Реферат: Аллергические заболевания органов дыхания у детей - текст реферата. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Реферат

Аллергические заболевания органов дыхания у детей

Банк рефератов / Медицина и здоровье

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Реферат
Язык реферата: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Microsoft Word, 169 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникального реферата

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Аллергические заболевания ор ганов дыхания у детей Полиморфизмы генов NO -синтаз и их ассоциация с бро нхиальной астмой и патогенетическими признаками болезни у детей Главными патогене тическими признаками бронхиальной астмы (БА) счита ют атопию и состояние бронхиальной гиперреактивности. Окси д азота играет важную роль в развитии БА, поскольк у он, являясь сигнальной молекулой, уча ствует в ме ханизмах формирования как атопии, так и гиперреактивности брон хов [ Barnes P . J ., 1998; Lundberg J . O . N ., Weitzberg E .,1996]. Синтез NO осуществляется семейством NO -синтаз (КФ 1.14.13.39): нейро- нальной ( NOS - I ), эндотелиальной ( NOS - III ) и индуцибельной ( NOS - II ). Все они яв ляются продуктами различных генов, расположенных на разных хро мосомах [ GIN А, 2002]. Наиболее вероятным кандидатом на участие в развитии БА является ген NOS - I [ Grasemann H . et all ., 1999]. Существуют исследования, показывающие связь полиморфных вариантов генов NO -синтаз с уровнем вырабатыв аемого (эндогенного) оксида азота, что в свою очередь зависит от активнос ти мРНК генов NO -синтаз. Учитывая вышесказанное, можно ожидать значит ельный вклад полиморфизмов промоторной области генов NO -синтаз как факторов риска в развитие заболеваний, при которых отмечается нар ушение нормаль ной выработки NO , в частности при БА. Цель данного иссле дования - изучение ассоциации полиморфизмов про м оторной области генов NO -синтаз у детей, больных БА, с клиническими и функциональными характеристиками болезни. Нами обследова но 88 детей в возрасте от 7 до 13 лет (мальчиков, девочек), больных БА, находивши хся на лечении в отделении аллергологии Областно й детской больницы в 2002- 2003гг. Средний возраст больны х составил 10,5±1,8 лет. Диагноз БА верифи цировался в с оответствии с положениями Национальной программы «Брон хиальная астм а у детей. Критерии лечения и профилактика». Средняя про должительность заболевания к моменту обследования состав ила 3,3±0,5 года. Контрольную группу составили 26 практ ически здоровых детей того же воз раста, проживаю щих в г.Томске. Для оценки функци и внешнего дыхания (ФВД) проводили анализ кривой поток-объем и показа телей спирометрии. Исследование ФВД выполняли по ста ндартной методике на аппарате Master Lab Pro («Эрих Йегер», Германия). Степень реактивности дыхательных путей оценивали в мета-холиновом тесте (РС20). Из мерение уровня общего сывороточного IgE было проведено с исп оль зованием твердофазного иммуноферментного анализа с использование м стандартного набора («Вектор Бест», г.Новосибирск). Выделение геномной ДНК из венозной крови обследуемых прово дили методом фенол-хлороформно й экстракции. Полиморфизм генов NO -синтаз в промоторной област и определяли по следующей методике. Состав реакционной смеси (50 мкл): 67 мМ т рис- НС1, рН 8,8; 16,7мМ сульфат аммония; 1,5 мМ хлорид магния ; по 0,2 мМ каждого dNTP ; 0,1 % тви н-20; 50-100 нг геномной ДНК человека; 2 ед. tag -полимеразы, по 5 пикомоль каждого из прай- меров, специфичных для NOS - I , NOS - II , NOS - II 1: NOS-I sense primer-5'-TTCGGCTGTGCTTTGATGGA-3' NOS-I anti-sense primer-5'-GTTGACCGACTGGATTTAGGGCTCT-3' NOS-II sense primer-(5'-GCCTTCTGGAACCTGGGATTT-3') и NOS-II anti-sense primer-(5'-TTCGACTCGCTACAAAGTTAT-3'); NOS-III sense primer-5'-GCCAAGGGCACCGGCATCACCAGGA-3' NOS-III anti-sense primer-5'-GTTACCAGCACCAGCGTCTCGT-3' Условия проведени я полимеразной цепной реакции (ПЦР): преднагрев: 95" С -5 мин.; основная про грамма - 38 циклов: 95° С- 15 с (денатурация); 55" С - 15 с (отжиг); 72° С-40 с (си нтез 2-й цепи); заключительная стадия: 72' С - 1мин. Термо циклер - «Терцик» (ДНК-Техно логия, г.Москва). В ре зультате ПЦР получали фрагм енты ДНК длиной 656, 500, 260 пар нуклеотидов соответственно для NOS - I , NOS - II , NOS - III . Для выявления полиморфизмов использовали анализ конформа ционного поли морфизма одноцепочечных фрагмен тов ДНК ( SSCP , single - strand conformational polymorphysm ). Тотальную РНК выде ляли с помощью коммерческого набора TRIZOL ™ ( GibcoBRL , Life Technologies ). ПолиА - PHK получали на колонках с олиго - dT целлюлозой ( ICN , США) и проводили обратную транскрипцию в течение 1 ч при 37' С. кДНК амплифицировали с праймерами, специфич ными для мРНК NOS - I , NOS - II , NOS - III , синтезированными на ДНК-синтез аторе ASM 800: мРНК NOS-I sense-5'-ATGGCTTGCCCCTGGAAGTT-3' мРНК NOS-I anti sense-5'-GCCACAACAGTGGCAACAT-3' мРНК NOS-II sense-5'-AGTTTGACCAGAGGACCCAG-3' мРНК NOS-II anti sense-5'-CGAGGAGGCTGCCCTGCAGA-3' мРНК NOS-III sense-5'-GTTGATGCGGAGGGAACCGA-3' мРНК NOS-III anti sense-5'-GAACTGGAAGTAACGTGCCG -3' Глицеральдегид 3-фосфа т дегидрагепаза (ГАФД) использована как положительн ый контроль экспрессии мРНК. П оказатели экспрессии выражали в процентах отн осительно активности ГАФД, которая принималась за 100%. ГАФД : Sense primer - (5'-GAAGCTCACTGGCATGGCCTTCC-3'); Anti-sense primer - (5'-CATGTGGGCCATGAGGTCCA-3'). Оценку специфичности пр одуктов амплификации проводили с помощью « nested -ПЦР». Оценку нормальности распределения полученных результатов по каж дой величине проводили с помощью критерия Колмагорова-Смирнова. Статис тическую обработку результатов для признаков с нор м альным распределением проводили с использованием t -критерия Стьюдента, для признаков, н е соответствующих нормальному закону распредел ения, применяли U - mecma Манна-Уитии. Корре ляционный анализ проводили с использованием критерия Пирс она. Сравнение распределения частот паттернов в группах обследованных проводили с использованием точечного критерия Ф ишера. Относительный риск ( RR - Relative Risk ) вычисляли по формуле: RR =( a +0,5).( d +0,5)/( b +0,5 Hc +0,5) где а - число больн ых с наличием данного паттерна; b - с отсутствием данного патт ерна; cud - число здоровых, с наличием и отсут ствием данного паттерна соответственно; параметр 0,5 в этой формуле используется как поправка на малочисленнос ть выборки. При оценке результатов было принято, что RR >1 рассматривали как положительную ассоциацию заболе вания с данным полиморфным вариантом («фактор риска»), a RR <1 как отрицательную ассоциацию («фактор устойчивости»). Результаты: При изучении уровня экспрессии NO -синтаз у детей, больных БА различной степени тяжести, установлена высокая ак тивность матричной РНК (мРНК) NOS - I п ри тяжелой и среднетяжелой БА (р<0,05). В свою оче редь а ктивность мРНК NOS - III у всех больных детей, вне зависим ости от тяжести заболевания, была достоверно выше (р<0,05), чем в группе контроля. Следует отметить, что пр и тяжелой БА активность мРНК NOS - II была досто верно выше, чем при БА легкой и средней степени тяжести, а так же почти в 10 раз превышала уровень экспрессии NOS - II в контрольной группе (табл. 1). Уро вень экспрессии мРНК генов NO -синтаз у больных бронхиальной астмы различной степени тяж ести Ур овень экспрессии мРНК генов NO -синтаз у больных бронхиальной а стмой и в контрольной группе Уровень экспрессии мРНК NOS1 NOS2 NOS3 Урове нь экспрессии мРНК (контрольная группа) 4,4+0,18% 16,37±0,61% 1,48±0,16% Уровень экспрессии мРНК (БА легко й степени тяжести) 4,0±0,22% 29,0±2,72%* 5,0±0,34%* Ур овень экспрессии мРНК (БА средней степени тяжести) 13,0±0,25% 71,0+6,83%* 2,0±0,3% Уровень экспрессии мРНК (БА тя желой степени) 14,0±0,39%* 156,0±3,86%* 4,0±0,26%* Примечание: * - р<0,05 по сравнению с группой контроля Уровен ь экспрессии мРНК NOS-1 NOS-2 NOS-3 паттерны 11 12 13 21 22 23 24 31 32 33 34 Уровень экспрессии МРНК (БА) 6,29 ±0,33 6,77 ±0,49 6,31 ±0,5 92,3 ±4,08* 94,5 ±2,5* 86,7 ±2,36* 151,25 ±2,3* 3,9 ±0,29 4,5 ±0,01 2,75 ±0,26 4,47 ±0,58* Уровень экспрессии мРНК (контроль) 3,86 ±0,09 4,75 ±0,25 5,8 ±0,2 15,8 ±1,46 19,3 ±1,67 15,7 ±0,63 — 1,48 ±0,19 2,6 ±0,42 2,5 ±0,26 1,0 ±0,01 Примеча ние: * р<0,05 по сравнению с группой контроля. Методом корреляционного анализа установлена обр атная связь между уровнем экспрессии NOS - II и показателями, характеризующим и функцию легких, такими как ОФВ1(г=-0,5; р=0,0001), ФЖЕЛ (г=-0,4; р =0,001), ПВС% (г=-0,2; р=0,04). Наиболее высокий коэффициент корре ляции получен между активностью мРНК NOS - I и изменениями, характерными для бронхиальной обструкции (ОФВ! (г=-0,6; р=0,0001), ОФВ/ ФЖЕЛ (г=-0,24; р=0,025)). В рамках проводим ого исследования было обнаружено три полиморф ны х варианта (паттерна) в промоторной области гена NOS - I : NOS -11, NOS - 12 и NOS -13. В группе больных БА средней степени тяжести частота встр еча емости паттерна NOS -13 была достоверно выше (р<0,05), чем в группе кон троля и в группах с легкой и тяжелой БА. В промоторной обла сти гена NOS - II было идентифицировано четыре вида па ттернов: NOS -21, NOS -22, NOS -23 и NOS -24. У больных среднетяжелой БА паттерн NOS -21 встречался в 1,5 раза чаще, чем в других группах (р<0,05). Обнаружено, что у здоровых детей и у детей с легкой Б А отсутство вал паттерн NOS -24, тогда как при тяжелой и среднет яжелой БА частота его встречаемости составляла 4,5% и 4,8% соответственно. Для промоторной обл асти гена NOS - III было получено четыре поли морфных вар ианта: NOS -31, NOS -32, NOS -33 и NOS -34. Установлено, что при БА легкой и средн ей степени тяжести значительно чаще встречался пат терн NOS -34 (30,4% и 23,8% соответственно против 11,5% в группе контроля). При тяжелой БА достоверно возрас тала частота паттерна NOS -33 (р<0,05). При наличии паттерн ов NOS -34 и (или) NOS -24 обнаружено достоверное повышение экспрессии мРНК по сравнению другими вариант ами полимор физмов в этих генах (р<0,05) (табл.2). Относит ельный риск ( RR ) для данных паттернов составлял 1,53 и 2,17 соответственно. Полученные резуль таты в данном случае доказывают наличие положите льной ассоциации заболевания с полиморфными вар иантами NOS -24 и NOS -34 («фактор риска»). На ряду с этим у больных БА установлена положительная зависимость между ур овнем IgE и наличием паттерна NOS -34 (г=0,2; р=0,04) и отрица тельная при наличии NOS -31 (г=-0,2; р=0,04). Следует также отметит ь, что в контрольной группе частота обнаружения паттерна NOS -31 была досто верно выше, чем у детей с БА (80,8% и 68,6% соотве тственно) (р<0,05), a RR составил 0,64, что может рассматриваться как отрицательная асс оциация паттерна NOS -31 с данным заболеванием («фактор у стойчивости»). Таким образом, налич ие у детей определенных полиморфных вариантов промоторной области ген ов NO -синтаз может о казывать влияние на феноти-пические проявления БА и важных патогенетич еских признаков болезни. В развитие астматического синдрома включено м ножество генов разных локу- сов, каждый из которых может вносить небольшой вклад в общую подвер жен ность заболеванию. Гены NO -синтаз являются лишь одними из множества генов предрасположенности к БА, взаимодействующих между со бой и с окру жающей средой.
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
богомерзкие хакеры пририсовали Кириллу не только часы, но и Кадилак и пять Мерседесов кортежа...
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, реферат по медицине и здоровью "Аллергические заболевания органов дыхания у детей", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru