Курсовая: Методы физиологических исследований - текст курсовой. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Курсовая

Методы физиологических исследований

Банк рефератов / Медицина и здоровье

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Курсовая работа
Язык курсовой: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Microsoft Word, 769 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникальной курсовой работы

Узнайте стоимость написания уникальной работы

39 МЕТОДЫ ФИЗ ИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Физиоло гия – наука, изучающая механизмы функционирования организма в его взаи мосвязи с окружающей средой (эта наука о жизнедеятельности организма), ф изиология – наука экспериментальная и основными методами физиологической науки являются экспериме нтальные методы. Однако физиология как наука зародилась внутри медицин ской науки еще до нашей эры в Древней Греции в школе Гиппократа, когда осн овным методом исследования был метод наблюдения. Выделилась физиологи я в самостоятельную науку в XV веке благодаря исследованиям Гарвея и ряда других у ченых естествоиспытателей, и, начиная с конца XV – начала XVI веков, основным методом в области физиологии являлс я метод эксперимента. И.Н. Сеченовым и И.П. Па вловым был внесен значительный вклад в развитие методологии в области ф изиологии, в частности в разработке хронического эксперимента. Литература: 1. Физиология ч еловека. Косицкий 2. Корб ков. Нормальная физиология. 3. Зимкин. Физиология человека. 4. Физиология человека под ред. Покров ского В.Н., 1998 г. 5. Физиология ВНД. Коган. 6. Физиология человека и животных. Ког ан. 2 т. 7. Под р ед. Ткаченко П.И. Физиология человека. 3 т. 8. Под ред. Ноздр о чева. Физио логия . Общий курс . 2 т. 9. Под ред. Курае ва. 3 т. Переводной учебник ? физиологии человека. Метод наблюдения – самый древний, зародился в Д р. Греции, хорошо развит был в Египте, на Др. Востоке, в Тибете, в Китае. Суть э того метода заключается в длительном наблюдении изменений функций и со стояний организма, фиксирование этих наблюдений и по возможности сопос тавление визуальных наблюдений с изменениями организма после вскрытия . В Египте при мумифицировании трупы вскрывались, наблюдения жреца за больным: изменения кож ных покровов, глубина и частота дыхания, х арактер и интенсивность выделений из носа , ротовой полости, а также объем и цвет мочи, ее прозрачность, количество и характер в ыделяемого кала, его цвет, частота пульса и другие показатели, которые сопоставлялись с изменениями во внутренни х органах, фиксировались на папирусе. Таким образом уже по изменению выделяемых организмом кала, мочи, мокроты и т.д. можно было судить о нарушении функций того или ин ого органа, например, если кал белого цвета допустимо предполагать наруш ение функций печени, если кал черного или темного цвета, то возможно предположить желудочного или кишечное крово течение. Дополнительным критерием служили изменения цвета и тургора кожи, отечно сть кожи, ее характер, окраска склера, потливость, дрожь и т.д. Гиппократ к наблюдаемым признакам относ ил характер поведения. Благодаря своим т щательным наблюдениям им было сформулировано учение о темпераменте, согл асно которому все человечество по особенностям поведения делится на 4 ти па: холерики, сангвиники, флегматики, мела нхолики, однако Гиппократ ошибся в физиологическом обосновании типов. В основу каждого типа им было положено соотношение основных жидкостей ор ганизма: сангви – кровь, флегма – тканевая жидкость, холеа – желчь, мела нхолеа – черная желчь. Научное теоретическое обоснование темперамент ов было дано Павловым в результате длительных экспериментальных иссле дований и оказалось, что в основе темперамента лежит не соотношение жидк остей, а соотношение нервных процессов в озбуждения и торможения, степень их выра женности и преобладание одного процесса над другим, а также скорость смены одно го процесса другими. Метод наблюдения широко используется в ф изиологии (особенно в психофизиологии) и в настоящее время метод наблюде ния сочетается с методом хронического эксперимента. Метод эксперимента . Физиологический эксперимент в отличие от простог о наблюдения – это целенаправленное вмешательство в текущее отправле ние организма, рассчитанное на выяснение природы и свойств его функций, их взаимосвязей с другими функциями и с факторами внешней среды. Также вмешательство часто требует хирургичес кой подготовки животного, которое может носить: 1) острую (вивисекционную, от слова vivo – живое, sekcia – секу, т.е. секу п о живому), 2) хроническую (экспериментально-хирургическую) формы. В связ и с этим эксперимент подразделяют на 2 вида: острый (вивисекция) и хроничес кий. Физиологический эксперимент позволяет ответить на вопросы: что происходит в организме и как происходит. Вивисекция представляет собой форму экс перимента, проводимую на обездвиженном животном. Впервые вивисекция на чала применятся в средние века, но широко стала внедряться в физиологиче скую науку в эпоху Возрождения ( XV - XVII в) . Наркоз в то время н е был известен и животное жестко фиксировалось за 4 конечности, при этом о но испытывало мучения и издавало душераздирающие крики. Эксперименты п роводились в в специальных комнатах, которые народ окрестил «дьявольск ими». Это послужило причиной появления философских групп и течений. А нимализм (течения, пропагандирование гуманного от ношения к животным и выступление за прекращение издевательств над живо тными, анимализм пропагандируется в настоящее время), витализм (ратовало за то, не проводились эксперимен ты на ненаркотизированных животных и волонтерах), механицизм ( отожествляли прави льно протекающие в животном с процессам и в неживой природе, ярким представителем механицизма был французский ф изик, механик и физиолог Рене Декарт), ант ропоцентризм. Начиная с XIX века в остром эксперимента стали применять нар коз. Это привело к нарушению процессов регуляции со стороны высших отрос тков ЦНС, в результате нарушается целостность реагирования организма и его связь с внешней средой. Такое применение наркоза и хирургическая тра вля при вивисекции вносит в острый эксперимент неконтролируемые парам етры, которые трудно учесть и предвидеть. Острый эксперимент , как и любой эксперим ентальный метод, имеет свои достоинства : 1) вивисекция – один из аналитических методов, дает возможность моделир овать разные ситуации, 2) вивисекция дает возможность получать результат ы в относительно короткий срок; и недостатки: 1) в остром эксперименте откл ючается сознание при применении наркоза и соответственно нарушается ц елостность реагирования организма, 2) нар ушается связь организма с окружающей средой в случаи применения наркоз а, 3) при отс утствии наркоза идет неадекватный норма льному физиологическому состоянию выброс стрессорных гормонов и эндог енных (вырабатываемых внутри организма) м орфиноподобных веществ эндорфинов, оказ ывающих обезболивающий эффект. Все это способствовало разработке хрони ческого эксперимента – длительного наблю дения после острого вмешательства и восстановлени е взаимоотношений с окружающей средой. П реимущества хронического экс п еримента: органи зм максимально приближен к условиям интенсивного существования. Некот орые физиологи к недостаткам хронического эксперимента относят то, что результаты получаются в относительно длительный срок. Хронический эксперимент впервые был раз работан отечественным физиологом И.П. Павловым, и, начиная с конца XVIII века, широко применяетс я в физиологических исследованиях . В хро ническом эксперименте используется ряд методических приемов и подходо в. Метод, разработанный Павловым – метод на ложения фистул на полые органы и на органы, имеющие выводные протоки. Родоначальником фистульного методы был Бас ов, однако при наложени и фистулы его методом, содержимое желудка попадало в пробирку вместе с пищеварительными соками, что затруднило изучение состава желудочного сока, этапов пищеварения, скорости протекания процессов пищеварения и качес тва отделяемого желудочного сока на различный состав пищи. Фистулы могут накладываться на желудок, протоки слюнных желез, кишечник, пищевод и др. Отличие павловской фистулы от басовской состоит в том, что Павлов накладывал фистулу на «малый желудочек», сделанный искусствен но хирургическим путем и сохраняющий пи щеварительную и гуморальную регуляцию. Э то позволило Павлову выявить не только качественный и количественный с остав желудочного сока на принимаемую пи щу, но и механизмы нервной и гуморальной р егуляции пищеварения в желудке. Кроме того, это позволило Павлову выявит ь 3 этапа пищеварения: 1) условнорефл екторный – при нем выделяется аппетитны й или «запальный» желудочный сок; 2) безу словнорефлекторная фаза – желудочный сок выделяется на поступившую п ищу независимо от ее качественного состава, т.к. в желудке располагаются не только хеморецепторы, но и нехеморецепторы, реагирующие на объем пищи , 3) кише чная фаза – после того как пища попадает в кишечник, то пищеварение усиливается. За сво и работы в области пищеварения Павлов был удостоен Нобелевской премии. Гете рогенные нервно-сосудистые или нервно-мышечные анаст е нозы . Это изменение эффе кторного органа в генетически детерминированной нервной регуляции фун кций. Проведение таких анастеноз позволяет выявить отсутствие или нали чие пластичности нейронов или нервных центров в регуляции функций, т.е. м ожет ли седалищный нерв с остатком позвоночника управля ть дыхательной муску латурой. При не рвно-сосудистых анастенозах эффекторними органами являются кровеносн ые сосуды и соответственно расположенные в них хемо- и барорецепторы. Анастенозы могут выполняться не только н а одном животном, но и на разных животных. Например, если сделать анастено з нервно-сосудистый у двух собак на каротидную зону (разветвление дуги с онной артерии), то можно выявить участи различных отделов ЦНС в регуляци и дыхания, кроветворения, сосудистого тонуса. При этом режим вдыхаемого воздуха изменяют у донной собаки, а регуляцию видят у другой. Пересадка различных органов. Подсадка и удаление органов или различных участков мозга (экстирпация) . В результате удале ния органа создают гипофункцию той или иной железы, в результате подсадк и создают ситуацию гиперфункции или избытка гормонов той или иной желез ы. Экстирпация различных участков головно го мозга и коры головного мозга выя вляют функции этих отделов. Например, при удалении мозжечка было в ыявлено его участи в регуляции движения, в поддержании позы, статокинети ческих рефлексов. Удаление различных участков коры головн ого мозга позволило Бродману картировать мозг. О н разделил кору на 52 поля по функциональным отправлениям. Мето д перерезки головного спинного мозга. Позволяет выявить функциональную значи мость каждого отдела ЦНС в регуляции соматических и висцеральных функц ий организма, а также в регуляции поведения. Вживление электронов в различные учас тки мозга. Позволяет выявить активность и функциональную значимость той или ино й нервной структуры в регуляции функций организма (двигательных функций, висцеральных функций и псих ических). Электроды, вживляемые в мозг, дел аются из инертных материалов (т.е. они должны быть интоксичными) : платина, серебро, палладий. Электроды позволяют не только выявлять функцию того или иного участка, но и наобор от, зарегистрировать в каком участке моз га появление вызывает потенциал (ВТ) в отв ет на те или иные функциональные отправления. Микроэлектродная техника дает человеку возможность изучить физио логические основы психики и поведения. Вживление канюль (микро). Перфузия – пропускание растворов различно го химического состава по нашему компоненту или по наличию в нем метаболитов (глюкоза, ПВК, молочная кис лота) или по содержанию биологически активных веществ (гормоны, нейрогормоны, эндорфины, энкефамины и др.). Кан юль позволяет вводить растворы с разным содержимым в ту или иную область мозга и наблюдать изменение функционал ьной активности со стороны двигательного аппарата, внутренних органов или поведения, психологической деятельности. Микроэлектродная технология и конюлиро вание применяются не только на животных, но и на человеке во время хирургических операций на мозге. В большинстве случаев это делается с диагностической целью. Введение меченых атомов и последующее наблюдение на позитронно-эмиссионном томографе (ПЭТ ). Чаще всего вводят ауро-глюкозу, меченную золотом (золото+глюкоза). По о б ра зному выражению Грин е , универсальным донором энергии во всех живы х системах является АТФ, а при синтезе и р есинтизе АТФ основным энергетическим субстратом является глюкоза ( ресинтез АТФ может так же происходить из кре атин-фосфата). Поэтому по количеству потребляемой глюкозы судят о функциональной активности того или иного у частка мозга, о его синтетической активности. Глюкоза потребляется клетками , а золото н е утили зи руется и накапливается в этом участке. По разноактивному золоту, его количеству су дят о синтетической и функциональной активности. Стереотаксические методы. Это методы, при кото рых проводятся хирургические операции по вживлению электродов в определенной области мозга в соответствии со стереотак сическим а тласом мозга с послед ующей регистрацией отведенных быстрых и медленных биопотенциалов, с регистрацией вызванных потенциалов, а также регистрацией ЭЭГ, миограммы. При пос тановке новых целей и задач одно и тоже животное можно использовать в те чение длительного времени наблюдения, изменени я расположения микроэлементов или перфузируя различные области мозга или органы различными раств орами, содержащими не тол ь ко биологически активные вещества, но и метатолиты, энергетические субстраты (глюкоза, крео тинфосфат, АТФ). Биохимические методы. Это большая группа методик, с помощью которых в цир кулирующих жидкостях, тканях, а иногда и органах, определяют уровень кат ионов, анионов, нено н ицированных элементо в (макро и микроэлементов), энергетических веществ , ферментов, биологически активных веществ (гормоны и др.). Эти методы применяются как in vivo (в инкубаторах) или в тканях, которые продолжают секретировать и синтезировать в ырабатываемые вещества в инкубационную среду. Биохимические методы позволяют оценивать функциональную активность тог о или иного органа или его части, а иногда и целой системы органов. Например, по уровню 11-ОКС можно судить о функциона льной активности пучковой зоны коры надпочечников, но по уровню 11-ОКС мож но судить и о функциональной активности ги поталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы. В целом, поскольку 11-ОКС я вляется конечным продуктом периферическ ого звена коры надпочечников . Методы изучения физиологии ВНД. Психическая работ а мозга долго оставалась недоступной для естествознания в цело м и для физиологии в частности. Главным образом потому, что о не й судили по ощущениям и впечатлениям, т.е. с помощью субъективных методов. Успех в это й области знаний определился тогда, когда о психической деятельности (ВНД) стали суд ить с помощью объективного метода условных рефлексов разной сложности выработки . В начале XX века Павловым была разработана и предложена методи ка выработки условных рефлексов . На основе этой методики возможны дополнительны е приемы изучения свойств ВНД и локализац ии процессов ВНД в головном мозге. Из всех приемов наиболее часто используются следующие приемы: Пробы возможности образования разных фо рм условных рефлексов (на высоту тона звука, на цвет и т.д.) , что позволяет судить о условиях первичного восприятия. Сопоставления этих границ у животных разных видов позволяет выявить: в каком направлении ш ла эволюция сенсорных систем ВНД. Онтогенетическое изучение условных реф лексов . Сложное поведение животных разны х возрастов при его изучении позволяет установить, что в этом поведении является врожденным, а что приобрете нным. Наприм ер, Павлов брал щенков одного помета и вска рмливал одних мясом, а других молоком. По достижению зрелого возраста вы рабатывал у них условные рефлексы, и оказалось, что у тех собак, которые с детства получали молоко, услов ные рефлексы вырабатывались на молоко, а у тех собак, которых с детства кормили мясом, условные рефлексы легко выра батывались на мясо. Таким образом, строгог о предпочтения виду плотоядной пищи у собак нет, главное, что бы она была полноценной. Филогенетическое изучение условных реф лексов. Срав нивая свойства условнорефлекторной деятельности животных разного уро вня развития, можно судить: в каком направлении идет эволюция ВНД. Например, оказалось, что скорость образования условных рефлексов ре з ко от беспозвоночных и позвоночных, сравнительно мелко изменяется на протяжении всей истори и развития позвоночных и скачком достига ет способностей человека сразу связывать ? , совпавшие события (импринтинг), импр ин ти нг также свойственен выводковым птицам (вылупившиес я из яйца утята могут следовать за любым предметом: ку рица, человек и даже за движущейся игрушкой. В переходах беспозвоночные животные – позвоночные животные, п озвоночные животные – человек отразилис ь переломные этапы эволюции, связанные с в озникновением и развитием ВНД (у насекомых нервная система неклеточного типа, у кишечнополостных – ретикулярн ого типа, у позвоночных – трубчатого типа, у птиц появляются бальные ганглии, некото рые обуславливают высокое развитие условнорефлекторной деятельности. У человека хорошо развита кора больших по лушарий, что и обуславливает скачек. Экологическое изучение условных рефлек сов. Потенциал действия, возникающий в нервных клетках, у час твующих в образовании рефлекторных связей, позволяет выявить основные звенья условного рефл екса. Особенно важно то, что биоэлектронные показатели дают возможность наблюдать форми рование условного рефлекса в стр уктурах мозга еще до того , как он появится в двигательных или вегетативных (вис церальных) рефлексах организма. Прямое раздражение не рвных структур мозга позволяет ставить модельные опыты по образованию нервных связей между искусственным и очаг ами возбуждения. Можно также прямо определять, как изменяется при условн ом рефлексе возбудимость участвующих в н ем нервных структур. Фармак ологическое действие при формировании или пере делке условных рефлексов . Вводя в мозг определе нные вещества можно определить, какое вли яние они имеют на скорость и прочность образован ия условных рефлексов, на способность к переделке условного рефлекса, чт о позволяет судить о функциональной подвижности ЦНС, а также на функцион альное состояние нейронов коры и их работо способность . Например, было выявлено, что кофеин обеспечивает обр азование условных рефлексов при высокой работоспособности нервных клеток, а при низкой их работоспособности да же небольшая доза кофеина делает возбужде ние непосильным для нервных клеток. Создание экспериментальной патологии у словно-рефлекторной деятельности . Например, хирургическое удаление височных долей коры больших полушарий ведет к пси ческо й глухоте. М етодом экстирпации выявляется функциона льная значимость участков коры, подкорки и стволовых отделов мозга. Таки м же образом определяют локализацию корковых концов анализаторов. Моделирование процессов условно-рефлек торной деятельности . Еще Павлов привлекал математиков для того, чтобы выр азить формулой количественную зависимость образования условного рефлекса от частоты его подкрепления. О казалось, что большинства здоровых животных, включая человека, усло вный рефлекс вырабатывался у здоровых людей после 5 подкреплений безусл овным раздражителем. Особенно это важно в с лужебном собаководстве и в цирке. Сопоставление психологических и физиологических проявлений усл овного рефлекса . Поддержка произвольного внимания, полета, эффективн ость обучения. Сопост авление психологических и физиологических проявлений с биоэлементами и морфологическими с биокинетическими: выработка белков памяти ( S -100) или участков биологически ак тивных веществ в формировании условных рефлексов. Д оказано, что если ввести вазопроессии, то условные рефлексы вырабатываю тся быстрее (вазопрессии – ней ро - гормон, вырабатываемый в гипоталамусе). Морфологические изменения структуры н е й ро на : голый нейрон при рожд ении и с д енуритами у взрослого человека. Лабо раторное занятие №1 Тема: Методы экстирпации и подсадки Цель: Знакомство с методами экстирпации и подс адки паращитовидных желез. Моделирование гипо- и гипрепаратиреоза. Оборудование: лабораторные животные (5 крыс) , электро коагулятор, пинцет, ножницы, скальпель, йод, иглы для з ашивания кожи, шовный материал, операционный столик, эфир для наркоза, во ронка. Ход р аботы Рабо та 1. Моделирование дефицита паратиреоид ных гормонов у крыс. Дефицит паратгормонов создается удален ием обеих паращитовидных желез при помощ и аппарата эклетрохирургичесоко высоко частотного ЭХ-30. Принцип работы прибора заключается в следующем: за счет тока высо кой частоты происходит быстрое нагреван ие тканей и испарение содержимого клеток. Аппарат работает в 2 р ежимах: « резание» и «коагуляция». Удаление желез п роисходит в режиме коагуляцией тонким э лектродом d пример но равен размерам ОЩ Ж . Для коагуляции жел ез достаточно соприкосновение в течение 1-1,5 с. В режиме резания железы можно экстилировать. Преим ущества коагуляции по сравнению с экстилацией ОЩ Ж заключается в том, что исключается кровопотеря и не повреждается ткань щитовидной железы. Послеоперационный период 2 недел и. Рабо та 2. Моделирование избытка паратиреоидн ых гормонов у крыс. Для моделирования гиперпаратиреоза использовали м е тод трансплантации ОЩ Ж . Сущность метода за ключается в трансплантации крысам-рецип иентам под кожу шеи 3-х пар ОЩ Ж от 3-х крыс доноров. Кр ысы-доноры должны быть примерно одного веса с крысой-реципиентом. Донорам под эфирным наркозом делают разр ез кожи в области передней плотности шеи длиной 2-3 см, следовательно тупым способом разд вигают мышцы, делаю доступными ОЩЖ. В этом состоя нии крысу-донора помещают под воронку, продолжая давать э фи рный наркоз. Живо тное- реципиента перед операцией фиксиро вали на спинке на хирургическом столике, также как и у крыс-доноров производили разрез кожи длиной 2-3 см в области передней плотности шеи . Затем ? скальпелем делали в подкожной клетчатке 6 неглубоких надрезо в, которые служили своего рода ячейками для трансплантируемых ОЩЖ. Затем у 3-х крыс-доноров быстро отсекали ОЩЖ и помещали их в подготовленные разр езы у крыс ы-реципиента. Разрез кожи репици ента зашивали хирургическим шелком и обрабатывали йодом. В последующие дни производили ревизию операционной раны. Полное заживление раны наблюдалось чере з 7-8 дней. Трансплантаци онные ОЩЖ хорошо при живаю тся. Данная модель убытка парат. гормонов позво ляет обеспечить круглосуточное увеличен ие его в крови за счет естественного парат. г ормона. Задание для самостоятельной работы. Пронаблюдать за состоянием оперированн ых животных вплоть до полного заживления раны и повторного их в зятия в эксперимен т . Спустя 2 недели определить у оперированных животных уровень общего каль ция, косвенно свидетельствующего о функц иональной активности ОЩЖ и с-клеток щитовидной железы, а также уровня 11-ОКС, изменяющейся как в ответ на стрессор ное хирургического воздействие, так и в ответ на нарушение функции ОЩЖ (точнее на нарушение гомеостаза кальци я). Лабо раторное занятие №2 Рабо та 1. Двусторонняя овариоэктомия. Д ля изучения электрогенов в адаптационн о-приспособительной деятельности организма , самок крыс подвергали двусторонней овариоэктом ии. Операция выполняется в соответствии с рекомендациями, изложенного в руководстве Бунока , 1968. Животных наркотизировали эфиром и фикси ровали на операционном столе в положении на спине. Шерсть на брюшке от грудины до лобковой области выстригали и кожу обработали спи ртом. Скальпелем, осторожно, чтобы не повр едить кишечник делали продольный разрез длиной 4-5 см по вредней линии живота. Найдя правый или левый рог матки, иссл едуя далее по нему по яйцеводу , находим яи чник. Накалываем лигатуру на верхнюю час ть яйцевода и связку, поддерживающую яич ник, после чело обрезали е го ножницами. Аналог ично удалили и второй яичник. После этого мышцы и конец ушивали и шов обрабатывали 5% йодной настойкой. После операции животных помещали в чист ую клетку, в течение первых 4-5 дней проводили ежедневную обработку раны дезинфицирующими средствами. Заживление раны происходило за 8-10 дней. Рабо та 1. Односторонняя адреналэктомия. Для мо делирования дефицита эндогенных глюкокортикоидов животных подверган ии АЭ (адреналэктомии). Операт ивное удаление одного надпочечника прои зводили по метотдике, представленной в руководстве Кабак Я.М. Операцию п роводили под эфирным наркозом. Крысу фиксировали на операционном столе в полож ении на животе. Слева от позвоночника выстригали шерсть и обрабатывали операционное пол е йодом. Разрез кожи и мышцы производили на расстоянии 1 см . слева о т п озвоно чника, отступая на 1,5 см. книзу от реберной дуги. Д а лее небольшой мышечный разрез расширяли крючками. Надпочечник вместе с окружающей его жировой тканью и соединительнотканным тяжом зах ватывали анатомическим пинцетом и удаляли. Операционную рану послойно ушивали. В послеоперационный период каждую ра ну ежедн евно обраб атывали антисептическими средствами. Заживление происходило через 5-7 дн ей. Вывод : Оварио- и адреналэктомия одновременно пр ивели к резкому снижению адаптивных возможностей животных в связи с нар ушениями гормнального баланса ( гипофунк ция надпочечников привела к гипокартицизму и гипоэстрагении) и его гибе ли на 9 сутки после операции. Лабо раторное занятие № 3 Тема: Методы вв едения фармацевтических препаратов лабораторным животным . Тестирующи е методы. Цель: Оз наком и т ься с методическими приемами и способами введения фармацевтических препаратов и различног о рода пероральных и пар э нтеральных нагрузок лабораторным животным. Оборудование: шприцы д л я перорального, вну тримышечн ого и перэнтерального введени я, лекарственные вещества или водной нагрузки, 2 воронки с колпаками, 2 пробирки для сбора мочи ( мирные ), 2 пелен ки, раствор петуитрина (содержит антидиуретический гормон – вадопреси н), физиологический раствор, дистиллиров анная вода. Ход р аботы Работа 1. Влияние водной и гиперсоматичес кой нагрузки на диурез. Влияние антидиуретического гормона на диурез. Крыс взвесить и записать массу тела. Зате м дать крысам водную нагрузку методом перорального введения. Д ля этого крысу подв есить в штатив «мягко», запеленать, в шприц, соеди ненный с зондом, набрать теплую вод у (37 о С) из расчета 5% от массы тела. Держа крысу вертикал ьно вводят зонд в рот, и осторожно продвигают его в желудок до упора, после чего постепенно выдавливают из шпри ца воду. Затем одной крысе вводят петуитр ин из расчета 20 мл на 100 г. массы тела. После этого обеих крыс помещают в ворон ки и в течение 1 часа с обирают мочу. Петуит рин вводится внутримышечно. С этой целью корц н г ом берут за кожу головы и держат одной рукой одновре менно и корцан г , и хвост крысы, стар аясь, чтобы крыса касалась всеми 4 лапами поверхности стола и ее размеры с оответствовали физиологическим размерам. В торо й рукой произво дится инъекция в бедро (мышцы) при этом задняя лапка удерживается вместе с хвостом. Вывод : Бе з петуитрина: 1,2 мл, с петуитрином 0,7 мл, т.е. петуитрин способствует задержке воды в организме. Метод парентерального введения. Используется, когда введенные вещества долж ны как можно быстрее попасть в общий кров оток, и в том случае, когда объем вводимых препаратов превышает дозы, допу стимые для внутримышечного введения. При парентеральном способе введе ния объем может достигать 5 см 3 . Парентерально п редпочтительнее вводить масленые растворы лекарственных веществ. При парентеральном способе введения животное держат вниз головой, нельзя позв олять животному резко двигаться в согнутом положении. С этой целью животное корцангом фиксируют за голов у, а руками за хвост. С помощью анатомического пинцета или небольшого заж има Кохера оттягивают стенку брюшной полости, при этом органы брюшной по лости опускаются вниз, затем делаю прокол брюшной стенки, фиксирую 2 прок ола: 1 через кожу, 2 через мышечную стенку брюшины. После этого лекарст во вводиться в брюшную полость. Свидетел ьством пр а в иль ного введения лекарственного препарата в брюшную полость является отсутствие осложнений в области брюшной полости и активное состояние животного после инъекци и при условии введения не наркотических веществ. При одном проколе введе ние будет под кожные . Лабо раторное занятие № 4 Тема: Методы биологического тестирования. Цель: Озн акомиться с метод а ми биологического т естирования функциональной активности гипоталамо-гипофизарно-надпоч ечниковой системы. Оборудование: гипофиз крысы-рецип иента, гипоталамус крысы-реципиента, крыса-донор, реактивы, необходимые для приготовления экстракта гипофиза и гипоталамуса, корнцанг , зажим Кохе ра, шприц для внутри венного введения, ножницы, гепарин, пробирки для сбора кров и, штатив, торсионные весы, водная баня, те рмометр, эфир для наркоза. Ход р аботы Работа 1. Определение содержания кортикотропина в гипофизе. Перспективность метод а заключается в определении прироста объема 11-ОКС в плазме крови крыс-реципиентов. После введения им тестируемых экстрактов гипоф иза. Для определения содержания кортикотрпина предварительно строится колебательная кривая. Техника определения: гипофиз взвешивали на торзионных весах и помещали в бокс с безводным ацетоном на 10 суток. Затем гипофиз взвешивали и тщательно растирали в 100 млк ледяной уксусной ки слоты. Палочку ополаскивали таким же количеством уксусной кислоты. После этого чашечку помещали на водяную баню и выпаривали при t 70 о С в теч ение 30 минут. Полученный экстракт разводили в 2 мл бидистиллята и нейтрализировали 1 молярным NaHCO 3 , затем разбавляли до нужной массы раствором Кребса- Рингера, содержащим бикарбонат и глюкозу. При разведении гипофизарных экстрактов учитывали , что одной крысе-реципиенту надо ввести 100 мкг ацетонированного порошка. Биологическое тестирование с целью определения содерджания кортикотр опина в гипофизе предпочтительно проводить на крысах самцах. В сутки до опыта кры сам подкожно вводили преднизаон из расчета 6 мг на 100 г массы тела. Указанная доза кортикостероида по принципу обратной связ и блокирует гипофизарно-надпочечниковую систему крыс-реципиентов, пре кращая эндогенную секрецию кортикотропина . Через с утки у крыс определяется уровень 11-ОКС в плазм е крови. Необходимое количество гипофизарного экстракта вводили внутр ивенно и через 1 час повторно определяли уровень 11-ОКС после введения крысам-реципиентам тестируемых экстрактов гипофиза. Пользуясь кривой «логарифм доул-эффект» устанавливали содер жание кортикотропина в гипофизе опытной крысы в мед/ 100 мгм ткань. Лабо раторное занятие № 5 Тема: Биохимиче ские методы в физиологии . Занятие 1. Определение 11-ОКС в плазме крови. Цель: определить и з менение объема 11-ОК С в плазме крови после воздействия оперативного вмешательства физиологического эксперимента. Методика: 1 . У животного взять 1-1,5 мл крови (из хвостовой вены или б едренной вены); 2 . Кровь отцентрифугировать в течение 10 мин при 2000 об/мин; 3. Отделить плазму от форменных элементов и перенести ее в пробирку с притертой пробкой. Плазмы должно быть 1 мл или довести до этого количества бидистиллятом. 4. В пробирку добавить 6 мл гексана , встряхивать в течение 20 с. При этом у плазмы удаляетс я холестерин . Удалить отработанный гексан с помощью водоструйного насос а . 5. Добавить хлороформа 10 мл, встряхивать в т ечение 1 мин. При этом ко ртикостероиды растворяются в хлороформе. Оставшую ся фракцию плазмы удалить насосо м . 6. Экстракт промыть 0,1 М раствором NaOH , добавляя по 1 мл. Встряхи ваем 1 мин и удаляем водоструйным насосом. 7. 1 мл воды бидистиллируем, а дальше встряхиваем 1 мин и удаляем водоструйным насосо м. 8. После от обрать 8 мл экстракта и перенести в чистую сухую пробирку с притертой проб кой. 9. В экстракт добави ть 6 мл смеси абсолют ного с пир та (этилового) с H 2 SO 4 , котора я выдерживает пробу во Савамо. Соотношение с пирта и кислоты 1:3 (3 спир та и 1 кислоты). Встряхивают в течение 1 мин и оставляют на холоде в теплом ме с т е в течение часа. При этом в смеси кислоты со спиртом раств оряются кортикостероиды. После этого о пределяется объем 11-ОКС с помощью спектро фотометра «Квант». Оборудование: двойной набор проби рок с притертой пробкой, штативы, центрифужные пробирки, водоструйный насос, 3 ппипетки по 1 мл, 2 пипетки на 10 мл , 1 пипетка на 6 мл. Реактивы : бидистиллят, гексан , 0,1 раствор NaOH , хророформ, 100% этиловый спирт, H 2 SO 4 по Савамо (100%). Мето ды исследования эмоционального статуса у крыс 1. Тест от крытого поля Латен тный период выход а из центрального квадрата, число перес ече нных линий , вертикальных стоек, обследованных отверстий, умывани й , дефека ций . По пр одолжительности латентного периода выхода из центрального квадрата и числу пересеченных линий судили о двигательной активности, по количест ву вертикальных стоек и обследованных отверстий – об исследовательск ой деятельности, число умываний говорит об эмоциональном состоянии, а по количес тву дефекаций судили о тревожности. 2. Многоп араметрический метод определения тревожно-фобического статуса крыс Цель: оценить комплексную характеристику инд ивидуального тревожно-фобического уровня животного. Методика: исследование проводят в открытом поле при электри ческом освещении 3000 люкс в фиксированное время. Тест 1. Латентный период спуска с высоты. Д анный тест используется для оценки интенсивного оборонительного повед ения у крыс. Крысы помещаются на пенал из непрозрачного материала размером 20х14х 14 см и отмечается время спуска с пенала , когда кры са коснется всеми 4 лапами поля. Тест 2. Лат ентный период прохождения через отверстие. Крыса помещается в прозрачн ый пенал , р азделенный поперек на 2 отсека с отверстием 7х10 см в перегородке. Действие считается выполненным, когда крыса перелезает во 2 отсек двумя лапами. Пр и наличии колебаний при выполнении действия, заглядывания в отве рстие или начатый, но не завершенный перенос оценки на 0,5 балле. Тест 3. Время выхода из домика. Животное по мещается в домик из прозрачного плексигл аса 16х15х12 см и выход на 15 мин закрывается за слонкой. Отчет времени начинает с я с момента открытия выхода. В тестах 1-3 крысу из э кспериментальной обстановки возвращали не ранее, чем через 20 мин п осле выполнени я соответствующего действия или по истечению времени тестирования (180 с ) в случае невыполнения действия. Интервалы между тестами не менее 15 мин. Тест 4. Вых од из центра открытого поля. Этот тест позволяет выявить реакции страха , связанны е со снижением двигательной а к тивности. Тестирование начинали с помещения крысы в центр поля и с этого момента фиксировали время, за которое животное пос ещало 4 центральных кв а драта. По тестам 1-4 оценки вы с тавлялись в соответствии со шкалой : № теста Время выполнения, с оценки 1 0< t <30 30< t <60 60< t <180 не спуск за 180 0 1 2 3 2 0< t <30 30< t <60 60< t <180 не выход за 180 0 1 2 3 3 0< t <15 15< t <30 30< t <180 свыше 0 1 2 3 4 0< t <15 15< t <30 30< t <60 свыше 0 1 2 3 Тест 5. Пячение. Оценка функционирования р еакции пячения спонтанно и при резкой смене освещенности в обстановке о ткрытого поля. Через 180 с после момента пом ещения животного в п оле освещенности рез ко меняли: выключали яркий свет и включали простую лампу на 60 с, затем восс танавливали освещенность. За 300 с наблюде ния определяли измеренное расстояние в квадратах, на которое пятилось ж ивотное. Отсутствие изменений 0 баллов, на полквадрата – 1 б, до 2 квадрата – 2 б, более 2 квадратов – 3 б. Тест 6. Пячение-2. Попытка экспериментатор а взять животное на руки. Оценивается также. Тест 7. Реакция вокализации. Тест 8. Реа кция затаивания. Животное замирает в напряженной позе на выпрямленных л апах или, прижимаясь к полу, иногда с прижатыми ушами и закрытыми глазами. Тест 9. Прижатие ушей. Тесты 6-9 осуществляют путем постепенного приближения руки эксперимента тора со стороны морды так, чтобы крыса видела руку. Приближение руки к жив отному осуществляется 2-3 раза подряд. Оценка: 0 б. – реакция отсутствует 1 б. – р еакция при поглаживании 2 б. – реакция при приближении руки 3б. – ре акция сохраняется после удаления руки При наличии спонтанных реакций по теста м 7-9 за каждый добавляли по 3 баллам дополнительно. Далее высчитывали сумм арную оценку по всем тестам, по которой судили об общем уровне тревожнос ти (интегральный показатель тревожности ИПТ). Вывод по глюкозе: после построения калибровочной кривой (определяют кот орую по 10 стандартным размерам) было получено, что у экспериментального ж ивотного в крови содержалось 42 ммом (л глюкоза). Исследование физиологических механизмо в поведения животных – наиболее интенсивно развивающаяся область зна ний, которая в нашей стране традиционно именуется физиологией высшей не рвной деятельности. Интерес к этой науке в последние десятилетия сущест венно возрос прежде всего в связи с потребно стями технического моделир ования систем и процессов мозга, объединенных в понятие искусственного интеллекта. Естественно, что и сама наука о мозговых механизмах поведени я и психики обогатилась кибернетическими идеями, сформировались новые направления исследований – бионика, нейрокибернетика и др. ИСС ЛЕДОВАНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ОСНОВ ПОВЕДЕНИЯ Эво люция видов — это результат совершенствования адаптации к изменяющим ся условиям окружающей среды. Высшие орга низмы могут существовать только в относительно узком диапазоне физиче ских (температура, радиация, гравитация) и химических (запас метаболитов, электролитов и воды, состав атмосферы) факторов, которые определяются ге нетически детерминированными морфологическими и метаболическими сво йствами. Статичные формы адаптации дополняются постоянно изменяющимис я динамическими приспособлениями организма к окружающей среде. Это пов е дение, в самом широком смысле слова, основано на регуляции метаболичес кой активности в целом и на контроле за специфическими исполнительными системами в частности. Мышцы и железы – это самые важные исполнительные органы, которые обеспечивают почти все формы поведения высших организм ов. Организм оснащен разнообразными рецепторами, способными восприним ать свойства окружающей среды и трансформировать их в значимую информа цию. Поведение определяется окружающей средой и опосредуется централь ными механизмами, оценива ющими входящую информацию и формирующими наи более адекватные реакции. Основной целью поведения является обес печение выживания отдельной особи или вида. Поведенческие акты можно произвольно подразделять на аппетентные реакции, направленные на достижение необходимых внешних усл овий (например, запасание или принятие пищи, спаривание), и на реакции противоположно го знака, включающие бегство или избега ние вредных факторов (например, температу ра, радиация, механическое повреждение), факторы окружающей среды часто образуют непрерывность, определенный диапазон которой животное предпочита ет, тогда как другой диапазон избегает. Животное перемещается в многомер ном градиенте факторов окружающей среды для оптимизации общей суммы во спринимаемых воздействий (например, когда доступ к пище может быть получ ен только при неблагоприятных температурных диапазонах или при оптима льных или даже вредных механических воздействиях). Такая схе ма взаимоотношений между организмами и окружающей средой позволяет пр едположить существование гипотетическ их центральных состояний (например, драйвы, мотивация), которые запускаются и поддерживают специфические ф ормы поведения. Предполагается, что в организме имеется модель оп тимум а внутренних (и внешних) состояний и что любое поведе ние постоянно оцени вается в зависимости от уменьшения или уве личения расхождения между эт ой моделью и реальным состоянием. Значимые условия окружающей среды, к к оторым организм стремится, – это привле кающие стимулы, а те, которых избегают) – э то аверзивные стимулы. Модификация поведения и контроль за ним (оперантное обусловливание) путем предъявления привлекающих стимулов или устра нения аверзивных стимулов называются, соответственно, положительным или отрицательным подкреплением. Сочетание определенного поведения с аверзив-ными с тимулами называется наказанием и приводит к подавлению этого поведения. Наряду с ответом на вопрос, почему животное действует, столь же важно пон ять, как оно действует. Рефлекторная теория, предложенная Декартом в XVII в., оказала влияние на м ышление физиологов и психологов и по-прежнему остается важной отправ но й точкой современной нейрофизиологии. Основной поведенче ский реперту ар жестко заложен в определенных нервных сетях, которые связывают опред еленную реакцию (безусловную реакцию – БР) с определенным стимулом (без условный стимул – БС). Эти врожденные (не приобретенные при обучении) реакции дополняются приобретенными (условными) реакциями на первоначально нейтральные стимулы, кот орые при повторяющихся со четаниях с БР становятся условными стимулами (УС), т. е. сигналами пространственного и/или временного приближения БР (Па влов, 1927). Если врожденное поведение отражает генетически закодиро ванные реакц ии, приобретенные поколениями в процессе естественного отбора, то индив идуально приобретенное поведение связано с опытом, записанным в памяти организма. Последовательность внешних и/или внутренних событий, в котор ых участвует животное, может вызывать более или менее длительные измене ния в его нервной системе, лежащие в основе ответной реакции на ранее неэ ффективные стимулы. Соответствующий процесс, на зываемый обучением, ведет к нак оплению опыта в форме следов памяти (энграммы), извлечение которых влияе т на поведение животного. Навыки, которые более не соответствуют новым у словиям, угашаются, а навыки, которые длительное время вообще не использ овались, могут быть забыты. Взаимодействие между организмом и окружающей средой может быть различ ным, чему соответствуют определенные формы поведения. Если ответное поведение с остоит из реакций, выз ванных дискретными стимулами, например болевыми, пищей, то оперантное поведение может быть стимулировано внутренними по требностями и состоять в спонтанном проявлении различных реакций, кото рые, в конечном счете, влекут за собой .желаемое изменение окружающей сре ды (например, получение доступа к пище). Такие формы приобретенного поведения подчеркивают раз личия между классически м и инструментальным обусловливанием: в первом случае УС, как правило, вы зывает такую же реакцию, как и БС (слюновыделение, вызванное акустически м УС о предъ явлении пищи). Наличие или отсутствие условного ответа, выраб отанного по классическому типу, не влияет на вероятность применения БС. Инструментальные реакции обычно существенно отличаются от соответств ующих безусловных реакций, с помощью инструментальных реакций открыва ется доступ к привлекающим стимулам или, наоборот, животное избегает аве рзивных стимулов (например, нажатие на рычаг, подкрепляемое подачей пищи , избегание болевых стимулов прыжком). Как правило, инструментальное обу словливание влияет на двигательные реакции скелетных мышц, тогда как кл ассическое обусловливание ограничивается вегетативными функциями, вы полняемыми висцеральными мышцами и железами. Однако в этом правиле мног о исключений. В традиционной психологии «стимул-реакция» (например, как это предлагае т Скиннер ( Skinner , 1938)) повед енческий анализ состоит в установлении системы правил, связывающих усл овия входа (стимулы) с состояниями выхода (реакции). Таким образом, не учит ываются предполагаемые в нервных центрах процессы или гипотетические механизмы концептуального мозга. Хотя подход, в котором используется ги потеза «черного ящика», способствовал значительному вкладу в наше пони мание роли окружающей среды в управлении поведением, применение его лиш ь незначительно расширило сведения о внутренней структуре и функции эт ого «черного ящика», т. е. о мозге, как о преобразователе или опосредующем органе между входом и выходом. Последнее и является областью исследован ий специалистов – физиологов и психологов и сферой различных специаль ных дисциплин (нейрофизиологии, фармакологии, нейрохимии), которые вхо д ят в комплекс нейронаук. В нейрофизиологии достигнуты значи тельные усп ехи в области анализа простых безусловных рефлексов спинного мозга. Пон имание рефлекса растяжения или сгибания настолько детализировано, что можно точно проследить распространение афферентного потока импульсов от дорзальных корешков в спинном мозге вплоть до образования эфферентн ого залпа в вентральных корешках. Понятие условного рефлекса (УР), введен ное Павловым, позволяет применить тот же аналитический подход к классич еским условным рефлексам. Однако даже самые простые УР пока не дают возм ожность обнаружить решающее пластическое звено, ответственное за пере ключение потока УС на путь БР. Столь же не ясны и нейронные механизмы, учас твующие в оперантном обуславливании (инструментальных условных рефлек сах). Основными методами исследования нервных механизмов по ведения являют ся удаление, стимуляция, электрическая регистрация и химический анализ. Например: ( A ) Расположение нервных структур , отвечающих за опре деленное поведение, может быть у становлено путем максимального удаления участков мозга, при котором эт о поведение сохраняется, и/или путем минимального удаления, при котором оно исчезает. Той же цели может служить и функциональная блокада нервных центров. (Б) Нервный субстрат реакции можно проанализировать путем нахождения об ласти и оптимальных параметров электрической и химической ее стимуляц ии, вызывающих такую же реакцию. ( B ) Электрическая акт ивность, сопровождающая поведенческий акт, может отражать процессы, важ ные для его реализации. Электрофизиологические методы могут использов аться для выявления распространения афферентных импульсов в мозге, акт ивности, предшествующей возникновению внешней реакции, или для соотнес ения вероятности и/или величины поведенческой и электрической реакции. (Г) Активация и возможная модификация нервных цепей, вызванная обучением , может отражаться в локальных изменениях метаболизма медиаторов, нукле иновых кислот и белков. Нейрофизиологическое исследование направлено на учет ди намики повед ения и пространственно-временной организации активности головного моз га. Приобретение нового опыта, ведущего к образованию энграммы (обучение ), может осуществляться с участием нервных сетей, отличных от тех, которые участвуют в последующем воспроизведении зафиксированного опыта. Место накопления информации может быть точкой конвергенции отдель ных механ измов записи и считывания. Эффективность приобрете ния опыта и воспроиз ведения его зависит от таких факторов, как уровень бодрствования, мотива ции и эмоции. Все эти переменные должны учитываться при объяснении измен ений поведения, вы званных стимуляцией и разрушением, и объяснении соот ношения между поведенческими, электрическими или биохимическими сдвиг ами. Очень трудно отличить специфические механизмы, общие для целого кла сса реакций (например, аппетентные и аверзивные). Общее описание нервных структур, участвующих в различных формах поведе ния, – необходимое условие для подробного исследования клеточных и мол екулярных изменений, лежащих в основе пластических перестроек нервных сетей. Имеющиеся электрофизиологические, нейрохимические и морфологич еские микрометоды полностью отвечают такому требованию при условии их примене ния в соответствующее время и в существенно важных звеньях. Соз дание подходящей поведенческой модели, пригодной для эффективного при менения микрометодов, является предпосылкой дальнейших быстрых успехо в. А пока исследования концентрируются на функциональной организации н ервных сетей, участвую щих в различных процессах, таких, как обработка се нсорных сигналов, мотивация, образование следов памяти, местонахождени е энграммы и т. д. Планирование экспериментов Для планирования опытов необходимо знать принципы и тактику исследования, научного подхода, которые лучше всего формиру ются при непосредственном осуществлении опытов. Данная книга – практическое руководство к проведению опытов. При этом предполагает ся, что читатель знаком с основными принципами статистики. Вводные практ ические советы по проведению опытов по физиологии поведения можно найт и у Сидовски и Локарда ( Sidowski and Lockard , 1966) и Вейнера ( Wayner , 1971). Ниже приводится краткое описание, цель которого с ориентировать студентов на некоторые сложные проблемы, связанные с пла нирова нием опытов и их проведением. Преимущество лабораторного изучения перед натуралистиче ским наблюде нием заключается в том, что исследователь может контролировать условия опыта, т. е. устанавливать точный контроль за так называемыми независимыми переменными, чтобы выявить их влияние на зависимые переменные. Зависимыми переменными в физиологической психолог ии могут быть любые по веденческие или физиологические характеристики, тогда как независимые переменные – это условия, которые контролируютс я экспериментатором и иногда навязываются организму. Под условиями под разумевают прямое вмешательство (удаление отделов головного мозга, его стимул яция или применение различных препаратов), изменение окружающей среды (температуры и освещенности), изменение режима подкрепления, сложность зад ний п о обучению, длительность пищевой депривации или такие факторы, как возра ст, пол, генетическая линия и т. д. Чтобы свести до минимума неправильное толкование опытов, связанное со с ложностью отличить эффекты экспериментальных вмешательств от воздейс твий других переменных, необходимо ввести контрольные процедуры. Так, например, при тестировании эффективности опред еленной процедуры (независимая переменная) используется контрольная г руппа. В идеальном варианте контрольную группу исследуют так же, как и эк спериментальную, исключая воздействие изучаемого фактора, ради которо го и намечается сам эксперимент. Одно и то же животное можно использоват ь и в контроле, и в эксперименте, если, например, необходимо сравнить повед ение его до и после удаления отделов головного мозга. Другая обычная кон трольная процедура, цель которой состоит в уменьшении одновременного в лияния переменных факторов, – это сбалансированное применение разных влияний на одном и том же животном (например, инъекции различных препара тов или различных доз одного и того же препарата). Еще одним важным момент ом контроля является произвольное распределение животных по различным группам. Это лучше всего осуществлять с помощью таблицы случайных чисел , которая приводится во многих книгах по статистики (простой отлов живот ных из клетки для формирования группы не является адекваным, так как сам ые слабые или пассивные животные будут отловлены в первую очередь). Из-за возможных ошибок или вариабельности получаемых результатов, вызв анных неконтролируемыми переменными, измерения обычно повторяют и выя вляют среднюю или медианную велич ину. При повторных измерениях проводят мн ожественные наблюдения за теми же животными или же одно наблюдение за мн огими животными, или же и то и другое вместе. Чем больше вероятность ошибо к или колебаний, связанных с некоторыми неизвестными или неконтролируе мыми переменными, тем больше вероятность того, что повторные измерения б удут отличаться и, таким образом, вариабельность измерений относительн о средней величины будет выше. Статистич еский анализ обычно используется для оце нки степени достоверности наблюдаемых различий между экспериментальн ыми и контрольными группами или условиями опыта. Например, различие межд у двумя средними тради ционно считается значимым (т. е. не случайным), когд а вероятность того, что различие на самом деле является истинным, до стиг ается не менее чем в 95 случаях из 100. Научный анализ, основывающийся на натуралистических наблюдениях или н а лабораторных опытах, опирается на измерения, с помощью которых наблюде ниям придается количественный ха рактер. От так называемого уровня изме рения зависит, какие арифметические операции могут быть применены к чис лам, что, следовательно, и обусловливает использование соответствующих статистических методов. Исследователь должен учитывать уро вень измер ений и предвидеть природу статистической обработки результатов уже пр и планировании опытов, так как эти сообра жения помогут решить вопрос о т очности измерительных приборов и требуемом количестве опытов. Необходимо различать четыре общих уровня измерения или оценки: номинал ьный, ординарный, интервальный и соотноситель ный. Низшим уровнем являе тся номинальный, где такие символы, как буквы или цифры, используются просто для классификации объектов или явлений. В этом случае количество измерений, по падающих в различные классы в условиях эксперимента и кон троля, сравниваются с использованием би номиальной статистики. Если возможно упо рядочить наблюдения так, чтобы они находи лись в каких-то отношениях оди н к другому (например, «больше чем», «меньше чем» и т. д.), то будем иметь дело с ординарной шкалой. Если, кроме того, можно обнаружить интервалы между чи слами на такой шкале, то будем иметь дело с интервальной шкалой, которая имеет произвольную нулевую точку (как в случае температурной шк алы). Если же шкала имеет еще и истинную нулевую точку в начале, как, наприм ер, шкалы высоты, массы, то будет достигнут наивысший уровень измерения, т . е. соотносительная шкала. Параметры, измеряемые с помощью номикалькой или орд инарной шкалы, обрабатываются с применением непараметрической статистики (например, ч 2 -есты ( Connover , 1971; Siegel , 1956)), тогда как данные, измеряемые по интерва льной и соотносительной шкале, как правило, обрабатываются с помощью параметрических статистических методо в (например, t -тесты) (если различные предположения о параметра х популя ции, из которой взят пример, соответствуют данным). Параметры поп уляции, подвергаемые непараметрическим статистическим процедурам, не обязательно должны соответствовать определенным условиям, например н ормальному распределению. Поэтому эти процедуры широко используются в опытах по физиологической психологии, где измерения, как правило, провод ятся па ординарном уровне и объем выборки часто является небольшим. В пл ан проведения опытов, описанных в этой книге, включено сопоставление экс периментальных и контрольных данных. Для таких данных, полученных из нез ависимых событий, полезной непараметрической статистикой является U -гест Манна – Уитни. При ис пользовании другой схемы опытов животное служит контролем самого себя, как в случае сравнения поведения до и после введения препарата и при уда лении отделов головного мозга. Стандартной непараметрической оценкой для таких данных, полученных при наличии связанных событий, является кри терий для сопряженных пар знаковых ранг ов Вилкоксона ( Siegel , 1956). Кроме того, непараметрические методы испол ьзуются для анализа данных, полученных в повторных текстах, по результат ам которых и строят кривые обучения и кривые реактивности ( Krauth , 1980). В этой книге в качестве подопытных животных для большей части экспериме нтов используют крыс. Для подробного ознакомления с общими лабораторны ми процедурами, включая уход за животными и обращение с ними, в особеннос ти с крысами, читателям рекомендуем обратиться к работам Бейкера с сотру дниками ( Baker et al ., 1979), Ферриса ( Harris , 1957), Гудмана и Гилмана ( Goodman and Oilman , 1975), Лейн-Петтера с сотрудниками ( Lane - Petter et al ., 1967), Леонарда ( Leonard , 1968), Майерса ( Myers , 1971 а), Манна ( Munn , 1950) и Шорта и Вуднотта ( Short and Woodnott , 1969). В пов еденческих исследованиях чаще всего используют такие линии крыс, как ка пюшонные линии Лонг-Эванса; белые линии Спраг-Доули и Вистар. В целях полу чения и сопоставления результатов желательно применять стандартные ли нии. Однако степень универсальности результатов может зависеть от испо льзо вания нескольких линий (а также видов). Для проведения опытов на животных необходимо содержать их в чистоте, удо бстве и обезопасить от болезней. Этого можно достичь, руководствуясь под робно разработанными стандартами размещения, кормления, гигиены, посто перационного ухода (см. приведенные выше ссылки) и зная обычные заболева ния живот ных ( Myers , 1971 a ; Short and Woodnott , 1969). Большая часть поведенческих опытов вызывает дискомфорт у животных, нез ависимо от того, вызван ли он пищевой деприва-цией, использованием центр альной или периферической аверсив-ной стимуляции, введением препарато в или просто поднятием животного в воздух. Экспериментатор должен посто янно помнить об этом и стараться по возможности уменьшить дискомфорт по допытного животного. Ниже приводятся рекомендации для проведения опытов на животных, которы е составляют один из разделов «Принципов использования животных» в «Ру ководстве к дотациям и контрактам Национального института здравоохран ения США» от 1978 г.: «1. Опыты, в которых используются живые по звоночные и ткани живых организмов для проведения исследований, должны выполняться под контролем квалифицированных ученых-биологов, физиолог ов или медиков. 2. Размещение, уход и кормление всех экспе риментальных животных должны находиться под контролем квалифицирован ного ветеринара или другого ученого, компетентного в данных вопросах. 3. Исследование по своему характеру должн о дать полезные результаты на благо общества и не должно быть случайным и бесполезным. 4. Эксперимент должен опираться на знание исследуемой болезни или проблемы и планироваться так, чтобы ожидаемые р езультаты оправдывали его проведение. 5. Статистический анализ, математические модели или биологические системы in vitro должны использова ться, если они соответственно дополняют результаты опытов на животных и позволяют сократить число используемых животных. 6. Опыты должны проводиться так, чтобы не п одвергать животное ненужным страданиям и не наносить ему вреда. 7. Ученый, отвечающий за опыт, должен быть г отов прекратить его, если он/она считает, что продолжение опыта может выз вать ненужное увечье или страдание животных. 8. Если сам опыт вызывает больше дискомфо рта у животного, чем наркоз, то необходимо довести животное (путем примен ения наркоза) до состояния, когда оно не воспринимает боль, и поддерживат ь это состояние до тех пор, пока опыт или процедура не будут завершены. Иск лючение составляют только те случаи, когда наркоз может повредить цели о пыта, а данные нельзя получить никаким иным способом, кроме как проведен ием подобных опытов. Такие процедуры должны тщательно контролироватьс я руководством или другим квалифицированным старшим сотрудником. 9. Постэкспериментальный уход за животны м должен свести до минимума дискомфорт и последствия травмы, нанесенной животным в результате опыта, в соответствии с принятой практикой ветери нарной медицины. 10. Если необходимо умертвить эксперимент альное животное, то это дела ют так, чтобы достичь мгновенной гибели. Ни о дно животное не должно быть уничтожено до тех пор, пока не наступит его см ерть». Почти во всех случаях поведенческого и нейрологического тестирования, которые описаны в последующих главах, необходимо брать животных в руки. Животное нужно приучать к этой процедуре на протяжении нескольких дней перед началом опыта. Такое обращение предполагает доставание животног о рукой из клетки, помещение его на стол, осторожное поглаживание и перен есение с одного места на другое. Со временем животные перестают сопротив ляться таким процедурам, если их осуществлять бережно. Не держите животное за хвост и старайтесь не прихватить кожу и сильно не надавливать на животное. Лучше брать животное сзади под лопатки, подводя большой палец под одну переднюю конечность, а остальные пальцы – под вт орую конечность. Сила захвата животного должна соответствовать сте пен и его сопротивления. Если животное держать так, чтобы его передние конеч ности перекрещивались, то оно не сможет укусить. При частом взятии на руки лабораторные крысы становятся довольно ручны ми и ими легко управлять. Для введения препаратов желательно использова ть помощника, при этом вторую ру ку экспериментатор использует для вытя гивания задних конечностей животного. При достаточной практике внутри брюшинные инъекции можно производить самостоятельно, путем захвата за д них конечностей крысы и одновременного инъецирования ее другой рукой. Перед инъекцией полезно успокоить животное; для этого нужно захватить ж ивотное так, как это описано выше, и затем медленно раскачивать его впере д и назад по широкой дуге. Обычным методом маркировки крыс является нанесение на уши животного прорезей и ли отверстий, пока оно находится под наркозом. Уши животного тонкие и не о чень кровоточат. Предпочтительным является метод маркировки тела и хво ста каким-либо биологическим красителем, например желтой пикриновой ки слотой или красным карбофуксином. Такая бинарная система позволяет осу ществить индивидуальное кодирование 63 крыс. (Если исполь зуете нескольк о крыс, то кодируйте их только четными числами, так как это уменьшает числ о необходимых отверстий или меток.) АПП АРАТУРА И МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ Успе хи современной физиологии в изучении функций целостного организма, его систем, органов, тканей и клеток во многом обусловлены широким внедрение м в практику физиологического эксперимента электронной техники, анали зирующих устройств и электрон ных вычислительных машин, а также биохими ческих и фармакологических методов исследования. В последние годы в физ иологии качественные методы дополняют количественными, что позволяет определять изучаемые параметры различных функций в соответствующих ед иницах измерения. Совместно с физиологами в разработке новых методичес ких подходов участвуют физики, математики, инже неры и другие специалис ты. Быстрое совершенствование электронной техники открыло новые пути для познания многих физиологических процессов, что ранее было принципиаль но невозможно. Создание разнообразных систем датчиков, преобразующих неэлектрически е процессы в электрические, совершенствование измеритель ной и регистр ирующей аппаратуры позволили разработать новые, высокоточные методы о бъективной регистрации (например, биотеле метрия) физиологических функ ций, что в значительной мере расширило возможности эксперимента. СХЕМ А СВЯЗЕЙ МЕЖДУ ПРИБОРАМИ И ОБЪЕКТАМИ ИССЛЕДОВАНИЯ Пр и исследовании физиологических функций с использованием различной аппаратуры в эксперименте и клинике форм ируют своеобразные системы. Их можно разделить на две группы: 1) системы дл я регистрации различных проявлений жизнедеятельности и анализа п олученных данных и 2) системы для воздейс твия на организм или его структурно-функц иональные единицы. Дл я того, чтобы наглядно представить взаимодействия отдельных элементов системы, необходимо рассмотреть их в виде блок-схем. Такие блок-схемы и их символы удобно использовать студентам для иллюстрации протоколов эксп ериментов во время практических занятий. По нашему мнению, подобная форм а изображения хотя бы части условий эксперимента значительно сократит его описание и будет способствовать пониманию схем устройств и приборо в. Блок- схемы, отражающие основные формы взаимодействия между объектом исслед ования и различными устройствами для регистрации функций. Многие функции организма можно исследовать без электронной аппаратуры и регистрировать процессы либо непосредственно, ли бо после некоторых преобразований . Примерами могут служить измерение ртутным те рмометром температуры, регистрация сердечных сокращений с помощью пиш ущего рычажка и кимографа, регистрация дыхания с использованием капсул ы Марэ, пле тизмография с применением водяного плетизмографа, определение пульса и т. д. Реальные схемы установок для плетизмографии, регистрации моторик и желудка и записи дыхания приведены на рис. Блок-схема системы, позволяющей регистрировать биоэлектрические проце ссы в организме, показана на рис. \, В. Она состоит из объекта исследования, отводящи х электродов, усилителя, регистратора и блока питания. Регистрирующие си стемы такого рода используют для электрокардиографии, электроэнцефало графии, электрогастрографии, электромиографии и др. При и сследовании и регистрации с помощью эле ктронной аппаратуры целого ряда неэлектр ических процессов необходимо их предварительно преобразовать в электр ические сигналы. Для этого используют различные датчики. Одни датчики са ми способны генерировать электрические с игналы и не нуждаются в питании от источника тока, другим это питание нео бходимо. Величина сигналов датчика обычно невелика, поэтому для регистр ации их необходимо предварительно усиливать. Системы с применением дат чиков используют для баллистокардиографии, плетизмографии, сфигмограф ии, регистрации двигательной активности, кровяного давления, дыхания, оп ределения газов в крови и выды хаемом воздухе и т. д. Если системы дополнить и согласовать с работой радиопередатчика , то становится возможным передавать и регистри ровать физиологические фу нкции на значительном расстоянии от объекта исследования. Этот метод по лучил название биотелеметрии. Развитие биотелеметрии определяется внедрение м микроминиатюри зации в радиотехнику. Она позволяет исследовать физио логические функции не только в лабораторных условиях, но и в условиях св ободного поведения, во время трудовой и спортивной деятельности, незави симо от расстояния между объектом исследования и исследователем. Системы, предназначенные для воздействия на организм или его структурн о-функциональные единицы, оказывают различные влияния: пусковые, стимул ирующие и тормозящие. Методы и варианты воздействия могут быть самыми р азнообразными . При исследовании дистантных анализатор ов стимулирующий импульс может восприним аться на расстоянии, в этих случаях стимулирующие электроды не нужны. Та к, например, можно воздействовать светом на зрительный анализатор, звуко м - на слуховой и различными запахами - на обонятельный. В фи зиологических экспериментах в качестве раздражителя часто используют электрический ток, в связи с чем широкое распространение получили электронные импульсные стимуляторы и стимулирующие э лектроды . Электрическую стимуляцию приме няют для раздражения рецепторов, клеток, мышц, нервных волокон, нервов, не рвных центров и т. д. При необходимости может быть применена биотелеметр ическая стимуляция (рис. 4, В). Причем воздей ствия на организм могут быть как локал ьными, так и общими Исс ледования физиологическихфункций проводят не только в состоянии покоя , но и при различныхфизических нагрузках . Последние могут создаваться либо. выполне нием определенных упражнений (приседания, бег и т. д.), либо с помощью разли чных устройств (велоэргометр, бегущая дорожка и др.), дающих возможность т очно дозировать нагрузку. Регис трирующие и стимулирующие системы часто используют одновременно, что з начительно расширяет возможности физиологических экспериментов. Эти системы можно комбинировать в различных в ариантах. ЭЛЕ КТРОДЫ В физ иологических исследованиях электроды являются связующим звеном между объектом исследования и приборами. Они применяются для нанесения разряжения или регистрации (отведения) биоэлектрической активности клеток, тканей и ор ганов, поэтому их принято подразделять на стимулирующие . Один и тот же электрод может быть использова н и как стимулирую щий, и как отводящий, так как принципиальной разницы ме жду ними нет. В зависимости от способа регистрации или раздражения различают биполя рные и уни полярные электроды. При биполярном способе чаще используют два одинако вых электрода, при униполярном – электроды различаются и по функционал ьному назначению, и по конструкции. В этом случае активный (дифферентный) электрод располагают в зоне отведения биопотенциалов или на участке тк ани, который нужно стимулировать. Активный электрод, как правило, имеет относительно небольшие размеры по сравнению с другим пассивным (индифферентным) электродом. Индифферентн ый электрод обычно фиксируют на некотором удалении от активного. При это м необходимо, чтобы зона фиксации индифферентного электрода либо не име ла собственного потенциала (например, умерщвленный участок ткани, жидка я электропроводная среда, окружающая объект исследования), либо этот уча сток должен быть выбран с более низким и относительно стабильным потенц иалом (например, мочка уха). Индифферентные электроды часто представляют собой пластины из серебра, олова, свинца или другого металла. В зависимости от расположения электроды делятся на поверхностные и погружные . Пов ерхностные электроды фиксируют или на поверхности объекта исследовани я (например, при регистрации ЭКГ, ЭЭГ), или на отпрепарированных и обнаженн ых структурах (при стимуляции нерва, отведении вызванных потенциалов от поверхности коры головного мозга и т. п.). Погружные электроды используют для исследования объектов, расположенн ых в глубине органов или тканей (например, при стимуляции нейронов, распо ложенных в подкорковых структурах головного мозга, или отведении от них биоэлектрической активности). Эти электроды имеют особую конструкцию, к оторая должна обеспечить хороший контакт с объектом исследования и над ежную изоляцию остальной токопроводящей части электрода от окружающих тканей. Все электроды независимо от типа и способа их использования не д олжны оказывать вредного влияния на объект исследования. Недоп устимо, чтобы сами электроды становились источником потенциалов. Следовательно, электроды не должны име ть поляриза ционных потенциалов, которые в ряде случаев могут значитель но искажать результаты исследований. Величина поляризационного потенц иала зависит от материала, из которого изготовлен электрод, а также свой ств и параметров электрического тока. Меньшую способность к поляризации имеют электроды из благо родных мета ллов: золота, серебра и платины. Поляризация практически не возникает, ес ли через электроды течет переменный или импульсны й электрический ток с изменяющейся полярн остью импульсов. Возможность поляризации электрода увеличивается при его взаимодействии с постоянным или импульсным монофазным током. Вероя тность поляризации тем больше, чем больше сила тока, протекающего через электрод, и длительное время его действия. Она связана с электрохимическ ими процессами, происходящими между материалом электрода и окружающей его электролитической средой. В результате этого электроды приобретаю т определенный заряд, противоположный по знаку стимулирующему или отво димому току, что приводит к неконтролируемому положению условий экспер имен та. Поэтому при воздействии на объект постоянным током и при отведе нии постоянных или медленно изменяющихся потенциалов используют неполяризующиеся электроды. В электрофизических экспериментах наиболее часто используют неполяри зующиеся электроды следующих типов: серебро - хлористое серебро, платина - хлористая платина и цинк - сернокислый цинк. Серебряные электроды при соприкосновении с тканевой жид костью, содержащ ей хлориды, быстро покрываются слоем хлористого серебра и после этого по ляризуются с трудом. Однако для точных экспериментальных исследований серебряные электроды покрывают слоем хлористого серебра до их использ ования в эксперименте. Для этого серебряный электрод зачищают мелкой на ждачной бумагой, тщательно обезжиривают, промывают дистиллированной в одой и погружают в сосуд с 0,9% раствором NaCl или 0,1 н. НС1, в котором уже имеется угольный электрод. К серебряному электроду подключают анод (+), а к угольному -катод (-) любого и сточника постоянного тока (батареи, аккумулятора, выпрямителя и т. п.) напр яжением 2 - 6 В. Через электроды пропуска ют ток плотностью от 0,1 до Ю А/м 2 до тех пор, пок а электрод не покроется сплошным слоем хлористого серебра. Эту операцию рекомендуется проводить в темноте. Готовые хлорированные электроды хр анят в растворе Рингера в темноте. Неполяризующиеся платиновые электроды можно изготовить следующим образом. Плати новую проволоку промывают дистиллированной водой и опускают на нескол ько минут в концентрированную серную кислоту, а затем тщательно промыва ют в дистиллирован ной воде, после чего два платиновых электрода опуска ют в сосуд с раствором хлористой платины. Один электрод подключают к ано ду, другой – к катоду источника постоянного тока с напряжением в 2 В. С помощью переключателя через них пропускают ток то в одном, то в другом н аправлении (4-6 раз по 15 с). Электрод, который будет использован в исследован иях, в последней операции по пропусканию тока должен быть соединен с ано дом источника тока. Готовый электрод необходимо промыть и хранить в дист иллированной воде. Неполяризующиеся электроды типа цинк – серно-кислый цинк представляют собой сте клянные трубки, заполненные раствором серно-кислого цинка 2, в который помещен ама льгамированный цинковый стержень 3. Амальгамирование цинка получается путем его погружения на несколько минут сначала в 10% раствор серной кислоты, а затем - в ртуть. Нижний конец стеклянной трубки закрывают каолином 4, замешенным на раство ре Рингера. Наружной части каолиновой пробки придают форму, удобную для контакта с объектом. Иногда пробку делают из гипса и вставляют в нее ватн ый фитиль или мягкую волосяную кисточку 5. Ионы цинка имеют большую диффу зионную способность, поэтому эти электроды хранятся не более 1 сут. Электро ды для стимуляции и отведения применяются и в остром, и в хроническом экс периментах. В последнем случае за несколько дней до эксперимента их импл антируют (вживляют) в ткани объекта исследования. Это – вживленные электроды. ДАТ ЧИКИ Датчики - э то устройства, преобразующие различные физические величины в электрич еский сигнал. Различают генераторные и пара метрические датчики. Генераторные датчики под тем или иным воздействием сами генерируют элект рическое напряжение или ток. К ним можно от нести следующие типы датчико в: пьезоэлектрические, термоэлектрические, индукционные и фотоэлектри ческие. Параметрические датчики под действием измеряемой функции изменяют какой-либ о параметр электронной схемы и модулируют (по амплитуде или частоте) эле ктрический сигнал этой схемы. Основные типы параметрических датчиков с ледующие: омические, емкостные и индуктивные. Следует отметить, что такое деление датчиков условно, так как на основе т ермоэлектрического и фотоэлектрического эффектов созданы как генерат орные, так и параметрические датчики. Например, фотодиоды и термопары сл ужат для создания генераторных датчиков, а фото- и терморезисторы - парам етрических. Внедрение различных типов датчиков в физиологические и клинические ис следования позволяет получать объективную информацию о многих функция х организма, например о сокращении мышц, смещении центра тяжести тела пр и перераспределении крови, давлении крови, кровенаполнении сосудов, сте пени насыщения кро в и кислородом и углекислым газом, о тонах и шумах сердц а, температуре тела и многих других. Пьезоэлектрические датчики. Создание этого типа датчиков основано на пьезоэлект рическом эффекте, который выражается в следующем: некоторые кристаллич еские диэлектрики (кварц, сегне това соль, титанат бария) под действием механической деформации способны поляризоваться и генерировать электрический ток. Пьезоэлектрический датчик состоит из кристалла, на который путем напыл ения нанесены металлические контакты для отведения генерируемого датч иком электрического потенциала. При деформации пьезоэлектрического да тчика с помощью механической системы можно регистрировать различного рода смещения, ускорения и вибрацию (например, пул ьс), а пьезоэлектрические микрофоны могут быть испол ьзованы для регистрации фоноэлектрокар диограммы . Пьезо электрические датчики имеют некоторую емкость (100-2000 пф), поэтому они могут искажать сигналы с частотой ниже нескольких герц. Они практически безын ерционны, что позволяет их использовать для исследования быстроменяющ ихся процессов. Термоэлектрические датчики. Этот тип датчиков преобразует изменения температур ы в электрический ток (термопара) или изменяет под влиянием температуры силу тока в электрической цепи (терморезисторы). Термоэлектрические датчики широко исполь зуют для измерения температур и определения различных параметров газо вой среды – скорости потока, процентного содержания газов и т. д. Термопара состоит из двух разнородных проводников, соединенных друг с другом. Для ее изготовления применяют различные материалы: платину, медь, железо, во льфрам, иридий, константен, хромель, копель и _др. В термопаре, состоящей из меди и константана, при разности температур ее соединений в 100°С возникае т электродвижущая сила, равная примерно 4 мВ. Терморезисторы – это полупроводниковые резисторы, способные уменьша ть свое сопротивление по мере повышения температуры. Существуют резист оры, сопротивление которых с повышением температу ры увеличивается, их называют позисторами. Терморезисторы выпускают в самом разнообразном кон структивном оформлении. Терморезисторы следует включать в цепи измери тельного моста постоянного тока . Их широко используют для создания электротермом етров. Фотоэлектрические датчики, или фотоэлем енты. Этот тип датчиков представляет собо й устройства, которые изменяют свои параметры под действием света. Разли чают три типа фотоэлементов: 1)с внешним фотоэффектом, 2) с запирающим слое м (фотодиоды), 3) с внутренним фотоэффектом (фоторезисторы). Фотоэлементы с внешним фотоэффектом представляют собой вакуумные или наполне нные газом баллоны . В баллоне расположе ны два электрода: катод, покрытый слоем металла (цезий, сурьма), способного под действием света испускать э лектроны (внешний фотоэффект), и анод. Фотоэлементы этого типа требуют до полнительного пита ния для создания внутри элемента электрического по ля; их включают в сеть постоянного тока. Под действием света катод испуск ает электроны, которые устремляются к аноду. Возникающий таким путем ток служит показателем интенсивности светового потока. Газонаполненные ф отоэлементы более чувствительны, так как фототек в них усиливается за сч ет ионизации электронами наполняющего газа. Однако по сравне нию с ваку умными фотоэлементами они более инерционны. Фотоэлементы с запирающим слоем используют в ряде медицинских приборов (например , в пульсотахометрах, оксигемометрах и др.). Фотоэлемент этого типа предст авляет собой железную или стальную пластинку 1, на которую нанесен сл ой полупроводника 2. Поверхность полупроводникового слоя покрыта тонко й металлической пленкой 4. Одним из электродов является пластинка, другим – ме таллическая пленка на полупроводнике 5. Для надежности кон такта пленка по периметру уплотнена более толстым слоем металла 3. При изготовлении фот одиода запирающий слой формируется или между полупроводником и пласти ной, или между полупроводником и пленкой. При осв ещении фотодиода кванты света выбивают из полупроводника электроны, ко торые проходят через запирающий слой и заряжают отрицательно один элек трод; сам полупроводник и другой электрод приоб ретают положительный заряд. Следовательно, фотодиод при его освещении становится генератором электрической энергии, велич ина которой зависит от интенсивности светового потока. Фототек у фотоди одов можно значительно увеличить, если к электродам фотодиода приложит ь напряжение от внешнего источника постоянного тока. Фото резисторы обладают свойством менять свое активное сопро тивление под влиянием светового потока. Они имеют высоку ю чувствительность в широком диапазоне излучения от инфракрасного до р ентгеновского. Их чувствительность зависит от величины напряжения изм ерительной схемы. Фоторезисторы включают в цепь измерительного моста, к оторый питается от источника постоянного тока. Изменение сопротивле ния фоторезистора под действием света нарушает балансировку моста, что приводит к изменению величины тока, текущего через измерительную диаго наль моста. Фотодиоды менее чувствительны, чем фоторезисторы, но и менее инерционны . Внешний вид датчика с фотоэлементом, используемого для пульсотахометр ии. Индукционные датчики. Этот тип датчиков применяют для измерения скорости л инейных и угловых перемещений, например вибрации. Электродвижущая сила в индукционных датчиках возни кает пропорционально скорости перемеще ния проводника в магнитном поле перпендикулярно направлению магнитных силовых линий или при перемещении магнитного поля относительно провод ника. Омические датчики. Эти датчики способны изменять свое сопротивление пр и линейных и угловых перемещениях, а также при деформации и вибрации. Существуют различные типы омических датчиков . В реостатных и потенииометрических омических датчиках изменение их сопротивления дост игается за счет перемещения подвижного контакта, который имеет механич ескую связь с объектом преоб разуемого перемещения. Чувствительность э тих датчиков сравнительно невелика и составляет 3-5 В/мм. Точность преобра зования может быть довольно высокой (до 0,5%) и зависит от стабильности питающего напря жения, точности изготовления сопротивления датчика, его атурной стабильности и других факторов. Эти датчики имеют простую конструкцию, малые габариты и массу, могут быть включены в цепь постоянного и переменного токов. Одна ко наличие подвижного контакта ограничивает срок службы этих датчиков. В проволочных омических датчиках (тензодатчиках) по движный акт отсутствует (рис. 8, Г). Под влиянием внешних сил эти датчики меняют свое сопротивление за счет изменения длины, сечения и удельного сопротивлен ия металлической проволоки. Точность преобразования составляет 1 - 2%. Тенз одатчики имеют малые габариты, массу инерциальность и удобны для исслед ования малых перемещений. Кроме о бычных проволочных датчиков в последние годы нахо дят широкое применен ие полупроводниковые датчики (например, гедисторы), у которых тензочувствитель ность в 100 раз выше, чем у проволочных. Емкостные датчики. Принцип действия этих датчиков основан на том что пр еобразуемые физиологические показатели (давление, изменение объема ор гана) влияют на определенные параметры датчика (диэлектрическую прониц аемость, площадь обкладок, расстояние между обкладками) и тем самым изме няют его емкость. Эти датчики имеют высокую чувствительность и малоинер ционных Использование дифференциальных емкостных датчиков позволяет повышать их чувствительность и помехоустойчивость. Этот тип датчиков н ашел широкое применение в электрофизиологической и диагностической ап паратуре. Они используются, например, в измерителях кровяного давления, плетизмографах, сфигмографах и других приборах, которые предназначены для преобразования неэлектрических величин, отражающих физиологическ ие функции, в пропорциональные электрические величины. Реальная констр укция емкостного датчика приведена на рис. 2, Г и 7, Г, а на рис. 81 показана схем а установки для регистрации моторики желудка с помощью емкостного датч ика. Индуктивные датчики. Преобразующее действие этих датчиков основано на св ойстве катушки индуктивности изменять свое сопро тивление. Этого можно достигнуть при введении в нее ферромагнитного сердечника или при измен ении величины зазора в магнитном сердечнике, на котором находится катуш ка. Для преобразования сравнительно больших перемещений (более 5-10мм) используют индуктивные датчики с подвижным серд ечником . Та кой тип датчика использован в некоторых конструкциях баллистокардиогр афов. Для преобразования малых перемещений (менее 5мм) могут использоват ься датчики с изменяющимся зазором магнитопровода . Индуктивные датчики могут быть выполнены в виде трансформатора или дифференциального тран сформатора с двумя встречными обмотками. В последнем случае выходной си гнал будет более мощным. Индуктивные датчики высокочувствительны. Их инерционность зависит от Динамических сво йств подвижных элементов датчика . ИЗМ ЕРИТЕЛЬНЫЕ СХЕМЫ Любой тип датчика, преобразующего ту или иную функцию в электрический сигнал, должен быть включен в измерительную цепь. Наиболее широкое распростран ение получили следующие измерительные схемы: мостовая схема с пита нием постоянным или переменным током, ди фференциальная схема , а также колебательный контур , в которые включаются измерительные (регистрирующие) приборы. Чувствите льность дифференциальных измерительных схем выше, чем мостовых. Таким образом, электрические приборы, применяемые для измерения неэлек трических величин различных функций, состоят из датчика, измерительной схемы и измерителя, или регистратора. Часто выходной сигнал датчика, име я малую величину, не может быть зарегистрирован измерительной схемой, по этому в нее вводят усили тели постоянного или переменного тока. Преобразование неэлектрических процессов в электрические представля ет широкие возможности для их регистрации. Это объясняется не только чис то техническими преимуществами, но и точностью измерения регистрируем ых величин, удобством сопоставления данных различных опытов и возможно стью их обработки с помощью вычислительных машин. Важно, что этот метод п озволяет в одних и тех же временных координатах вести синхронную запись электриче ских и неэлектрических процессов, сопоставлять их, выявлять с уществующие между ними причинно-следственные отношения и т. д., т. е. дает н овые возможности изучения физиологических процессов. УСИЛИТЕЛИ Элект рическая активность биологических объектов и электриче-параметры мног их датчиков, преобразующих неэлектрические процессы в электрические, х арактеризуются относительно малыми величинами: сила тока – милли- и мик роамперами, напряжение – милли-микровольтами. Поэтому регистрировать их без предварительного усиления чрезвычайно трудно или вообще невозм ожно. Для усиления электрических сигналов малой величины используют усилители. Они необходимы для многих измерительных схем и конструируются с исполь зованием электронных ламп или полупроводниковых приборов. Кратк о рассмотрим принцип работы триода и усилителя, сконструированного на о снове этой лампы . Если в цепь накала триод а (А) включить источник питания, то катод на гревается и испускает электроны, т. е. возникает электронная эмиссия катода (Б). При дополнительном включении источника постоянног о тока между анодом и катодом электроны, испускаемые разогретым катодом , перемещаются к аноду, что вызывает появл ение тока определенной силы (В). Силой этого тока мо жно управлять, прикладывая напряжение к сетке триода. Если к сетке триод а прикладывается положительный потенциал, то поток электронов от катод а к аноду и ток, проходящий через лампу (ано дный ток), увеличиваются (Г), при отрицательном потенциале на сетке поток электро нов и ток уменьшаются (Ц). Чтобы зафиксировать изменения тока, проходящего через триод, и преобраз овать его в изменяющееся напряжение, в анодную цепь включают сопротивле ние R a ( E ), величина которого су щественно влияет на свойства усилительного каскада. Допустим, что на вхо д усилителя подается переменное напряжение V BX , равное 1 В. Оно вызывает изменение анодного тока на 0,001 А; причем сопротивление анодной цепи соста вляет 10 кОм, тогда перепад напряжений на этом сопротивлении будет равен 10 В. При увеличении одного сопротивления до 100 кОм и прочих равных условиях перепад напряжений составит 100В. Следовательно, в первом случае входное н апряжение усиливается в 10, а во втором – в 100 раз, т.е. коэффициент усиления с оответственно будет равен 10 и 100. В тех случаях, когда один усилительный каскад не дает нужного усиления, и спользуют усилители с несколькими каска дами. Связь между каскадами в усилителях п еременного тока осуществляется через ра зделительные конденсаторы C 1 и С 2 , с помощью которых пер еменная составляющая анодного напряжения от предшествующего каскада п ередается на вход следующего. В усилителях постоянного тока разделител ьных конденсаторов нет. Коэффициент усиления всего усилителя зависит о т коэффициента усиления отдельных каскадов, их количества и определяет ся произведением коэффициентов усиления всех каскадов усилителя. Усилители выполняют роль промежуточного звена между объектом исследов ания (а также электродами, датчиками) и регистратора ми, т. е. представляют собой канал связи. Они не должны искажать характер исследуемого процес са. Поэтому, прежде чем обращаться к техническим характеристикам усилит еля, необходимо знать электри ческие свойства сигнала (биопотенциала) ж ивого объекта или датчика, а также учитывать внутреннее сопротивление и сточника сигнала Достаточно полную характеристику сигнала дает формула, опр деляющая об ъем сигнала: V = TFH , где V – объем с игнала (биопотенциала), Т – его длительность, F – ширина част отного спектра сигнала Н – превышение амплитуды сигнала над шумом. Канал связи также можно охарактеризовать тремя величинами: Т к – время, в течение к оторого канал выполняет свои функции, F K – полоса частот, которую кана л способен пропустить, и Н к – полоса уровней, зависящая от допустимых пределов на грузок, т. е. минимальная чувствительность и предельная амплитуда сигнал а, подаваемого на вход усилителя Произведение этих величин называют емкостью канала: V K = Г к • F K • Я к Передача сигнала по каналу связи (через усилитель) возможна лишь в том сл учае, когда основные характеристики сигнала не выхо дят за соответствую щие границы характеристик канала связи. Если же параметры сигнала превы шают характеристики канала связи, то передача сигнала по этому каналу бе з потери информации невозможна. Некоторые влияния усилителя на амплитудно-временные харак теристики с игнала иллюстрирует рис. 12. Верхний и нижний потенциалы на каждом рисунке регистриро вались одновр еменно от одного электрода с помощью двух одинаковых усилителей, у котор ых были заданы разные постоянные времени входа. Параметры вызванных пот енциалов и характеристики усили телей представлены в виде таблицы, геом етрические эквиваленты этих же потенциалов - на рис. 13. Несмо тря на то, что в каждом кадре регистрировался один и тот же потенциал, ампл итудно-временные характеристики полученных записей заметно отличаютс я друг от друга, что определяется только параметрами усилителей. Усилите ль, с помощью которого регистри ровались нижние записи, имел параметры, п ревышающие характе ристики сигнала, поэтому вызванные потенциалы запи саны без искажений. Усилитель, с помощью которого регистрировались верх ние записи, имел разные параметры, но во всех случаях не превышающие хара ктеристики сигнала, поэтому вызванные потенциалы искажены (потеря инфо рмации). Значение внутреннего сопротивления источника сигнала, завися щего не т олько от свойств объекта исследования, но и от свойств выходных цепей (на пример, размеров, формы и сопротивления электродов, коммутирующих прово дов и Т. п.), можно показать на следующем прим ере. Если внутреннее сопротивление источника сигнала больше или равно в ходному сопротивлению усилителя, то сигнал вообще не будет регистриров аться или его амплитуда будет значительно уменьшена. Поэтому иногда воз никает необходимость значительно увеличить входное сопротивление уси лителя. В этих случаях используют усилители с катодным повторителем, а в транзисторных схемах – с эмиттерным повторителем, выполненным на поле вых транзисторах. В физиологических лабораториях наиболее часто применяют два типа усил ителей: усилители переменного тока и усилители постоян ного тока. Усилители переменного тока. Усилители этого типа состоят из нескольких усилител ьных каскадов, соединенных между собой с помощью разделительных конден саторов. Такие приборы используют для усиления переменных составляющи х сигнала благодаря их способности пропускать частоты от 0,1 Гц до 10-15 кГц. Он и, как правило, имеют большой коэффициент усиления и могут усиливать вхо дной сигнал в миллионы раз, что позволяет отчетливо регистри ровать сиг налы с исходной амплитудой в несколько микровольт. Усиление и полоса про пускания частот обычно регулируются. В качестве примеров усилителей от ечественного производства можно назвать УБП-1-03, УБФ-4-03. Эти устройства при меняют для усиления биопотенциалов мозга и сердца, а также сигналов, ген ерируемых различными датчиками; по выходным характеристикам они легко согласуются с большинством отечественных регистраторов. Уси лители постоянного тока. Эти усилители не имеют разделительных конденсаторов. Между отдельными каскадами у них с уществует гальваническая связь, поэтому нижняя граница пропускаемых ч астот доходит до нуля. Следовательно, данный тип усилителей может усилив ать сколь угодно медленные колебания. По сравнению с усилителями переменного тока эти усилители имеют з начительно меньший коэффициент усиления. Например, УБП-1-0,2 имеет коэффици ент усиления по переменному току 2,5-1 0 6 , а по постоянному - 8 · 10 3 . jto связано с тем, что у усилителя постоянного тока с уве личением коэффициента усиления уменьшается стабильность работы, появл яется дрейф нуля. Поэтому они применяются для усиления сигналов, в еличина которых п ревышает 1 мВ (например, мембранный потенциал нейронов, мышечных и нервны х волокон и т. п.). РЕГИС ТРИРУЮЩИЕ ПРИБОРЫ (РЕГИСТРАТОРЫ) ОБЩЕГО НАЗНАЧЕНИЯ Реги страторы необходимы для трансформации электрических потенциалов, кото рые поступают к ним от отводящих электродов или датчиков (чаще после нео бходимого усиления), в процессы, воспринимаемые нашими органами чувств. Регистраторы могут преобразовывать и отображать исследуемый процесс и ли функцию в различных формах, например, в отклонении стрелки измеритель ного прибора, цифровой индикации, отклонении луча на экране осциллограф а, графической регистрации на бумаге, фотографической или магнитной лен те, а также в виде световых или звуковых сигналов и пр. В большинстве типов регистраторов основными элементами являются: прео бразователь энергии колебаний электрических потен циалов в механичес кие (гальванометр, вибратор), инструмент записи (перо с чернилами, струя че рнил, пишущий стержень, электронный луч и др.) и механизм развертки процес са во времени (лентопротяж ный механизм, электронная развертка). Кроме то го, современные регистраторы могут содержать ряд вспомогательных блок ов и систем, например коммутаторы, усилители, калибраторы усиления и вре мени, оптические системы для фотографирования и др. В медицинской регистрирующей аппаратуре наиболее широко используются три вида преобразователей, создаваемых на основе трех различных принци пов трансформации энергии колебаний элект рических потенциалов. 1. Использование силы, действующей на проводник с током или ферромагнети к в магнитном поле. На основе этого принципа конструируют различные сист емы гальванометров, вибраторов, которые применяются в шлейфных и чернил ьно-пишущих осциллографах (регистраторах). 2. Использование отклонения потока электронов (электронного луча) в элек трическом и электромагнитном поле. Этот принцип реализуют с помощью эле ктронно-лучевых трубок, которые являются основной частью электронных (к атодных) осциллографов. 3. Использование свойства ферромагнитных материалов намагничиваться п од влиянием магнитного поля и сохранять это состояние. На этом при нципе конструируют различные типы магнитофонов и магнитографов. Гал ьванометры и вибраторы. Эти приборы имеют одинаковый принцип действия, но отличаются по конструктивному исполне нию, в связи с чем значительно разнятся друг от друга по чувствительност и, инерционности и способности воспроизводить сигналы различной часто ты. Существуют гальванометры и вибраторы магнитоэлектрической и элект ромагнитной системы. В гальванометрах (вибраторах) магнитоэл ектрической системы преобразование элек трических сигналов в механический эффект достигается за счет движения проводника (по которому течет электрический ток) в постоянном магнитном поле. Проводник электрического тока может быть выполнен в виде тонкой ст руны, петли или многовитковой рамки. Многовитковую рамку используют для конструир ования магнитоэлектрических вибраторов. В гальванометрах (вибраторах) электрома гнитной системы магнитное поле, в которое помещается ферромагнетик 8, создается за счет постоянного магнита 1 и специальной обмотк и 4. Эта обмо тка при прохождении через нее электрического тока создает электромагн итное поле, свойства которого определяются направлением силой тока, про ходящего через обмотку. При взаимодействии эти, полей создается вращающ ий момент, под влиянием которого перемещается ферромагнитный якорь. Использование различных систем, способных отображать перемещение подв ижных элементов гальванометров (вибраторов), позволяет конструировать различные типы регистраторов, например, струнный гальванометр, зеркаль ный гальванометр, шлейфный осциллограф, регистраторы с непосредственн о видимой записью (чернильно-перьёвой, струйной, копировальной, тепловой , печатной и др.). Струнный гальванометр . В этих приборах направление перемещения струны в си льном магнитном поле определяется на правлением приложенного к ней ток а, а величина перемещения определяется силой тока, проходящего через нее . Колебания струны с помощью оптической системы можно проецировать на э кран, а для записи - на движущуюся фотографическую бумагу или пленку. Струнные гальванометры сравнительно малоинерционны; их совершенные мо дели способны воспроизводить сигналы с частотой до 1000 Гц. Их чувствительн ость зависит от величины магнитного поля и свойств струны (упругости и д иаметра). Чем тоньше струна (2-5 мкм) и чем сильнее магнитное поле, тем выше чу вствительность струнного гальванометра. Многие струнные гальванометр ы имеют такую чувстви тельность, что могут использоваться без усилителе й. Раньше их применяли для регистрации электрокардиограммы и мембранны х потенциалов клеток. Зеркальный гальванометр. Если на петле или многовитковой рамке укрепить маленьк ое легкое зеркальце 6, то при пропускании тока оно будет перемещаться вмес те с петлей или рамкой (направление движения на рис. 14 показано стрелкой). Н а зеркальце с помощью осветителя направляется луч света, а отраженный лу ч (зайчик) проецируется на полупрозрачный экран, по шкале которого судят о направлении и величине отклонения отраженного луча. При этом зеркальн ые гальванометры могут использоваться как самостоятельные регистриру ющие приборы. В настоящее время зеркальные гальванометры применяют в качестве выход ных устройств в так называемых шлейфных осциллографах. Для регистрации исследуемого прогресса и наблюдения за ним в шлейфных о сциллографах используется особая оптическая система . От лампы осветителя 1 луч света ч ерез линзу 2 и диафрагму 3 с помощью зеркала 4 направляется на зеркальце галь ванометра 5 и линзой 6 делится на два пучка. Один пучок света линзой 7 фокусируется на поверхнос ти движущейся фотобумаги (фотопленки), которая протягивается лентопрот яжным механизмом 8. Второй пучок с помощью цилиндрической линзы – призмы 9 направляется на в ращающийся многогранный зеркальный барабан 10 и, отражаясь от него, п адает на матовый экран 11. За счет вращения зеркального барабана исследуемый п роцесс развертывается на экране и служит для визуального наблюдения. Сочетание струнных и зеркальных гальванометров с оптическими системам и позволяет производить регистрацию исследуемых процессов с применени ем фотографического метода или метода ультрафиолетовой записи. Послед ний позволяет получать видимую запись спустя несколько секунд после эк спозиции без проявления. Рег истраторы с непосредственно видимой записью. В регистра торах этого типа преобразователями электрических сигналов являются магнитоэлектрические (рамочные) или электромагнитны е вибраторы, на подвижные элементы которых вместо зеркальца укрепляют р азличные инструменты записи. Черни льно-перьевые регистраторы. Этот тип устройств широко используют пр и регистрации физиологических функций. В них перо 5 укреплено на рамке ил и ферромагнитном якоре 2, которые находятся в поле магнита 1 . Перо соединено эласт ичной трубкой 4 с резервуаром для чернил 3. Исследуемый процесс записывается на бумажной ленте 6. Чернильно-перьевые регистраторы удобны в эксплу атации и вполне пригодны для решения многих задач. Их успешно используют в электроэнцефалографах, электрокардиографах, электрогастрографах и других приборах. Однако чернильно-перьевые регистраторы имеют ряд суще ственны х не достатков. Они инерционны и не позволяют регистрировать электрические колебания с частотой, превышающей 150 Гц. В связи с этим они непригодны, напр имер, для регистрации быстрых процессов, таких как биотоки нервов и нерв ных клеток и т. п. Кроме того, чернильно-перьевая регистрация (без специаль ной коррекции) вносит в исследуемый процесс радиальные искажения, обусл овленные дугообразным движением пера на бумаге. Струйный метод регистрации. Этот метод основан на пропускании через кап илляр (диаметром 5-8 мкм), укрепленный на вибраторе, струи чернил под давлен ием 20 кг/см 2 : чернила, попадая на движущуюся бумажную ленту, оставляют след в виде кри вой исследуемого процесса. Струйный метод регистрации высокочувствителен и малоинерционен. Он по зволяет совмещать удобство видимой записи с возможностью регистрации электрических сигналов в широком частотной диапазоне (от 0 до 1500 Гц). Однако эти регистраторы требуют применения особых чернил, обладающих весьма в ысоким качеством (однородность состава). Во всех регистраторах с непосредственно видимой записью скорость движ ения носителя записи (бумаги) определяется механической разверткой и не превышает 200 мм/с, в то время как для развертывания быстропротекающих проц ессов требуются большие скорости записи, что достигается с помощью элек тронной развертки в катодных осциллографах. Электронные (катодные) осциллографы. Это – универсальные регистрирующ ие приборы. Они практически безынерционны и за счет наличия усилителей и меют высокую чувствительность. Эти приборы позволяют исследовать и рег истрировать как медленные, так и быстрые колебания электрических потен циалов с амплитудой до 1 мкВ и менее. Выходным регистрирующим устройство м катодного осциллографа является элект ронно-лучевая трубка с электростатически м или электромагнитным отклонением электронного луча. Принцип действия электронно-лучевой трубки заключается во взаимодейст вии потока электронов, испускаемого катодом и сфокусированного систем ой электронных линз, с электростатическим или электромагнитным полем о тклоняющих электродов. Электронно-лучевая трубка состоит из стеклянного баллона, внутри котор ого в высоком вакууме находятся источник электронов и системы электрод ов (направляющие, фокусирующие и отклоняющие), управляющие электронным л учом. Источником электронов является катод 2, подогреваемый нитью накала 1. Отрицательно заряже нные электроны через управляющую сетку 3 притягиваются системой положительно зар яженных анодов 4, 5 и 6. При этом из электронов формируется электронный луч, кото рый проходит между вертикальными 7 и горизонтальными 8 откло няющими пласти нами и направляется на экран 9, покрытый люминофором (веществом, обладающ им способностью светиться при взаимо действии с электронами). Управляющ ая сетка 3 и меет по отношению к катоду отрицательный потенциал, величина которого р егулируется потенциометром 10. При изменении (с помощью потенциометра) потенциала с етки изменяется плотность потока электронов в электронном луче, а следо вательно, яркость свечения луча на экране. Фокусирование электронного л уча осуществляется потенциометром 10 , т. е. за счет изменения положительного потенци ала на втором аноде 5. Гори зонтальные и вертикальные отклоняющие пластины управ ляют движением э лектрического луча соответственно в горизонтальной и вертикальной пло скостях, для чего на них подаются потенциалы с усилителей горизонтально го (б, х 1 и х 2 ) и вертикального (а, у 1 и у 2 ) отклонения луча. Если на горизонтальные отклоняющие пластины подавать пилообразное напряже ние, то луч осциллографа будет перемещаться в горизонтальной плоскости слева направо. Изменяя режим работы генератора пилообразного напряжен ия, можно р е гулировать скорость развертки, т. е. скорость прохождения луча по экрану осциллогра фа. Это необходимо потому, что исследуемые процессы (сигналы) имеют разны е частотно-временные параметры. Исследуемый процесс (сигнал) обычно подается на вертикальные отклоняющ ие пластины, которые перемещают луч вверх или вниз, в зависимости от знак а и величины приложенного к ним напряжения. Таким образом, потенциалы, пр иложенные к пластинам, управляют перемещением луча по горизонтальной ( х ) и вертикальной ( у ) осям, т. е. развертывают исследуемый процесс. Регистрацию исследуемых процессов с экрана катодного осциллографа осу ществляют фотографическим способом с применением световых фотоаппара тов или специальных фотокамер. М агнитографы. Регистрация электрических п роцессов на ферромагнитную ленту удобна тем, что записанная таким образ ом информация может длительно храниться и многократно воспроизводитьс я. С помощью различных регистраторов ее можно переводить в видимую запис ь с различным масштабом развертки. Эту информацию можно обрабатывать по сле окончания эксперимента с помощью различных автоматических устройс тв и электронно-вычислительных машин. Магнитографы позволяют записыва ть и протокол эксперимента. ЭЛЕКТРОННО-ВЫЧИСЛИТЕЛЬНЫЕ МАШИНЫ В современных условиях ЭВМ являются неот ъемлемой частью научно-исследовательских лабораторий, так как электро нно-вычислительные машины значительно повышают эффективность труда ис следователей Ввод данных об исследуемом процессе можно производить ра зличными способами: ручным (когда предварительно рассчитанные амплиту дно-временные параметры, например, электрокардиограммы вводят с клавиа туры ЭВМ) или с промежуточного носителя информации (например, с перфокар ты или перфоленты, на которых закодирована информация). Однако наиболее удобно и экономично вводить информацию в ЭВМ с помощью с пециального устройства – амплитудно-цифрового преобразователя (АЦП). А мплитудно-цифровой преобразователь трансформирует амплитудно-времен ные параметры исследуемого процесса (например, амплитуду и длительност ь различных компонен тов ЭКГ) в цифровой код, который воспринимается, ана лизируется и обрабатывается процессором ЭВМ. Математически обработанн ая (по заданным программам) в ЭВМ информация может быть представлена в ра зличных формах: в виде таблицы, отпечатанной на цифропечатаюшем устройс тве; в виде графика, построенного графопостроителем; в виде изображения на экране дисплея или в другой форме. При этом исследователь освобождает ся от рутинной работы не только по измерению, обсчету, математическому а нализу результатов, но и от необходимости составлять таблицы и строить г рафики. ПРИБОРЫ СПЕЦИАЛЬНОГО НАЗНАЧЕНИЯ Приб оры специального назначения обычно предназначены для регистрации како й-либо одной функции или процесса, например электрокардиограммы, электр оэнцефалограммы, электрогастрограммы и др. Такая специализированная а ппаратура, как правило, компактна, проста в эксплуатации и удобна для про ведения клинических исследований. В ее состав входят различные блоки (си стемы) общего назначения, поэтому знание принципиального устройства от дельных блоков позволяет легко разобраться в работе приборов специаль ного назначения. Общая структура прибора специального назначения вклю чает электроды или датчик, коммутатор, усилитель, регистратор и блок пит ания. Более детальное знакомство с каждым прибором осуществляется с пом ощью инструкции по эксплуатации, прилагаемой к прибору. Эле ктростимуляторы. Для электрической стиму ляции биологических объектов вплоть до середины текущего столетия при меняли индукционные катушки, которые в настоящее время полностью замен ены электростимуляторами. Электростимулятор – один из самых распространенны х и необходимых приборов. Он обеспечивает оптимальные условия раздраже ния тканей (с наименьшим их травмированием при длительной стимуляции) и удобен в работе. Для исследовательских целей целесообразно использовать стимулятор, ко торый в зависимости от условий эксперимента может служить либо генератором тока, либо генератором напряжения. Внутреннее сопротивление выходного устройства так ого стимулятора можно изменять в соответствии с целями эксперимента. Он о должно быть или в 30-40 раз больше сопротивления объекта исследования (при работе в режиме «генератор тока»), или во столько же раз меньше (в режиме « генератор напряжения»). Однако подобные универсальные стимуляторы сло жны и громоздки, поэтому в условиях физиологического практикума лучше п рименять более простые приборы. Стим улятор состоит из нескольких блоков (каскадов), принципиальное назначен ие которых не зависит от типа стимулятора. Рассмотрим назначение отдель ных каскадов стимулятора и связанных с ними органон управления на приме ре стимулятора импульсного физиологического СИФ-5. Генератор частоты следования импульсов (задающий генератор) часто конс труируют по схеме мультивибратора; он может работать в ждущем и непрерыв ном режимах. При работе в ждущем режиме задающий генератор может генерир овать импульсы или при нажатии кнопки «Пуск» 9, или при подаче на вхо д мультивибратора запускающих сигналов от другого источника импульсов . В первом случае генерируется только один импульс, во втором - частота имп ульсов будет соответствовать частоте запускающих сигналов. При непрер ыв ном режиме работы 8 задающий генератор стимулятора генерирует импульс ы непрерывно, их частоту / можно изменять от долей герца до нескольких сот ен герц. Импульсы от задающего генератора подаются на следующий каскад стимуля тора – каскад задержки, а также могут быть использованы для запуска раз вертки осциллографа (импульс синхронизации 10), В каскаде задержки 2 импульс з адающего генератора может задержаться на время 1 – 1000 мс. Каскад задержки позволяет (например, при исследовании вызванных потенциалов) независим о от скорости развертки осциллографа установить потенциал на экране ос циллографа в удобном для регистрации месте. Импульсы от каскада задержки могут быть использованы для запуска други х стимуляторов, если в эксперименте применяют несколько стимуляторов и их работу нужно синхронизировать. Кроме того, от каскада задержки подают ся импульсы на вход каскада формирования выходных сигналов. В этом каска де формируются импульсы прямоугольной (или другой) формы с определенной длительностью 3, затем они передаются на усилитель мощности, который позволяет регулировать их амплитуду 4. С выхода стимулятора 5 посредством соединительных проводов и стимулирующ их электродов импульсы необходимой формы, дли тельности и амплитуды пер едаются на объект исследования. Полярность выходных импульсов 6 можно изменять. Д ля умень шения артефакта раздражения некоторые типы стимуляторов имею т изолирующие трансформаторы 7, другие - высокочастотные выходные устрой ства. Как для учебных, так и для исследовательских целей используют стимулято ры и других типов, например, НСЭ-01, ЭСТ-10А, ИС-01 и др. Кроме импульсных стимуляторов в физиологических экспериментах исполь зуют фото- и фоностимуляторы. Их устройство во многом принципиально сходно с устр ойством импульсного стимулятора. Отличие состоит в основном в структур е выходного блока, формирующей световые сигналы в фотостимуляторе или звуковые - в фоностимуляторе. Эргометры. Для создания функциональной нагрузки на отдель ные органы, с истемы и организм в целом широко применяют эрго метры различных типов. Они позволяют создавать или локальную, или общую функциональную н агрузку, дозировать и опре делять ее величину. Наиболее распространенны ми приборами этого типа являются пальце вый эргограф, велоэргометры и бегущая дорожка. Суще ствуют бегущие дорожки (третбаны) и для животных. Камер ы. Камеры различного назначения широко используют при создании определ енных условий для объекта исследования. Существуют сурдокамеры, термокамеры, барокамеры с повышенным и пониженным давлением, камеры с лучевыми и звуковыми уста новками и т. д. В настоящее время сконструированы камеры, позв оляющие создать искусственный микрокли мат и изучать реакции объекта исследовани я на разнообразные воздействия. ОСНОВНЫЕ ПРАВИЛА ЭКСПЛУАТАЦИИ ЭЛЕКТРОН НОЙ АППАРАТУРЫ Помим о общих правил обращения с аппаратурой, необходи мо в каждом отдельном с лучае вначале ознакомиться с прави лами эксплуатации незнакомого приб ора и лишь затем присту пать к работе с ним. Это приобретает особое значен ие в усло виях клиники, поскольку некоторые приборы при неумелом обраще нии представляют опасность для пациента (прибор для исследования возбу димости нервов и мышц – электроимпульса-тор и ряд других). Основные прав ила состоят в следующем. До в ключения прибора в сеть необходимо: 1) убеди ться, что напряжение сети соответствует напряжению, на которое рассчита н прибор или на которое переключен в данный момент его силовой трансформ атор; 2) заземлить прибор, т. е. соединить клемму (или гнездо «земля») с шиной контура заземления или водопроводной сетью (ни в коем случае нельзя зазе млять приборы на элементы проводки газа); 3) проверить все провода сетевог о тока (исправность изоляции и наличие вилок), катего рически запрещаетс я включать в розетки питания оголенные концы проводов; 4) проверить прово да, предназначенные для коммутации приборов и составления рабочей схем ы (они не должны иметь лишенных изоляции мест); 5) проверить у всех приборов тумблеры и другие переключатели сети - они должны находиться в положении «выкл.». Включ ение приборов в сеть должно проводиться переключателя ми, расположенны ми на приборах. После включения приборов следует: 1) проверить по свето вым индикаторам, в се ли приборы получили питание (если индикатор не горит, необходимо обра титься к преподавателю и совместно установить причину неисправности; ч аще всего это бывает связано с перегоранием предохранителя прибора или лампочки светового индикатора); 2) помнить, что ламповые электронные приб оры начинают стабильно работать только после предварительного прогрев а в течение 15-30 мин; для большинства транзисторных приборов этот срок сост авляет до 2-5 мин. Раб ота 1 Тем а : «Тестирующие нагрузки в физиологическ ом эксперименте» Цель : изуч ить наиболее известные методы тестирования и комбинированные модели, и тесты, используемые для исследования физической выносливости у лабора торных животных, эмоциональной устойчивости и тревожности. Вопр осы для самоподготовки 1. Условия и п орядок проведения оценки субмаксимальной работоспособности (тест RWC 170 ) . 2. Тест ирование физической выносливости у лабораторных животных (бег на тредб ане, плавание). Значение. 3. Тест «Открытое поле». Его описание и значение. 4. Сущность многопараметрического т еста, его описание. Лите ратура 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Работа 2 Тем а : «Аппаратура и метод ы изучения электрофиз иологических функций» Цель : озна комиться с условиями и тенденциями возникновения и развития электрофи зиологии, внесению сферы практического использования аппаратуры. Изуч ение электрофизиологических методов. Вопр осы для самоподготовки 1. Предмет и з адачи электрофизиологии. 2. Возни кновение и первые шаги электрофизиологии. 3. Облас ти практического использования электрофизиологии . 4. С хемы связей межд у приборами и объектами исследования. 5. Электронная аппаратура и правила э ксплуатации электронной аппаратуры. 6. Электрофизиологические методы (вн еклеточное и внутриклеточное отведение и регистрация биопотенциалов, метод вызванных потенциалов, электроэнцефалография, электрокаруногра фия. Литер атура 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Работа 3 Тем а : «Методические приемы, используемые при проведении хронического эксперимента» Цель : изуч ить основные теоретические вопросы, связанные с практикуемыми операци онными приемами в экспериментальной физиологии. Вопр осы для самоподготовки 1. Условия пр оведения. 2. Налож ение фистул. Техника наложения различных видов швов . 3. Гетер огенные нервные, нервно-мышечные, нервно-сосудистые и нервно-железистые анастомозы. 4. Перфу зия тканей и органов. 5. Канюлирование. 6. Введение меченых атомов и б иологических суб стратов. 7. Позитронно-эмиссионная томография . Литер атура 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Работа 4 Тем а : «Электрофизиологические методы» Вопро сы для самоподготовки 1. История из учения биоэлектрических явлений. 2. Электрические генераторы тока и на пряжения. 3. Электроды и усилители. 4. Регистрирующие приборы. 5. Микроэлектродная техника и изгото вление микроэлектродов. 6. Физи ологическа я универсальная комплексная установка. 7. Сте р е о таксическая техника. Стереотаксические атласы. Литер атура 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Работа 5 Тем а : «Биохимические и гистохимические метод ы в физиологии» Вопро сы для самоподготовки 1. Химиче с кое кар т ирование м о зга. 2. Методы выявления локализации р ез и сторов в структурах п ериферической нервной системы. 3. Вы я вление локал из ации резисторов в стр у ктурах центральной н ервной системы. 4. Выявление локализации рецепторов в органах-мишенях. 5. Определение функциональной активн ости органа или системы органов по концентрации секретируемого гормон а, нейрогормона или другого биологи че ски актив н ого вещества. Литер атура 1. Батуев А.С. В ысшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Маринов а К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Прос вещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиоло гии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологии . / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Раб ота 6 Тем а : « Гистолог ические и нейроанатоми ческие методы» Вопро сы для самоподготовки 1. Перфуз и я. 2. Извлечение м озга. 3. Изготовлен и е блоков ткани мозга. 4. Изготовление срезов. 5. Подготовка желатинизированных пре дметных стекол. 6. Монт ирование срезов. 7. Фотографи рование неокрашенных срезов. 8. Окрашивание. Литер атура 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Раб ота 7 Тем а : «Исследование различных методов и прие мов при изучении соматосенсорных систем организма» Вопро сы для самоподготовки 1. Общие прин ципы координированной иннервации мышц. 2. Рецип рокная иннервация мышц-антагонистов. 3. Спина льное животное. 4. Моносимпатическая и полисимпатиче ская ре ф лек торная д у га. 5. Обратимое выключение мо з жечка у крысы. 6. Х и мическое разрушение мозговых структур. 7. Метод аспирации. Литература 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Раб ота 8 Тем а : «Исследование различных методов и прие мов при изучении висцеральных систем организма» Вопро сы для самоподготовки 1. Регистрац ия потенциала действия (ПД) миокарда желудка и его изменения при раздраж ении вагосимпатического ствола. 2. Изучение парасимпатических и симп атических влияний на силу и частоту сердечных сокращений. 3. Ауторегуляторная функция внутрисе рдечной нервной системы. 4. Висце ро-кардиальные рефлексы. 5. Топография и анатомическая характе ристика эндокринных желез крысы. 6. Роль гонад в регуляции вторичных половых признаков. 7. Биохимическое и иммунноферментат ивное определение уровня кортикостероидных гормонов в б иологических жидкос тях крысы и человека. Литература 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г. Раб ота 9 Тем а : « Методы и сследовани я высшей нерв ной деятельности » Вопр осы для самоподготовки 1. М е тод выработки усл овных рефлексов. 2. Классические и оперантные методик и выработки условных рефлексов. 3. Метод ы изучения кратковременной и дол г овременной памят и . 4. Невр ологиче с ко е т ести р ов а ние на крысах. 5. Измерение структуры поведения. 6. Выраб отка инструментальных условных рефлексов. 7. Статистиче ские методы, используемые в физиологии. Литер атура 1. Батуев А.С. Высшая нервная деятельность. М., 1991 г. 2. Большой практикум по физиологии че ловека и животных. / Под ред. Б.А. Кудряшова – М.: Высшая школа, 1984 г. 3. Гуминский А.А., Леонтьева Н.Н., Марино ва К.В. Руководство к лабораторным занятиям по общей физиологии. – М.: Про свещение, 1990 г. 4. Малый практикум по физиологии чело века и животных. / Под ред. А.С. Батуева – СПб.: Изд-во СПбГУ, 2001 г. 5. Методики и основные эксперименты п о изучению мозга и поведения. Я. Буреш, О. Бурешива, Д. Хьюстон / Перевод с анг л. – М.: Высшая школа, 1991 г. 6. Методы исследований в психофизиол огии. / Под ред. А.С. Батуева – СПб, 1994 г. 7. Методы клинической нейрофизиологи и. / Под ред. В.Б. Гречина – Л., 1977 г. 8. Общий курс физиологии человека и жи вотных. В 2 Т. / Под ред. А.Д. Ноздрачева – М., 1991 г. 9. Практикум по нормальной физиологи и. / Под ред. Н.А. Агаджаняна – М.: Изд-во РУДН, 1996 г.
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
Американец - русскому:
- Я представляю, как вы обедаете: дубовый стол, на столе - бутылка водки, чёрный хлеб, селёдка, лук, каша, пельмени. Под столом - пулемёт. На стене - балалайка и будёновка. Во дворе - танк, а на крыльце - медведь.
Русский:
- Что за бред?! Почему одна бутылка водки?!
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru