В. «Доклад АН УССР» 1976г, Б, №7 610 – 612 (ред. англ.). (РЖХ, 7ж141, 1977). 9. Новые пути синтеза хлоргидрата тилорона. Burke Sister M ., Jeullie Madeleine M . « Synth . Communs », 1976, 6, №5 371 – 376 (англ). (РЖХ, 11ж209, 1977). 10. Получение 6-бромнафтохинона-1,2 с нитрозодисульфонатом калия.« Z . Chem ». 1973г, 13, №6, 216 (нем). (РЖХ, 6ж203, 1974). 11. Бонафтон – 14 С. Кивокурцева Л. Н., Бу лот А. Д., Боброва Н. С. «Меченные биологически-активные вещества» (Москва), 1982 г, №4, 54-59. (РЖХ, 1ж188, 1983). 12. Прикладная иммунология. Под редакцией Сохина А.А. и Чернуше нко Е.Ф.- Киев, 1994 13. Современные аспекты применения интерферонов и других иммуномодулято ров. Сборник научный трудов.- Москва, 1994 г. 14. Лоуренс Д.Р., Бенитт П.Н. Клиническая фармакология.- Москва, 1993 г. СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ Адсорбция – поглощение газов, паро в или жидкостей поверхностным слоем твердого тела (адсорбента) или жидкости. Белки – природные высокомолекуля рные органические соединения, построенные из остатков 20 аминокислот, ко торые соединены пептидными связями в длинные цепи. Вирусы (от лат. Virus – яд), мельчайшие неклеточные част ицы, состоящие из нуклеиновой кислоты (ДНК и РНК) и белковой оболочки ( к апсида). Вирион – полностью сформированна я вирусная частица, состоящая из нук леиновой кислоты и белковой оболочки ( к апсида). Хранит и переносит генетический материал вируса от одн ой клетки к другой. Вирулентность – степень болезнет ворности (патогенности) данного микроорганизма. Гликопротеиды (мукопротеиды), слож ные белки, содержащие углеводные компоненты. К гликопротеидам относятс я многие белки плазмы крови (иммуноглобулины, трансферрины и др.), гормоны и др. Инфекция – внедрение и размножени е в организме человека или животного болезнетворных микроорганизмов, с опровождающееся комплексом реактивных процессов; завершается инфекци онным заболеванием, бактерионосительством или гибелью микробов. Источ ник возбудителя инфекции заражает здоровых при соприкосновении, через рот (с водой и пищей), воздух (с капельками слюны и слизи), членистоногих пер еносчиков. Ингибиторы – химические вещества , подавляющие активность ферментов. Используют для изучения механизма д ействия ферментов, для лечения нарушений обмена веществ, а также в качес тве пестицидов. Интерферон – защитный белок, выра батываемый клетками млекопитающих и птиц в ответ на заражение их вируса ми; неспецефический фактор противовирусного иммунитета. Капсид – белковая оболочка вируса , предохраняющая его нуклеиновую кислоту от внешних воздействий. Состои т из отдельных одинаковых структурных единиц – капсомеров. Транскрипция - ферментативный про цесс передачи генетической информации одной цепи ДНК для синтеза компл иментарной нуклеотидной последовательности в структуре мРНК Трансляция -процесс использования генетической информации мРНК для синтеза белка соответствующей амино кислотной последовательности Липиды – обширная группа природны х органических соединений включающая жиры и жироподобные вещества. Со держатся во всех живых клетках, один из основных компонентов биологических мембран. Нуклеиновые кислоты – высокомоле кулярные органические соединения, образованные остатками нуклеотидов . Различают ДНК или РНК кислоты. Выполняют функции передачи и хранения ге нетической информации, учувствуют в механизмах, при помощи которых она реализуется в процессе синтеза клето чных белков. Нуклеозиды – гликозиды в состав к оторых входят пуриновое или пиримидиновое основание и углевод рибоза и ли дезоксирибоза. Содержится в нуклеиновых кислотах и нуклеотидах. Паразитизм – форма взаимоотношен ий между организмами различных видов, из которых один (паразит) использу ет другого (хозяина) в качестве среды обитания и источника питания, нанос я ему вред. Репликация - процесс самоудвоения нуклеиновых кислот. Осуществляется полуконсервативным способом, когда двуспиральная ДНК деспирализуется и каждая ветвь индуцирует синтез комплементарной себе ветви при участи и ДНК- или РНК-полимеразы. Ферментативный процесс репликации разделяют н а три этапа: инициация, элонгация (рост цепи) и терминацию. Сенсибилизация – повышение чувст вительности организма животного и человека к воздействию каких-либо ра здражителей. Субстрат – химическое вещество по двергающееся превращению под действием фермента. Углеводы – обширная группа природ ных органических соединений. Входят в состав клеточной оболочки и други х структур, участвуют в защитных реа кциях организма. Ферменты – биологические катализ аторы, присутствующие во всех живых клетках. Пирогенные вещества (греч. pyr – огонь + gennao – создавать, производить; син. пир огены) – биологически активные вещества экзогенного (бактериального и вирусного) и эндогенного (кл е точно-т каневого) происхождения, обладающие свойством вызывать перестройку ур овня регуляции температурного гомеостаза, приводящую к повышению темп ературы тела и развитию лихорадки. Пролиферация (от лат. proles – потомство и ferre – приносить, производить) – новоо бразование клеток в организме путем их размножения делением. Процессы д еления, лежащие в основе пролиферации – амитоз и митоз. Представление о возможности образования клеток из неоформленной бластомы или “живого вещества”, а не путем пролиферации, в современной науке признаны лишенны ми основания. Пролиферация лежит в основе физиологической регенерации клеток, происходящей в разных тканях на протяжении всей жизни индивидуу ма, но с особой интенсивностью и закономерностью имеющей место в кроветв орной ткани, эпителиальных покровах. Источником пролиферации при этом с лужат либо специальные недифференцированные материнские клетки, либо камбиальные элементы. Простагландины – биологически ак тивные вещества, представляющие собой производные полиненасыщенных жи рных кислот, молекула которых содержит 20 углеродных атомов. Противовоспалительные средства – лекарственные средства, подавляющие проявления воспалительных проц ессов. Регенерация (позднелат. regeneratio – возрождение, возобновление) – обновление структур организма в процессе жизнедеятельности и восстан овление тех структур, которые утрачены в результате патологических про цессов. Репарация – полная или неполная р егенерация внутриклеточных структур, клеток, участков ткани или органа, поврежденных в результате какого-либо патологического процесса. Таксисы (греч. taxis – построение, расположение) – дви гательные реакции свободно подвижных низших растений, простейших живо тных, отдельных клеток многоклеточных организмов и микроорганизмов в о твет на действие раздражителя. Движение по направлению к раздражителю н азывается положительным таксисом, от раздражителя – отрицательным; дв ижение не ориентированное по отношению к раздражителю, обозначают как ф оботаксис. Фагоцитоз ( phagocytosis ; греч. phagos пожирающий + kytos вместилище, здесь – клетка + - osis ) – процесс узнавания, активного захвата и поглощения микроорганизмов, разрушение клет ок и инородных частиц специализированными клетками иммунной системы. О бъектом фагоцитоза являются микробы, чужеродные и измененные собствен ные клетки или их ферменты, комплексы антиген-антитело и др. Неотъемлему ю часть фагоцитоза составляет направленное движение – хемотоксис – ф агоцитов к месту локализации чужеродных частиц. Цитостатические средства ( cytostatica ; греч. kytos вместилище, здесь – клетка + statikos останавливающий; син. цитостат ики) – лекарственные средства, подавляющие деление клеток; используетс я главным образом для лечения злокачественных опухолей. Эндокринная система – система, состоящая из специальных структур, р асположенных в центральной нервной системе, различных органах и тканях, а также желез внутренней секреции , в ырабатывающих специфические биологически активные вещества (гормоны). Наряду с нервной системой эндокринная система участвует в регуляции фу нкций различных систем, органов и метаболических процессов. Протромбин – предшественник ферм ента троибина, содержащийся в плазме крови. Под действием протромбина ра створенный в крови белок фибриноген превращается в сгустки фибрина, тро мбообразующие сосуды. Как и ряд других факторов свертывания крови (факто ры VII ; IX ; X ), протромбин синтезируется в печени под влиянием витамина К . Снижение содержания этих факторов в крови, определенное по протромбино вому времени, сопровождается выраженной кровоточивостью и возникает в следствие тяжелых заболеваний печени, недостатка в организме витамина К или нарушения его всасывания в кишечнике, при передозировке или отравл ении антикоагулянтами – антагонистами витамина К. Хромосома- (от греч. хрома – цвет, краска и сома - тело) термин предложен в 1888 году нем ецким морфологом В.Вальдейером, который обозначал внутриядерные струк туры эукариотической клетки, хорошо окрашивающиеся основными красител ями. Основной носитель наследственного материала (комплекса генов) в эук ариотической клетке. Химическая организация хромосом основана на ДНК и белках, образующих нуклеопротеиновый комплекс. ДНК является материаль ным носителем свойств наследственности и изменчивости и содержит биол огический алгоритм развития клетки, организма. Белки составляют около 65% массы хромосом и выполняют структурирующую и регуляторную функции. Эукариоты -(от греч. eu - хорошо, полнос тью и karyon - ядро, орех) - организмы, обладающие сформировавшимся клеточным я дром, ограниченного от цитоплазмы оболочкой. Генетический материал зак лючен в хромосомах. Характерен половой процесс размножения
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
Сижу, смотрю советское кино 70-ых прошлого века. А ведь когда-то, русские сами работали на всех своих стройках!
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru