Диплом: Антибиотики в сельском хозяйстве - текст диплома. Скачать бесплатно.
Банк рефератов, курсовых и дипломных работ. Много и бесплатно. # | Правила оформления работ | Добавить в избранное
 
 
   
Меню Меню Меню Меню Меню
   
Napishem.com Napishem.com Napishem.com

Диплом

Антибиотики в сельском хозяйстве

Банк рефератов / Сельское хозяйство и землепользование

Рубрики  Рубрики реферат банка

закрыть
Категория: Дипломная работа
Язык диплома: Русский
Дата добавления:   
 
Скачать
Microsoft Word, 383 kb, скачать бесплатно
Заказать
Узнать стоимость написания уникальной дипломной работы

Узнайте стоимость написания уникальной работы

Открытие сульфанилами дных препаратов и применение их в медицинской практике составили извес тную эпоху в химиотерапии многих инфекционных заболеваний, в том числе с епсиса, менингита, пневмонии, рожистого воспаления, гонореи и некоторых других. Однако наибольший интерес для медицины представили различные биологич ески активные вещества, полученные биосинтетическим путем, то есть соед инения, образующиеся в процессе жизнедеятельности разнообразных орган измов. В конце XIX века русские ученые В. А. Манассеин и А. Г. Полотебнов показали, что грибы из рода Penicillium способны задержи вать в условиях in vivo развитие возбудителей ряда кожных заболеваний челов ека. И. И. Мечников в 1894 году обратил внимание на возможность использования нек оторых сапрофитных бактерий в борьбе с патогенными микроорганизмами. В 1896 году Гозио из культуральной жидкости Penicillium выделил кристаллическое соединение - микофеноловую кислоту, подавляющее рост бактерий сибирской язвы. Эммерих и Лоу в 1899 году сообщили об антибиотическом веществе, образуемом Pseudomonas pyocyanea , они назвали его пиоцианазой; препарат использовался в ка честве лечебного фактора как местный антисептик. В 1910-1913 годах Black O . и Alsberg U . выделили из гриба рода Penicillium пенициловую кислоту, обладавшую антим икробными свойствами. К сожалению, эти и некоторые другие наблюдения и открытия не получили в т о время дальнейшего развития, но они оказали огромное положительное вли яние на более поздние исследования в области изучения биологически акт ивных продуктов жизнедеятельности организмов. В 1929 году Александром Флемингом был открыт новый препарат пенициллин, кот орый только лишь в 1940 году удалось выделить в кристаллическом виде. Это но вое и весьма эффективное химиотерапевтическое вещество было получено в результате жизнедеятельности микроорганизма, то есть биосинтетическ им путем. Применение пенициллина в борьбе с различными инфекционными заболевани ями и воспалительными процессами явилось мощным стимулом для поиска но вых, еще более эффективных антибиотических веществ, образуемых различн ыми группами микроорганизмов (бактериями, актиномицетами), низшими раст ениями (дрожжами, водорослями, плесневыми грибами, высшими грибами), высш ими растениями и животными организмами. Настойчивые поиски продуцентов новых антибиотиков увенчались блестящ ими успехами. Так, если проследить за динамикой роста числа описываемых антибиотиков, то можно заметить следующую закономерность. В 1896 году Гозио выделил микофеноловую кислоту, в 1899 году Эммерих и Лоу описа ли пиоцианазу. В 1937 году Вельш описал первый антибиотик актиномицетного п роисхождения актиномицин, в 1939 году Красильниковым и Кореняко был получе н линцетин и Дюбо-тиротрицин. Таким образом, к моменту получения пеницил лина в очищенном виде (1940) уже было известно 5 антибиотических веществ. Посл е этого число антибиотиков росло очень быстрыми темпами: Год Число антибиотиков Год Ч исло антибиотиков 1856 1899 1937 1939 1940 1945 1 2 3 5 6 32 1949 1953 1964 1968 настоящее время 150 450 > 1600 > 2000 около 3000 Из около 3 000 антибиотиков , известных к настоящему времени, лишь примерно сто находят применение в медицинской практике: при лечении воспалительных процессов (пневмония, перитонит, фурункулез), различных форм туберкулеза, при борьбе со многим и инфекционными заболеваниями, считавшимися ранее неизлечимыми или тр удно излечимыми и т.д. Применение этих соединений привело к резкому сниж ению смертности при таких заболеваниях, как крупозное воспаление легки х, сепсис, различные формы менингита и др. Большинство описанных антибиотиков не находит применения в медицинско й практике из-за их токсичности, инактивации в организме больного или др угих причин. Работы по изысканию антибиотических веществ нового поколения, эффекти вных при лечении вирусных и раковых заболеваний, борьба с которыми являе тся одной из важнейших проблем современности, продолжаются с неослабле нной энергией. Последние 15-20 лет ежегодно различным вопросам, связанным с изучением анти биотиков, посвящается более пяти тысяч работ. Открытие и изучение свойств нового антибиотика, применяемого в медицин ской практике, - это огромный труд ученых различных направлений (микроби ологов, биохимиков, генетиков, химиков, технологов, фармакологов, врачей и др.). По подсчетам некоторых американских ученых над открытием лишь одного т акого антибиотика широкого спектра 55 ученых непрерывно работали 2,5года. О ни обследовали более 100 тысяч образцов почвы, израсходовали на это более 4 млн долларов. Итальянской фармацевтической компании "Лепетит" для производства ново го противотуберкулезного антибиотика потребовалось одиннадцать лет н аучно-исследовательских работ, которые обошлись в несколько миллионов долларов. Каковы же основные причины столь быстрого роста числа антибиотиков, про исходящего за последние 20-25 лет, несмотря на огромные финансовые затраты и необходимость привлечения большого числа исследователей? Среди них можно назвать следующие: 1. Многие антибиотические в ещества - незаменимые лечебные препараты. Они широко применяются при леч ении большого числа инфекционных заболеваний, которые ранее, до открыти я антибиотиков, считались неизлечимыми или сопровождались высоким лет альным исходом. К их числу следует отнести некоторые формы туберкулеза, чуму, азиатскую холеру, брюшной тиф, бруцеллез, пневмонию, различные септ ические процессы. 2. Антибиотики - очень полезн ые вещества в сельском хозяйстве, прежде всего как лечебные препараты в животноводстве, птицеводстве, пчеловодстве и растениеводстве, а отдель ные антибиотические вещества - и как стимуляторы роста животных. 3. При широком применении ан тибиотиков в качестве лечебных препаратов происходит быстрое накоплен ие резистентных к этим соединениям форм микроорганизмов. Проблема рези стентности микроорганизмов ставит задачу замены одних антибиотиков др угими, то есть поиска все новых и новых антибиотических веществ. 4. Некоторые из антибиотико в с успехом применяются в пищевой и консервной промышленности в качеств е консервантов скоропортящихся продуктов (свежей рыбы, мяса, сыра, разли чных овощей). 5. Антибиотические вещества - новые, ранее неизвестные по химическому строению соединения - представ ляют огромный интерес для специалистов в области химии природных соеди нений. Изучение структуры этих веществ, а также синтез некоторых из них с пособствовали бурному развитию указанного направления в химии, а следо вательно, и самой науки об антибиотиках. Достаточно указать, что к настоя щему времени синтезированы такие антибиотики, как пенициллины, хлорамф еникол, тетрациклины и др. 6. Антибиотики нашли широко е применение в научных исследованиях в качестве веществ, используемых п ри изучении отдельных сторон метаболизма организмов, расшифровки тонк их молекулярных механизмов биосинтеза белка, механизма функционирован ия мембран и других биохимических превращений как специфические ингиб иторы определенных реакций. Например, одни антибиотики специфически ин гибируют отдельные этапы синтеза белка на рибосомах (хлорамфеникол, пур омицин, тетрациклин), другие - синтез на разных уровнях нуклеиновых кисло т (саркомицин подавляет активность полимераз; актиномицин блеомицин, ру бомицин и другие нарушают функцию ДНК; и т.д.), третьи - образование клеточн ых стенок (пенициллины) и т.д. 7. Изучение путей образован ия антибиотиков способствует глубокому проникновению в механизмы синт етической деятельности продуцентов этих биологически активных соедин ений, раскрытию основных этапов их метаболизма. Таким образом, все эти ф акторы способствовали и продолжают способствовать тому, что к проблеме антибиотиков привлечено внимание огромных групп ученых различных напр авлений: микробиологов, микологов, биохимиков, химиков, генетиков, цитол огов, фармацевтов, врачей, технологов и т.д. изучение антибиотиков - это ти пичный пример комплексного подхода к проблеме, что само по себе способст вовало прогрессу в исследовании этих биологически активных соединений . 5. Биологическая роль антибиотиков в природе. Результаты, получаемые в лабораторных условиях нельзя не посредственно переносить на явления, имеющие место в естественных мест ах обитания организмов, как отмечал Новогрудский (1948), явления микробного антагонизма в почве протекают своеобразно, иногда значительно отличая сь от антагонизма тех же микробов на искусственных питательных средств. Это положение имеет особенно важное значение при рассмотрении вопроса в биологической роли антибиотиков, т.е. о той роли этих веществ, какую они играют в естественных местах нахождения микроорганизмов, образующих и х. О биологической роли антибиотиков не сущществует единого менения. Это г оворит о том. Что обсуждаемый вопрос представляет собой не простое явлен ие. Рассмотрим две противоположные точки зрения и биологической роли анти биотиков. Первая исходит из того, что образование антибиотиков следует рассматри вать как специфическую особенность обмена веществ организмов, возникш ую и закрепленную у них в процессе эволюционного развития. Образование и выделение антибиотиков в окружающую среду при жизни организмов или пос ле их отмирания - могущественный фактор в борьбе за существования видов. Такая точка зрения о роли антибиотических веществ широко распростране на среди ведущих российских и зарубежных специалистов. Ее поддерживают Имженецкий, Красильников, Гаузе, Гроссбард, Брайэн, Гаррет, Торнтон и друг ие ученые. Биосинтез антибиотиков - наследственная особенность организмов, прояв ляющаяся в том. Что каждый вид (штамм) способен образовывать один или неск олько вполне определенных, строго специфичных для него антибиотически х веществ. Вместе с тем известно, что одинаковые антибиотики могут образовываться несколькими видами организмов. И это нисколько не противоречит мысли о н аследственно закрепленном свойстве микроорганизмов продуцировать оп ределенные антибиотические вещества. Выявление потенциальной возможности образовывать в процессе жизнедея тельности антибиотики связано с условиями культивирования организмов . В одних условиях организм образует антибиотик, в других условиях тот же организм при хорошем росте не будет обладать способностью синтезирова ть антибиотическое вещество. Однако такие явления наблюдаются в лабора торных условиях культивирования изучаемого организма, в условиях огра ниченного или слишком богатого выбора источников питания. Вторая точка зрения состоит в том, что антибиотические вещества, образуе мые микроорганизмами, носят случайный характер, зависящий лишь от услов ий культивирования. По мнению этих авторов (Ваксман и другие), образовани е антибиотиков - это не закрепленное свойство организма, проявляющееся т олько при развитии организма в специфической среде и при наличии особых внешних условий. Поэтому антибиотики не имеют для продуцентов приспосо бительного значения, их образование не связано с эволюцией микрооргани змов. Эта точка зрения основывается на двух положениях: 1. Не все микроорганизмы обр азуют антибиотические вещества, что, однако, не мешает их широкому распр остранению в природе. 2. Антибиотические вещества , даже самые устойчивые, довольно быстро инактивируются в почве, в этом ес тественном местообитании большинства микроорганизмов. Только при макс имальном насыщении почвы антибиотиками можно получить соответствующи й биологический эффект. Как пишут Ваксман и Леше валье (1962), антибиотики являются "лабораторными продуктами, образуемыми р астущими чистыми культурами микроорганизмов в условиях богатой питате льными веществами среды при хорошей аэрации, но они не обнаруживаются в почве". Итак, по мнению названных авторов, следует что антибиотики, образуемые м икроорганизмами, носят случайный характер, зависящий только от условий культивирования. Если бы это действительно имело бы место, то мы были бы в праве ожидать, что при изменении условий культивирования, например, для продуцента стрептомицина, можно было бы получить образование, например, хлортетрациклина или пенициллина. Но ведь этого никогда не бывает, как б ы не менялись условия культивирования, как бы серьезно не менялся состав среды для культивирования. Экспериментатору удается путем изменения условий культивирования пол учить больший или меньший выход антибиотика, или создать условия, при ко торых антибиотик вообще не будет образовываться. Можно также путем изме нения условий культивирования продуцента добиться преимущественного биосинтеза одного из антибиотиков, при условии образования изучаемым о рганизмом нескольких антибиотических веществ, или же получить новые фо рмы антибиотиков, но только в пределах тех соединений, которые способны синтезироваться этим организмом. Но экспериментатору, по-видимому, нико гда не удается достичь того, чтобы продуцент стрептомицина Act. Streptomycini путем и зменения условий культивирования начал образовывать хлортетрациклин и пенициллин. Наследственная особенность продуцента стрептомицина сос тоит в том, что он может образовывать стрептомицин или гризеин, или други е антибиотики, свойственные данному виду. И только их, но не пенициллин, не антибиотики тетрациклиновой группы, не актиномицины и не какие другие а нтибиотики. Образование антибиотиков нельзя считать случайным явлением в жизнедея тельности микроорганизмов. Этот процесс обусловлен определенным харак тером обмена веществ, возникшим и закрепленным в процессе эволюции орга низма. Однако нельзя отрицать того факта, что в отдельных случаях проявл ение антагонизма у микроорганизмов связано с образованием продуктов о бмена, не являющихся специфическими веществами их метаболизма. Такой ха рактер имеет антагонизм у уробактерий, обусловленный выделением аммиа ка при использовании мочевины, или антагонизм некоторых молочнокислых бактерий, связанный с выделением ими перекиси водорода и т.д. Но такие про дукты жизнедеятельности микроорганизмов мы не называем антибиотиками. Ваксман и Лешевалье (1962) считают, что антибиотики образуются только чисты ми культурами. Однако это положение далеко не обязательно. Многие виды м икроорганизмов, в частности актиномицеты, способны образовывать антиб иотические вещества только в присутствии других организмов (Макаровск ая, 1956; Егоров и др., 1960; Красильников и Егорова, 1960). Ваксман и его последователи основывают свою концепцию на том, что не все микроорганизмы способны образовывать антибиотики, что, однако, не мешае т им быть широко распространенными в природе. Образование антибиотиков - лишь одна из форм антагонистических взаимоо тношений, существующих в мире микроорганизмов. В борьбе за распростране ние в природе микроорганизмы "используют" не только фактор антибиотикоо бразования, но и многие другие эволюционно закрепленные особенности, да ющие им преимущество в острой конкурентной борьбе с другими видами. Образование антибиотиков микроорганизмами при культивировании их в ус ловиях лаборатории действительно, по мнению многих исследователей, про является далеко не у всех организмов. Так, в ряде работ отмечается, что все го лишь 40 - 70 процентов штаммов актиномицетов обладают антибиотической ак тивностью, а остальные штаммы являются неактивными. Однако Егоров (1956) экспериментально показал, что при соответствующих усло виях культивирования все, так называемые, неактивные штаммы актиномице тов способны в той или иной степени образовывать антибиотические вещес тва и в лабораторных условиях. Макаровская (1956) и Егоров с сотр. (1960) установили, что продукты жизнедеятельн ости некоторых микроорганизмов способствуют проявлению антибиотичес ких свойств у так называемых неактивных штаммов актиномицетов; они такж е вызывают усиление уже ранее определенных антагонистических свойств актиномицетов. Гаузе (1968), Davies, Williams (1970) и другие авторы, применяя при поисках продуцентов антиби отических веществ новые тест-организмы (например, штаммы микробов с дефе ктом окисления, актиномицеты), а также используя метод выращивания актин омицетов на средах, содержащих некоторые антибиотики, получали ранее не известные антибиотические вещества с ценными свойствами (например, со с войствами антиметаболитов и др.). Наконец, сторонники второй концепции основываются на том, что антибиоти ческие вещества в почве быстро инактивируются, а поэтому не могут играть какой-либо биологической роли. Действительно, многие антибиотики, искусственно внесенные в почву, дово льно быстро в ней исчезают. Известно также, что многие антибиотики при те х же условиях могут сохраняться в почве довольно длительное время (до не скольких недель). При рассмотрении вопроса о биологической роли антибиотиков, образуемы х микроорганизмами в естественных местах обитания, в особенности в почв е, следует иметь ввиду, что в почве микроорганизмы расселяются не диффуз но, а живут отдельными колониями (Красильников, 1936, 1951; Новогрудский, 1936, 1949). Существенное значение приобретает факт адсорбции микроорганизмов и пр одуктов их жизнедеятельности, в том числе и антибиотиков, на частицах по чвы (Звягинцев, 1973). В естественных местах обитания (почва) микроорганизмов происходит своеобразная иммобилизация клеток и образующихся продукто в метаболизма (антибиотиков, ферментов, токсинов и др.), что играет огромну ю роль в проявлении биологической активности у микроорганизмов. Красильниковым было показано, что в тех местах, где имеется больше орган ических остатков, обильнее развиваются микробы и образуемые ими очаги и меют большие размеры. Обычно такое развитие микроорганизмов наблюдает ся в порах между твердыми частицами почвы или на частицах почвы. При развитии микробного очага, который может состоять из представителе й одного или нескольких (не антагонистических) видов, образуются продукт ы жизнедеятельности. в том числе и антибиотические вещества, которые диф фундируя в соседние поры, могут играть там важную биологическую роль. Итак, антибиотики могут образовываться и образуются при развитии микро организмов в естественных местах их обитания (почва) без внесения туда д ополнительных питательных веществ. Образовавшиеся в почве антибиотики в зависимости от их химического стр оения способны сохраняться там определенное время и проявлять свое био логическое действие. Положения, из которых исходят противники активной биологической роли а нтибиотиков. имеют серьезные возражения. Они не могут ни в какой степени поколебать единственно правильный взгляд от активной биологической ро ли антибиотиков. развиваемый нашими микробиологами и поддержанный ряд ом зарубежных исследователей, рассматривающих образование антибиотич еских веществ как средство приспособления, выработавшееся в процессе э волюционного развития организмов. Разумеется, биологическую роль подробно можно выяснить лишь при деталь ном изучении отдельных веществ. установлено, например, что некоторые ант ибиотики оказываются довольно вредными продуктами жизнедеятельности для собственных продуцентов. Так, флавинин, образуемый грибом Aspergillus flavipes, под авляет развитие собственного продуцента в концентрации 1,25 мкг/мл, а антиб иотик пиоцианин играет активную роль в окислительно-восстановительном процессе бактерий, образующих это вещество. Однако любое детальное изучение биологической роли того или иного анти биотика может подтвердить лишь вывод о том, что это вещество не может быт ь случайным продуктом обмена, а есть результат метаболизма, появившегос я в процессе эволюции продуцента. III. Общие сведения о дейс твии антибиотиков. 1. Классификация антибиот иков. К настоящему времени описано около 3000 антибиотических веществ. разобрат ься в таком количестве антибиотиков возможно только при соответствующ ей классификации, распределении их в определенном порядке. Сложилось несколько подходов к классификации антибиотиков, причем они определяются, главным образом. Профессиональными интересами ученых. Та к, для биологов, изучающих организмы - продуценты антибиотических вещест в, условия образования этих соединений и другие, типичные для этой групп ы ученых, проблемы наиболее приемлемой классификацией антибиотиков бу дет такая, в основу которой положен принцип биологического происхожден ия антибиотиков. Для специалистов, изучающих вопросы механизма физиоло гического действия антибиотиков, наиболее удобным принципом классифик ации антибиотических веществ, естественно, будут признаки их биологиче ского действия. Для химиков, изучающих детальное строение молекул антиб иотиков и разрабатывающих пути их химического синтеза, приемлемой буде т классификация, основанная на химическом строении антибиотиков и т.д. I. Классификация антибиоти ков по их биологическому происхождению. 1. Антибиотики, образуемые м икроорганизмами, относящимися к ряду Eubacteriales. А. Образуемые представи телями рода Pseudomonas: Пиоцианин - Ps. aeruginsa, Вискозин - Ps. viscosa Б. Образуемые представи телями родов Micrococcus, Streptococcus, Diplocoooccus, Chromobacterium, Escherichia, Proteus: Низин - Str. lactis Дипломицин - Diplococcus X-5 Продигиозин - Chromobacterium prodigiosum (serratia, marcescens) Колиформин - E. coli Протаптины - Pr. vulgaris. В. Образуемые бактериям и рода Bacillus: Грамицидины - Bac. brevis Субтилин - Bac. subtilis Полимиксины - Bac. polymyxa Колистатины - неиндентифицированная споровая аэробная палочка. 2. Антибиотики, образуем ые микроорганизмами, принадлежащими к ряду Actinomycetales: стрептомицин - Act. streptomycini, тетрациклины - Act. aureofaciens, Act. rimosus, новобиоцин - Act. spheroides, актиномицины - Act. antibioticus и др. 3. Антибиотики, образуем ые несовершенными грибами: пенициллин - Penic. chrysogenum гризеофульвин - Penic. griseofulnum трихоцетин - Tricholecium roseum 4. Антибиотики. Образуем ые грибами, относящимися к классам бизидиомицетов и аскомицетов: термофиллин - базидомиц ет Lenzites thermophila, лензитин - Lenzites sepiaria, хетомин - Chaetoomium cochloides (аскомицет). 5. Антибиотики, образуем ые лишайниками, водорослями и низшими растениями: усниновая кислота (биан )- лишайником, хлореллин - Chlorella vulgaris. 6. Антибиотики, образуем ые высшими растениями: алмицин - Allium sativum, рафанин - Raphanus sativum фитоалексины: пизатин в горохе (Pisum sativum), фазеолин в фасоли (Phaseolus vulgaris). 7. Антибиотики животного происхождения: лизоцим, экмолин, круци н (Tripanosoma cruzi), интерферон. II. Классификация антибиотиков по механизму из биологического действия. 1. Антибиотики, ингибирующи е синтез клеточной стенки (пенициллины, тацитрацин, ванкомицин, цефалосп орин, Д-циклосерин). 2. Антибиотики, нарушающие ф ункции мембран (альтомиицин, аскозин, грамицидины, кондицидины, нистатин , трихомицин, эндомицин и др.). 3. Антибиотики. Избирательн о подавляющие синтез (обмен) нуклеиновых кислот: а) подавляю щие синтез РНК (актиномицин, гризеофульвин, канамицин, неомицин, новобио цин, оливомицин и др.). б) подавляющие синтез ДНК (актидион, брунеомицин, митомицины, новобиоцин, саркомицин, эдеин и др.). 4. Антибиотики - ингибиторы с интеза пуринов и пиримидинов (азасерин, декоинин, саркомицин и др.). 5. Антибиотики, подавляющие синтез белка (бацитрацин, виомицин, канамицин, неомицин, тетрациклины, хл орамфеникол, эритромицин и др.). 6. Антибиотики, являющиеся и нгибиторами дыхания (антимицины, олигомицины, патулин, пиацианин, уснино вая кислота и др.). 7. Антибиотики - ингибиторы о кислительного фосфорилирования (валиномицин, грамицидины, колицины, ол игомицин, тироцидин и др.). 8. Антибиотики, обладающими антиметаболитными свойствами. Антибиотические вещества, образуемые не которыми актиномицетами и плесневыми грибами. Эти антибиотики выступа ют в качестве антиметаболитов аминокислот, витаминов, нуклеиновых кисл от. К числу антибиотиков-ан тиметаболитов относятся: фураномицин - антиметаболит лейцина; антибиот ик - антагонист метаболизма аргинина и орнитина, образуемый Act. griseovariabilis; антиб иотик - антагонист метионина и тиамина, выделенный из культуры Act. globisporus; анти биотическое вещество - антиметаболит аргинина, лизина или гистидина, син тезируемое Act. macrosporus (термофилл). 2. Единицы биологической активности. Выражение величин биологической активности антибиотик ов обычно производят в условных единицах, содержащихся в 1 мл раствора (ед/ мл) или в 1 мг препарата (ед/мг). За единицу антибиотической активности прин имают минимальное количество антибиотика, способное подавить развитие или задержать рост стандартного штамма тест-микроба в определенном объ еме питательной среды. Единицей антибиотической активности пенициллина считают минимальное количество препарата, способное задерживать рост золотистого стафилло кокка штамм 209 в 50 мл питательного бульона. Для стрептомицина единица активности будет иной, а именно: минимальное к оличество антибиотика, задерживающее рост E. сoli в одном миллилитре питате льного бульона. После того как многие антибиотики были получены в химическом чистом вид е, появилась возможность для ряда из них выразить условные единицы биоло гической активности в единицах массы. Установлено, что 1 мг чистого основания стрептомицина эквивалентен 1000 еди ницам биологической активности. Следовательно, одна единица активност и стрептомицина эквивалентна одному микрограмму (мкг) чистого основани я этого антибиотика. В связи с этим в настоящее время в большинстве случа ев количество стрептомицина выражают в мкг/мг или в мкг/мл. Чем ближе числ о мкг/мг в препаратах стрептомицина стоит к 1000, тем, следовательно, чище дан ный препарат, тем меньше он содержит балластных веществ. У таких антибиотиков, как карбомицин, эритромицин, новобиоцин, нистатин, трихотецин и некоторых других, одна единица активности эквивалентна ил и приблизительно эквивалентна 1 мкг вещества. Однако у ряда антибиотиков единица биологической активности значитель но отличается от 1 мкг вещества. Например, 1 мг чистого основания неомицина содержит 300 ед. активности. Поэтому 1 единица активности этого антибиотик а эквивалентна 3,3 мкг. Для бензилпенициллина 1 ед активности эквивалентна примерно 0,6 мкг, так как 1 мкг антибиотика содержит 1667 ед. (оксфордских). Для фу магиллина за единицу фагоцидного действия принято брать 0,1 мкг чистого в ещества. 1 единица бацитрацина эквивалентна 20 мкг вещества. Соотношение единиц биологического действия (ед.) некоторых стандартных антибиотиков и единиц их массы приведено в таблице 5. Таблица 5. Соотношение единиц дей ствия некоторых антибиотиков и единиц массы этих антибиотиков (по Герол ьд, 1966). Антиби отик - стандарт Ед/мг Единица массы Аль бомицин (сульфат) 700000 Нет Бац итрацин 52 Нет Эри тромицин (основание) 1000 1 мкг основания Хлортетрациклин (хлоргидрат) 1000 1 мкг чистого хлоргидрата Кар бомицин (основание) 1000 1 мкг основания Окситетрациклин (дигидрат) 925 1 мкг чистой безводной амфоте рной формы Пен ициллин (натриевая соль) 1667 0,587 мкг чистой кристаллической калиевой соли Полимиксин В (сульфат) 7200 Нет Саркомицин 12 Нет Тетрациклин (тригидрат) 890 1 мкг ч истой безводной амфотерной формы Стр ептомицин (сульфат) 800 1 мкг чистого основания Биомицин (сульфат) 745 1 мкг чистог о основания а) Пенициллин - антибиотик, образуемый филаментозным гриб ом. Огромная группа организмов, принадлежащих к грибам, обра зует большое число (около 400) разнообразных антибиотических веществ, отде льные представители которых завоевали всеобщее признание в качестве л ечебных средств. Основная же часть грибных антибиотиков не нашла еще пра ктического применения главным образом в силу своей высокой токсичност и. В медицинской и сельскохозяйственной практиках имеют значение огранич енное число антибиотиков, образуемых некоторыми видами грибов, а именно : пенициллин, фумагиллин и некоторые другие. Пенициллин (Penicillin). Известный английский бактериолог Александр Флеминг опу бликовал в 1929 г. сообщение о литическ ом действии зеленой плесени на стафиллококки. Флеминг выделил гриб, кото рый оказался Penicillium notatum, и установил, что культуральная жидкость этой плесени способна оказывать антибактериальное действие по отношению к патогенн ым коккам. Культуральная жидкость гриба, содержащая антибактериальное вещество, названо Флемингом пенициллином . Попытки Флеминга выделить активное начало, образуемое Penicillium, не увенчалос ь успехом. Несмотря на это, Флеминг указал на перспективы практического применени я обнаруженного им фактора. Спустя примерно десять лет после сообщения Флеминга Е. Чейн начал с конц а 1938 г. изучать пенициллин. Он был убе жден, что это вещество - фермент. В 1940 г . Флори и Чейн получили индивидуальное соединение пенициллина, который о казался не ферментом, а низкомолекулярным веществом. Об антагонистических свойствах зеленой плесени (Penicillium) было известно задо лго до наблюдений Флеминга. Следует указать, что еще в глубокой древност и индейцы из племени майя использовали зеленую плесень, выращенную на зе рнах кукурузы, для лечения ран. Философ, врач и естествоиспытатель Абу-Ал и Ибн-Сина (Авиценна) рекомендовал использовать плесень при гнойных забо леваниях. Ибн-Сина написал пятитомный "Канон врачебной науки", который был впервые переведен на латинский язык и издан в Европе через 400 лет после его смерти - в 1437 г. На русском языке "Канон" издан л ишь в 1960 г. Авиценна утверждал, что за разные заболевания вызываются невидимыми для глаза живыми возбудителя ми, которые могут передаваться от больного к здоровому через воздух и во ду. Заключение это сделано за 600 лет до изобретения микроскопа. В русской народной медицине с давних времен применялись для лечения ран присыпки, состоящие из зеленой плесени. В работах русских ученых Манассеина и Полотебнова в 1871 - 1872 гг. указывалось н а отношение Penicillium glancum к разным бактериям. Полотебнов впервые в научно-клинич еской обстановке изучил применение зеленой плесени, показав при этом пр актические ценные результаты. Манассеин установил, что молодая культур а плесени подавляет рост некоторых бактерий. В 1877 г. русский врач Лебединский доложил о подавлении плесенью б актерий желудочно-кишечного тракта. Английский физик Тиндаль описал в 1876 г . способность Penicillium подавлять бактерии, находящиеся в жидкости, но объя снял это явление чисто физическими причинами. Таким образом, приведенные данные показывают, что человечество на разны х уровнях своего развития знало о целебных свойствах зеленой плесени. Од нако, эти сведения носили разрозненный характер и касались лишь воздейс твия самого гриба на микроорганизмы. В то время не могло быть и речи о выде лении и изучении активного начала, образуемого плесенью. И лишь когда в 1940 г. Флори и Чейн получ или препараты (пенициллин) в очищенном виде, после этого появился широки й научный интерес к этому антибиотическому веществу. Изучение пенициллина в Советском Союзе было начато З. В. Ермольевой. В 1942 г. под руководством Ермольевой в лаборатории биохимии микробов Всесоюзного института экспериментальн ой медицины в Москве был получен первый отечественный пенициллин - круст озин, сыгравший огромную роль в спасении жизней воинов Советской Армии, раненных на полях сражений Великой Отечественной войны. В январе 1944 г. Москву посетила группа иностранных ученых, среди которых был профессор Флори, привезший с собо й английский штамм продуцента пенициллина. Сравнение двух штаммов (сове тского и английского) показало, что советский штамм образует 28 ед/мл, а анг лийский - 20 ед/мл (Ермольева, 1967). После того как было установлено, что пенициллин обладает мощными лечебн ыми свойствами, начались интенсивные поиски продуцентов этого антибио тика. В результате большого числа работ удалось установить, что пеницилл ин могут образовывать многие виды Penicillium (Penic. chrysogenum, Penic. bericompactum, Penic. nigricans, Penic. turbatum, Penic. steckii, Penic. corylophilum), а также некоторые виды Aspergillus (Asp. flavus, Asp. flavipes, Asp. janus, Asp. nidulans и др.). есть указания, что пеницилл ин образуется также термофильным организмом Malbranchia pulchella (см. Беккре, 1963). Первые выделенные из естественных субстратов штаммы Penicillium как наиболее а ктивные продуценты пенициллина образовывали не более 20 единиц (12 мкг) ант ибиотика на 1 мл культуральной жидкости. Даже промышленное производство этого ценнейшего препарата было начато при активности культуральной ж идкости не выше 30 мкг/мл или 50 ед/мл. насколько низка эта активность, можно с удить по тому факту, что в настоящее время в промышленных условиях получ ают культуральные жидкости с содержанием пенициллина более 15000 ед/мл, а от дельные штаммы способны синтезировать антибиотик в количестве до 25 тыс. ед/мл. Получение высоких выходов антибиотика достигнуто в результате изучени я условий его образования и селекции наиболее активных штаммов продуце нта пенициллина. б) Действие пенициллина на бактерии. Вопросу рассмотрения антибиотической активности пениц иллина в отношении ряда микроорганизмов уделено достаточно много вним ания. Установлено, что пенициллин оказывает антимикробное действие в от ношении некоторых грамположительных бактерий (стафиллококков, стрепто кокков, диплококков и некоторых других) и практически неактивен в отноше нии грамотрицательных видов и дрожжей. Высокие концентрации пенициллина (10 мг/мл) вызывают гибель клеток гаплои дного штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae и E. coli (Lingel, oltmanns, 1963). По характеру действия на микроорганизмы пенициллин является бактериос татическим и при определенных концентрациях бактерицидным антибиотик ом. Различные типы пенициллинов обладают различной степенью биологическо й активности. В особенности это различие заметно в опытах in vivo (таблица 8). Таблица 8. Сравнение биологическ ой активности различных типов пенициллинов в отношении некоторых микр оорганизмов в опытах in vivo. Тест - организм Относительная ак тивность Бензилпеницилли н (G) 2-пентилпенициллин (F) n-гептилпенициллин (K) Оксибензилпенициллин (Х) Spirochaeta novyi Pneumococcus типа 1 Strept. haemolitycus Strept. pyogenes Treponema pallidum 100 100 100 100 100 55 85 100 50 17 35 17 60 9 9 22 140 500 260 5 Как следует из данных таблицы, n-гептилпенициллин менее активен, чем оста льные типы пенициллинов. Это, по-видимому, связано с тем, что n-гептилпениц иллин значительно быстрее инактивируется в организме. Чувствительные к пенициллину микроорганизмы относительно легко и быст ро приобретают устойчивость к антибиотику. Так, Staph. aureus прекращает развитие при концентрации пенициллина 0,05 - 0,06 ед/мл в среде, но уже при 20 последователь ных пересевах с постепенно увеличивающимися концентрациями антибиоти ка устойчивость стафилококка возрастает в 700 раз, т.е. для остановки роста бактерии требуется концентрация пенициллина равная 42 ед/мл, а после 40 пер есевов его устойчивость возрастает более чем в 5500 раз. Микроорганизмы, приобретшие устойчивость к одному из типов пенициллин а, как правило, резистентны и к другим типам пенициллина. У некоторых бактерий устойчивость к пенициллинам сопровождается спосо бностью образовывать пенициллиназу. В ряде случаев микроорганизмы с приобретением устойчивости к пеницилл ину теряют вирулентность. Но вирулентность восстанавливается после не скольких пассажей через животных и при этом сохраняется резистентност ь к антибиотикам. Таблица 9. Различные типы пеницил линов и строение их радикалов Название пенициллина Строение радикала (R) Общепринятое условное Бензилпенициллин n-Оксибензилпенициллин 2-Пентенилпенициллин n-Гептилпенициллин n-Амилпенициллин Феноксиметилпенициллин Аллилмеркаптометилпенициллин G X F K ДигидроF V O Таблица 10. Пенициллины, полученные в результате смешанного (биологического и химического) синтеза (полусин тетические пенициллины). Тип пен ициллина Общепринятое название Строение радикала Кислотоустойчивые препараты -Феноксиэтилпенициллин Фенетициллин -Феноксипропилпенициллин Пропициллин -Феноксибензилпенициллин Фенбенициллин Пенициллиназоустойчивые препараты 2-6-диметоксифенилпенициллин Метициллин Кислото- и пенициллиназаустойчивые препараты 5-метил-3-фенил-4-изоксиазолилпенициллин Оксациллин 2-этокси-1-нафтилпенициллин Нафц иллин 2-би фенилпенициллин Дифенициллин 3-О-х лорфенил-5-метил-4-изооксазолил Клоксациллин Кислотоустойчивые и широкоспектровые препараты -d-(-)Аминобензилпеницилл ин Ампициллин а) Стрептомицин (Streptomycin) - аминогликозидный антибиотик. В группу аминогликозидных антибиотиков включаются биологически актив ные соединения, содержащие в молекулах гликозидные связи. К этим антибио тикам относятся стрептомицины, неомицины, канамицины, гентамицины, гигр омицин и некоторые другие вещества. Антибиотики этой группы имеют большое практическое значение, многие из них применяются в медицинской практике. Актиномицет, образующий стрептомицин, впервые выделен в лаборатории ми кробиологии Раттерского университета в 1943 г. Первое сообщение о выделении антибиотика было сделано Шатц, Буги и Ваксм аном в январе 1944 г. Антибиотик получи л название стрептомицин (от родового названия актиномицетов Streptomyces), а орга низм, образующий этот антибиотик, был определен как Streptomyces griseus. Стрептомицин образуют не только штаммы Act. Streptomycini, но и другие актиномицеты - Act. bikiniensis, Act. raneus, Act. humidus, Act. reticuli, Act. griseocarneus, Act. mashuensis. Актиномицет, продуцирующий стрептомицин, как и другие виды актиномицет ов, может размножаться с помощью спор или отдельных участков мицелия. Культура актиномицетов вообще и Act. streptomycini в частности, весьма вариабельны. Н а изменчивость актиномицетов оказывают влияние условия их культивиров ания и, в особенности, состав среды. На более богатых по составу средах наб людается более быстрая изменчивость актиномицетов. В результате изменчивости продуцента стрептомицина нередко появляютс я аспорогенные формы, т.е. формы, лишенные воздушного спороносного мицел ия. Как правило, эти варианты или вообще неактивны, или же образуют незнач ительное количество стрептомицина. Снижение образования антибиотика наблюдается и у вариантов с усиленно й стимуляцией. Образующиеся в результате изменчивости Act. streptomycini варианты могут отличатьс я от исходной культуры окраской воздушного мицелия; последний может быт ь белым, беловато-палевым, светло-серым, серым и серо-зеленым. Различные ва рианты отмечаются друг от друга по величине и форме колоний. Встречаются так же формы, неспособные образовывать стрептомицин. Однако установить какие-либо цитологические различия между активными и неактивными вари антами не удалось. б) Антибиотические свойства стрептомицина. По отношению к стрептомицину все микроорганизмы условно можно разделить на три группы (Шемякин, Хохлов и др., 1961). 1. Весьма чувствительные ми кроорганизмы, которые подавляются в большинстве случаев при концентра ции стрептомицина 10 мкг/мл. союда можно отнести организмы, принадлежащие к следующим родам: Bacillus, Bordetella, Brucella, Klebsiella, Mycobacterium, Bacteroidum и некоторые другие. 2. Умеренно чувствиетльные. Для подавления которых in vitro необходимо иметь концентрацию стрептомицина в пределах 10 - 100 мкг/мл. К этой группе относятся многие бактерии из родов Aerobacter, Corynebacterium, Diplococcus, Proteus, Staphylococcus, Strepticoccus, Vibrio. 3. Устойчивые формы микробо в, для подавления которых необходима концентрация антибиотика, превыша ющая 100 мкг/мл. сюда относятся виды Bacteroides, Clostridium, некоторые виды Proteus, многие виды гр ибов, дрожжей, риккетсий, вирусы. Итак, различные организ мы по-разному реагируют на присутствие в среде стрептомицина. Степень а нтимикробного действия антибиотика также различна в отношении различн ых видов организмов (таблица 11). Таблица 11. Антибиотическая актив ность стрептомицина in vitro. Микроорганизм Концентрация ст рептомицина (мкг/мл), вызывающее подавление Наиболее чувствительные штаммы Наиболеее устойчивые штаммы Большинство штаммов Aerobact. aerogenes Bac. anthracis Bac. megatherium Bac. subtilis Candida albicans Clostridium botulinum Corinebact. giphtheriae Diplococcus pneumniae E. coli Mycob. tuberculosis Proteus vulgaris Ps. aeroginosa Bact. thyphi Bact. dysenteriae Bac. cereus 0,300 0,250 0.250 0.056 - - 0.400 0.500 0.015 0.100 1.000 0,100 0,004 2,000 0,830 1000 10 4 128 - - 200 50 >1000 12,5 >1000 1000 20 8 2 25 5 2 25 Устойчивы >> 20 25 25 5 15 50 5 5 1 Наряду с тем, что стрептомицин подавляет рост многих видов микроорганиз мов, к нему довольно легко появляется устойчивость, возникают формы бакт ерий, резистентные к стрептомицину. По данным Прайса (Price et al., 1947), повышение ус тойчивости к стрептомицину в 1 000 раз возникает у золотистого стафилококк а всего лишь через три пассажа на бульоне с возрастающими концентрациям и антибиотика, а у Bact. typhi повышение устойчивости в 22 600 раз происходило через 14 пассажей. Образование устойчивых форм бактерий к стрептомицину происходит также in vivo. Приобретенная к стрептомицину устойчивость сохраняется у организм ов довольно длительное время. С возникновением устойчивости появляютс я некоторые изменения в характере обмена веществ. так, у резистентного к стрептомицину хромогенного микроорганизма происходит резкое изменен ие его окраски. Стрептомициноустойчивая форма синегнойной палочки тер яет способность образовывать пигмент, изменяются и некоторые другие ст ороны обмена. Однако у устойчивых и чувствительных к стрептомицину штаммов бактерий не наблюдается заметных различий в вирулентности. В ряде случаев под действием стрептомицина в опытах in vitro возникают не толь ко устойчивые к нему штаммы, но и зависимые от стрептомицина формы, спосо бные развиваться только в присутствии данного антибиотика. Описаны случаи, когда штаммы менингококка, Mycob. ranae и другие микроорганизмы р азвиваются лишь на среде, содержащей от 100 до 150 мкг/мл стрептомицина. Стрептомициноустойчивые и зависимые от стрептомицина штаммы обычно по лучаются из чувствительных форм микроорганизмов. Соотношение между чу вствительными, устойчивыми и зависимыми от стрептомицина штаммами изо бражено на рисунке. 3. Поглощение антибиотиков клетками микробов. Первый этап во взаимодействии микроорганизмов с антибио тиками - адсорбция его клетками. Пасынский и Косторская (1947) впервые устано вили, что одна клетка Staphylococcus aureus поглощает примерно 1 000 молекул пенициллина. В п оследующих исследованиях эти расчеты были подтверждены. Так, по данным М ааса и Джонсона (1949), приблизительно 2 10 -9 М пенициллина поглощается 1 мл стафилококков, причем о коло 750 молекул этого антибиотика необратимо связываются одной клеткой микроорганизма без видимого эффекта на ее рост. Игл с сотрудниками (1955) определил, что при связывании бактериальной клетк ой 1 200 молекул пенициллина угнетения роста бактерий не наблюдается. Угнет ение роста микроорганизма на 90 % наблюдается в тех случаях, когда клеткой будет связано от 1 500 до 1 700 молекул пенициллина, а при поглощении до 2 400 молеку л на клетку происходит быстрая гибель культуры. Установлено, что процесс адсорбции пенициллина не зависит от концентра ции антибиотика в среде. При низких концентрациях препарата (порядка 0,03 м кг/мл) он может весь адсорбироваться клетками, и дальнейшее повышение ко нцентрации вещества не поведет к повышению количества связанного анти биотика. Имеются данные (Купер, 1954) о том, что фенол препятствует поглощению пеницил лина клетками бактерий, однако он не обладает способностью освобождать клетки от антибиотика. Пенициллин, стрептомицин, грамицидин С, эритрин и другие антибиотики свя зываются различными бактериями в заметных количествах. Причем антибио тики-полипептиды адсорбируются микробными клетками в большей степени, чем, например, пенициллины и стрептомицин. Булгакова и Полин (1966) установили, что грамицидин С адсорбируется как чувс твительными, так и устойчивыми к нему бактериями. Причем адсорбция этого антибиотического вещества бактериями происходит сразу же после внесе ния антибиотика в суспензию клеток и достигает значительных величин (до 500 мкг/мг сухой биомассы). В присутствии положительно заряженных ионов (Na + , K + , NH + , Mg 2+ ), а также при рН среды, равном 4, поглощение грамицидина С бактериальными клетками заметно снижается. Адсорбированный чувствительными клетками грамицидин С прочно связыва ется с бактериями и снимается с них лишь при длительной экстракции подки сленной спиртово-водной смесью. У устойчивого к антибиотику штамма E. coli при промывании клеток раствором NaCl удается удалить лишь до 30% адсорбированного грамицидина С. Ванкомицин, образуемый Actinomyces orientalis, необратимо и относительно быстро связыва ется клетками бактерий, чувствительными к нему. По данным Reunolds (1966), при конце нтрации антибиотика в среде, равной 30 мкг/мг массы сухих бактерий, около 90% ванкомицина связывается с бактериями. Показано, что максимальное связы вание ванкомицина бактериальными клетками достигает величин 10 7 молекул антибиотика на клетку. Связанные клеткой антибиотики могут проявлять двоякого рода действия: содной стороны, некоторые из них могут действовать как поверхностно-акт ивные вещества, а с другой стороны, антибиотики, проникая вглубь клетки, н арушают отдельные стороны метаболизма организма. Гибель клеток под воздействием поверхностно-активных антибиотиков мож ет быть связана с нарушением механизма осмотического равновесия, имеющ его место на поверхности микробной клетки; она может также наступить в р езультате способности этих веществ, скапливающихся у поверхности разд ела жидкая фаза - микробная клетка, связываться с компонентами клеток. Экспериментальные данные в этом отношении показали, что изменения в рег улировании осмотического давления сопровождаются разрушением систем клеточной стенки микроба. Нарушение проницаемости клеточной стенки яв ляется или результатом прямого вливания антибиотических веществ, или ж е может быть результатом вторичных процессов. Действие антибиотиков как поверхностно-активных веществ может вызыват ь диссоциацию белка с отделением от него простетических групп или нукле иновых кислот. Эти вещества могут также приводить к денатурации белков и , таким образом, непосредственно влиять на энзиматические системы, связа нные с клеточной стенки (инвертазы, фосфатазы, различные дегидрогеназы, цитохромные системы). Таким образом, если антибиотик обладает способностью нарушать системы, регулирующие осмотические свойства клеточной стенки, иными словами, ес ли антибиотик выступает в качестве поверхностно-активного соединения, то он может оказывать бактерицидное действие. К числу антибиотических веществ, механизм действия которых связан с пов ерхностно-активными свойствами, следует отнести грамицидин С, тироциди н, полимиксины, а также тетрациклины, если последние применяются в конце нтрациях, во много раз превышающие бактериостатические. Вместе с тем, как уже отмечалось выше, антибиотики, попадая в микробную кл етку, могут нарушать отдельные этапы метаболизма организма, подавлять н екоторые звенья в цепи биохимических процессов. Подавление отдельных звеньев в биохимической цепи превращений может п роисходить как путем необратимого связывания антибиотиком одного из к омпонентов реакции, так и в результате конкурентного подавления биолог ически важных метаболитов клетки. Если в организме или в среде одновременно присутствуют два вещества - об ычный для организма субстрат S и ингибитор I, сходный по структуре с субстр атом и оба они могут вступать в связь с энзимом (Е), как показано в уравнени ях (1 и 2): S+E SE (1) I+E IE (2) то мы имеем типичный пример конкурентного подавления или конкурентног о обмена. В качестве примера конкурентного обмена можно привести участие сульфа ниламина как антиметаболита n-аминобензойной кислоты в витамине фолиев ой кислоты. Как только сульфаниламид, в случае его присутствии в клетке, включается в фолиевую кислоту вместо ПАБК, ферментативные функции бактериальной к летки блокируются. Это в свою очередь приводит к нарушению механизма обм ена веществ клетки и, вслед за этим, к ее гибели. В качестве примера конкурентного действия антибиотика при биосинтезе белка можно назвать пуромицин. Этот антибиотик образуется культурой Act. alboniger. По химическому строению пуромицин - нуклеозидное производное 6-диме тил-амино-9(3'-пара-метокси-L-фенилаланил-амино-3'-дезокси- -D-рибофуранозил)-пурина. Пуромицину соответствует следующая формула: Анализ химической структуры пуромицина показал, что он представляет со бой структурный аналог 3-конечной аминоацилированной группировки тРНК. Суммирование имеющихся данных по механизму биологического действия пу ромицина дает возможность заключить, что оно выступает в качестве конку рентного аналога аминоацил-тРНК, заменяя последнюю в реакции с пептидил- тРНК, что приводит к освобождению пептидила в виде пептидил-пуромицина и з рибосомы и, таким образом, прекращая синтез белка (Спирин, Гаврилова, 1971). Есть указания на то, что окситетрациклин выступает в качестве конкурент ного ингибитора дифосфопиридиннуклеотида при действии его на E. coli. Установлено, что актитиазовая кислота (антибиотик актино мицетного происхождения) - конкурент витамина биотина, сходного по строе нию с кислотой. Вместе с тем необходимо подчеркнуть, что явление конкуре нтного ингибирования не имеет широкого распространения в механизме де йствия антибиотических веществ. Существует гипотеза, впервые высказанная Ч. Кэвеллито, что биологическа я активность многих антибиотиков (бензилпенициллина, стрептомицина, ал лицина, пиоцианина и др.) обусловлена тем, что они вступают в связь с сульф гидрильными группами (- SH ) ферментов , превращая их в неактивные вещества, но такая точка зрения на механизм де йствия антибиотиков не была строго обоснованной. Однако появились указания ( Gross, Morell, 1967) на то, что механизм биологического действия антибиотика низина связан с взаимодействием его с сульфгидрильными группами метаболитически важн ых ферментов (глютатин, ацетилкоэнзим А). V . Симбиотические связи бактер ий с бобовыми. Симбиотические связи бактерий с бобовыми благодаря широ кому использованию их в полевом растениеводстве, луговодстве и, частичн о, в лесоводстве, изучались весьма интенсивно. Установлено, что не все вид ы бобовых имеют на корнях клубеньки. При обобщении имеющихся данных, ока залось, что из 1285 изученных бобовых (в широком понимании этой группы) клубе ньки отсутствовали у 166 (13,0%), в том числе у 77,4% изученных цезальпиновых, у 13% мимо зовых и 7% - мотыльковых ( Fabaceae) (E. Allen, O. Allen, 1961). Отсутствие клубеньков на корнях не всегда означает неспособность данн ого вида бобовых к симбиозу с клубеньковыми бактериями, иногда это проис ходит из-за местных условий, неблагоприятных для образований клубенько в, или по тому, что в почве нет соответствующих рас клубеньковых бактерий. В то же время наличие клубеньков на корнях бобовых не всегда указывает н а активную фиксацию азота клубеньковыми бактериями. Установлено, что мн огочисленные мелкие белые клубеньки на боковых корнях травянистых боб овых образованы малоэффективной расой клубеньковых бактерий, неспособ ной связывать атмосферный азот или фиксирующий его в незначительном ко личестве, в то время как крупные, окрашенные в розовый цвет клубеньки на с тержневом корне обычно характеризуют энергично идущий процесс усвоени я азота. А процесс естественного отбора и сопряженной эволюции возникло много р ас клубеньковых бактерий, способных выступать в эффективные симбиотич еские отношения с определенными видами бобовых. Значение отдельных рас клубеньковых бактерий давно было выяснено для возделываемых видов боб овых, и, в связи с необходимостью в ряде случаев вносить бактериальное уд обрение (нитраты), содержащие соответствующие клубеньковые бактерии, он и были разделены на ряд групп в соответствии с пригодностью для определе нных видов бобовых. Принято выделять следующие расы клубеньковых бакте рий по их способности к эффективному симбиозу со следующими определенн ыми видами или группами видов бобовых: 1) горох, вика, кормовые бобы; 2) фасоль; 3) соя; 4) люпин, серад елла; 5) вигна, магу, арахис; 6) нуж ; 7) клевер; 8) люцерна, донник, пажитник; 9) эспарцет; 10) лядвенец (Вознесенская, 1969). На самом деле число рас клубеньковых бактерий значительно больше. Выявлена специфичность рас клубеньковых бактерий в пределах уже устан овленных групп, в частности в "клеверной группе", например у клевера несхо дного, клубеньки возникают лишь при участии особой расы клубеньковых ба ктерий. Эта специфичность проявляется также в значительных различиях фиксируе мого ими азота в зависимости от вида клевера, с которым они связаны. В табл ице 12 показано, что наиболее эффективные для клеверов лугового и ползуче го расы клубеньковых бактерий для клевера подземного были наименее эфф ективными, и наоборот. Расы, обеспечивающие фиксацию очень значительных количеств азота при инокуляции ими клевера подземного, в симбиозе с клев ером луговым и ползучим фиксировали незначительное количество азота. В се это обусловило выделение среди "клеверной группы" трех подгрупп: А - кл евера ползучий, луговой, розовый, простертый, зямляничный; В - подземный, и нкармантный, скученный, александрийский; С - несходный. Три подгруппы выд еляют и среди "люцерновой группы". Таблица 12. Способность отдельных рас клубеньковых бактерий фиксировать атмосферный азот при симбиозе с различными видами клевера (содержание азота в мг на 8 растений; по White et al., 1953) . Виды клевера Расы бактерий №1 №16 №8 №13 Клевер луговой Клевер ползучий Клевер подземный 51,4 59,6 7,9 34,3 46,5 7,2 2,8 10,5 138,5 1,9 7,0 153,5 Возможность фиксации атмосферного азота клубеньковыми бактериями и ко личество фиксированного азота определяются также средой - отсутствием условий, ограничивающих жизнедеятельность бактерий и бобовых растений (высокая кислотность, высокое содержание растворимого алюминия, плохая аэрация и др.), а также достаточной обеспеченностью фосфором, калием, каль цием, молибденом, серой, кобальтом, водой и др. Фиксация азота клубеньковы ми бактериями снижается по мере увеличения содержания в почве раствори мых форм азота, доступных для бобовых. Большое значение имеют условия ос вещения, поскольку клубеньковые бактерии получают от бобового углевод ы, необходимые им как энергетический материал для фиксации азота, и пото му зависят от фотосинтеза. При затенении резко снижается не только число клубеньков, но и их размеры, а также предельная глубина их образования. Клубеньковые бактерии более экономно используют энергию, необходимую для фиксации азота, затрагивая 3-4 г уг леводов на 1 г азота, в то время как св ободноживущие азотфиксирующие бактерии затрачивают 50 - 100 и более граммов на фиксацию 1 г азота. Это связано с т ем, что у свободноживущих азотфиксаторов фиксация азота происходит в пр оцессе их роста, и потому большое количество энергии потребляется на это т рост. Кроме того, в целях создания благоприятных условий для активност и нитрогеназы - фермента, участвующего в фиксации азота, для снижения пар циального давления кислорода усиливается дыхание, что связано с затрат ой энергии. Эти расходы энергии отсутствуют у клубеньковых бактерий. Пос кольку фиксация азота происходит в бактероидах, клетках, прекративших р ост, а внутри клубеньков создаются благоприятные условия для активност и нитрогеназы. В том числе сниженное содержание кислорода. Очень существ енно то, что фиксируемый клубеньковыми бактериями азот на 90 - 95% передается бобовым растениям. Бобовые, получая связанный азот от клубеньковых бакт ерий, не зависят или мало зависят от обеспечения минеральным азотом почв ы и потому могут успешно произрастать совместно с другими растениями на почвах, бедных доступными формами азота. Количество азота, фиксируемого клубеньковыми бактериями бобовых, силь но варьирует от фитоценоза к фитоценозу, а в пределах конкретных фитоцен озов может изменяться от года к году. Оно определяется участием бобовых в фитоценозах, условиями среды и эффективностью соответствующих рас ба ктерий. Для некоторых лугов в Новой Зеландии с травостоями, где преоблад ает клевер, отмечена фиксация азотом до 450 - 550 кг/га. Фиксация азота в столь больших количествах возможна лишь в условиях иск лючительно благоприятного климата Новой Зеландии (равномерное распред еление большого количества атмосферных осадков, отсутствие засух, благ оприятные тепловые условия, возможность вегетации в течении всего года ), когда растения в результате применения известкования и внесения удобр ений произрастают в условиях благоприятных для них реакций почвы и обес печены необходимыми зольными элементами. Однако, даже в Новой Зеландии с реднее количество азота, фиксируемого клубеньковыми бактериями бобовы х, входящих в состав луговых травостоев, составляло 185 кг/га (колебания дос тигали 85 - 340 кг/га от луга к лугу и в среднем от года к году 145 - 225 кг/га). В годы с бо лее влажным и прохладным летом оно было выше, а в годы с сухим, более теплы м летом - ниже. Данные о сходных количествах фиксируемого азота клубеньк овыми бактериями бобовых получены для Ирландии (в среднем 160 кг/га) и Южной Англии (250 - 270 кг/га) и относятся к лугам, созданным путем посева трав. На приро дных лугах нашей страны, в травостоях которых бобовые принимают меньшее участие, количество азота, фиксируемого клубеньковыми бактериями, как п равило, не более 30 - 50 кг/га. В посевах многолетних трав (бобовых или бобовых в смеси со злаками) количество фиксируемого азота обычно не превышает 200 кг /га. Давно замечено, что бобовые благоприятно влияют на произрастающие совм естно с ними злаки и другие растения, в том числе увеличивают содержание азота в их органах. На основе результатов вегетационных опытов Виртанен пришел к выводу, что такое воздействие связано с прижизненными выделени ями из корней бобовых в почву значительных количеств азотсодержащих со единений. Проверка результатов опытов Виртанена, проведенная в СССР, Шот ландии, США, Австралии, не подтвердила его выводов. Оказалось, что в услови ях нормального фотосинтеза бобовые не выделяют в почву сколь-либо замет ных количеств азотистых соединений. Лишь с ослаблением фотосинтеза (при сниженной интенсивности освещения), когда растения не располагают дост аточным количеством углеводов и органических кислот для связывания вс его фиксируемого клубеньковыми бактериями азота, часть его может выдел яться в почву. Благоприятное влияние бобовых на другие растения можно об ъяснить поступлением в почву азота с их отмирающими органами, у древесны х растений - в основном с опадом, у травянистых (в фитоценозах, используемы х как сенокосы и пастбища) - преимущественно с отмирающими подземными ор ганами. На пастбищах злаки получают азот бобовых из экскрементов скота, поедающих их. Так как бобовые, если фиксация азота клубеньковыми бактери ями идет достаточно активно, не поглощают из почвы азот или поглощают ег о в незначительных количествах, на долю небобовых растений остается бол ьше доступных форм азота, и потому они растут лучше с бобовыми, чем в их от сутствие. Совместное произрастание бобовых с небобовыми растениями ок азывает благоприятное влияние на фиксацию азота клубеньковыми бактери ями, так как в результате поглощения небобовыми азота из почвы содержани е его доступных форм снижается до незначительных величин, что стимулиру ет фиксацию азота. Биологическая фиксация азота. Баланс доступного растениям азота на Земном шаре поддерж ивается за счет деятельности особой группы организмов - так называемых а зотфиксаторов. В экономике природы процессам биологической фиксации а зота принадлежит исключительная роль, которая по значению вполне равно значна процессу фотосинтеза. В группу азотфиксаторов входят свободно живущие организмы, а также орга низмы, способные существовать лишь в симбиозе с другими видами. Первой в ряду свободно живущих азотфиксаторов открыта анаэробная спор оносная бактерия Clostridium pasterianum . Это откры тие принадлежит русскому ученому С. Н. Виноградскому (1893). Через 8 лет (1901) М. Бей еринком был открыт аэробный микроорганизм, названный азотбактером ( Azotobacter) . Оба организма являются сапрофитами. Для восстановления молекулярного азота они используют энергию, получаемую ими при окислении глюкозы и дру гих органических соединений (например, маннита). На каждый грамм сброжен ной глюкозы азотбактер накапливает около 15 мг связанного азота, тогда ка к Clostridium - не более 2 -3 мг. Выделив азотбактер, Бейринк обратил внимание на большое сходство свойс тв этого микроорганизма со свойствами фотосинтезирующей бактерии Chromatium . В настоящее время установлено, что способность фиксировать азот широко распространена у различных видов бактерий. Эта функция свойственна, в частности, сульфатредуцирующим бак териям, развитие которых осуществляется в анаэробных условиях. Способн остью ассимилировать молекулярный азот обладает также пурпурная бакте рия Rhodospirillum rubrum (Чест и Камен). К свободно живущим азотфиксаторам принадлежат также синезеленые водор осли ( Nostoc, Phormidium) . Осуществляемая ими ас симиляция молекулярного азота имеет в особенности большое значение дл я пресноводных бассейнов, для развития растений риса на заливаемых водо й плантациях и т.п. Благодаря своей крайне четко выраженной автотрофност и синезеленые водоросли способны заселять голые скалы; они развиваются на вулканической пыли, пензе и т.д. Общий уровень азотфиксирующей активности свободно живущих организмов невысок. В зависимости от вида и условий существования они накапливают в год от 10 до 30 - 40 кг связанного азота н а гектар. Основную роль в пополнении убыли запасов связанного азота выполняют ба ктерии - симбиоты, в первую очередь Bacterium radicicola. В настоящее время известно, что кроме бобовых имеется еще около 100 видов других растений, на корнях которых развиваются специфические дл я каждого растения клубеньковые бактерии. Химическая природа взаимодействия бобовых с клубеньковыми бактериями изучена неполно, в связи с чем ряд факторов в этой области не находит еще о бъяснения. Например, установлено, что клубеньковые бактерии способны во сстанавливать молекулярный азот только при взаимодействии с корнями б обовых растений. Этой способности лишены бактерии, культивируемые в иск усственных средах. Клубеньковые бактерии развивались на корнях бобовы х растений и в том случае, если последние служили подвоем, а привоем - любо е другое растение. В тех вариантах, где бобовые служили привоем, а подвоем - различные небобовые растения, бактерии не развивались. Все это показывает, что тканям бобовых должны быть свойственны определе нные особенности. Представитель экспериментального направления в физиологии растений. З амечательный французский ученый Жан Батист Буссенго первый широко исп ользовал в своих исследованиях по питанию метод выращивания растений в вегетационных сосудах. Точные эксперименты позволили Буссенго опровер гнуть представления Либиха об азотном питании растений. Буссенго первы й отметил специфические особенности бобовых растений как азотсобирате лей, а вслед за тем Гельригель открыл, что эту роль бобовые выполняют в сим биозе с клубеньковыми бактериями. Большое значение имели исследования русского ботаника М. С. Воронина, который первый сформулировал представл ение о клубеньках как о болезненных образованиях, возникающих в результ ате заражения корней. Симбиоз корней высших растений с грибами носят название микориз, симбио зы с бактериями - бактериориз. В зависимости от формы симбиотрофизма раз личают микоризы экто- и эндотрофные. Первые развиваются на поверхности к орней, вторые проникают внутрь ткани. Классическим примером бактериотр офизма является взаимодействие бобовых растений с клубеньковыми бакте риями. Исследования микробиологов, проведенные в последние годы, значительно расширили представления о значении симбиотрофизма в процессах корнево го питания растений. Число микробных телец, приходящихся на 1 г почвы, исчисляется многими сотнями миллионов и даже миллиардами. Н екоторое представление об этом дают цифры, заимствованные из работ Н. А. К расильникова: Число микроорганизмов в 1 г почвы Вес микробных тел в пахотн ом слое, кг/га Бакте рии Грибы Актиномицеты Водоросли 1 10 9 1 10 5 1 10 5 1 10 3 600 60 8 160 Почвенные микроорганизмы сосредоточены в основном в зоне размещения к орней. Важное значение азотфиксирующих бактерий диктует необходимость обесп ечения наиболее благоприятных условий для их развития и физиологическ ой деятельности. Один из путей решения этой важной практической задачи состоит в увеличе книи численности микробного населения почвы с помощью бактериальных у добрений. Данное мероприятие в равной степени оправдывает себя в отношении как кл убеньковых бактерий, так и свободно живущих азотфиксаторов. Дело в том, что даже при длительной культуре бобовых растений, почвы, заня тые ими содержат нередко недостаточное количество Bact. radicicola , в результате чего на корнях образуетс я мало клубеньков, либо они не образуются вовсе. В этих условиях бобовые н е обогащают почву азотом, а аналогично другим растениям истощают имеющи еся в ней азотистые соединения. Искусственное обогащение почвы клубеньковыми бактериями оказывает ве сьма благоприятное влияние на азотный баланс почвы и на развитие бобовы х и других растений севооборота. Препарат клубеньковых бактерий, которы й называется нитрагином, вносят вместе с с еменами бобовых при посеве. При приготовлении нитрагина следует учитыв ать специфичность клубеньковых бактерий. VI. Воздействие внешних факторов на рост и развитие растений. Измерение скорости рос та, проведенное немецким физиологом Ю. Саксом (1872), позволило установить оп ределенные закономерности. В начальный период темпы роста, как правило, низкие. Затем рост усиливается и идет с большой скоростью (период большо го роста), а затем снова замедляется. В результате рост (увеличение размер а) клетки, органа или организма в целом может быть изображен в виде Ы-образ ной кривой. Эта закономерность имеет общебиологическое значение и спра ведлива по отношению к росту всех живых организмов, включая и человека. Анализируя полученную кривую, можно ее разделить на 3 участка: 1) фаза, когд а рост изменяется экспоненциально (логарифмически); 2) фаза, когда рост изм еняется линейно; 3) фаза торможения роста. Именно период, когда рост прямо ( линенйно) возрастает, называется периодом большого роста. Влияние внешних условий на рост. Внешние условия оказывают на рост как прямое, так и косвен ное влияние. Последние связаны с тем, что скорость роста зависит от интен сивности всех остальных физиологических процессов, воздушного и корне вого питания, снабжения водой, напряженности процессов обмена веществ и энергии. В этой связи влияние внешних условий может сказаться на интенси вности роста через изменения любого из указанных процессов. При этом дал еко не всегда причина того или иного влияния можно с достаточной точност ью установить, поскольку в естественной обстановке влияние отдельных ф акторов тесно взаимосвязано. Температура . Рост растений возможен в сра внительно широких температурных пределах. Растения ранневесенней флор ы растут при температуре даже несколько ниже 0 С. Есть растения, для которых верхняя темпера турная граница роста несколько превышает 50 С. для каждого вида растения, в зависимости от ег о особенностей и, главным образом, от географического происхождения, хар актерны определенные температурные границы, в которых возможно протек ание ростовых процессов. Различают три кардинальные температурные точ ки: минимальная температура, при которой р ост только начинается, оптимальная - наибо лее благоприятная для ростовых процессов, максимальная , при которой рост прекращается. С повышением температуры от минимальной до оптимальной скорость роста резко возрастает. Так, скор ость роста проростков гороха при повышении температуры от 0 до 10 С возрастает в 9 раз, от 10 до 20 С - в 2,5 раза, от 20 до 30 С - всего в 1,9 раза. Оп тимальные температуры могут быть неодинаковыми для роста разных орган ов одного и того же растения. Как правило, оптимальная температура для ро ста корневых систем ниже по сравнению с надземными органами. Для роста б оковых побегов оптимальная температура ниже по сравнению с ростом глав ного стебля. Установлено, что растения интенсивно растут в ночной период суток. Для роста многих растений благоприятной является сменная темпер атура в течение суток - днем повышенная, а ночью - пониженная. Это явление Ф. Вент назвал термопериодизмом. Явление термопериодизма хорошо проявляе тся на культуре томатов. Показано (Н. И. Якушкина), что пониженные ночные те мпературы ускоряют рост корневой системы и боковых побегов у растений. Т акое влияние может быть объяснено тем, что при понижении температуры бол ее активно работают ферменты, катализирующие распад крахмала на сахара . В листьях образуются растворимые транспортные формы углеводов, легко п ередвигающиеся к точкам роста корня и боковых побегов, благодаря чему их рост усиливается. Содержание воды . В процессе роста растени я особенно чувствительны к недостатку воды. Уменьшение содержания воды в почве приводит, естественно, и к уменьшению содержания ее в растении, а э то, в свою очередь, резко тормозит процессы роста. Снижается деление клет ок и особенно их рост растяжением. Наибольшая насыщенность водой требуе тся для процессов роста. Насыщенность клетки или ткани растений водой на зывают гидратурой , она выражается в проце нтах. Рост клеток идет лишь в том случае, если гидратура не падает ниже 95%. Д ля того чтобы поддержать такую гидратуру, точки роста надземных органов растений защищены смыкающимися листочками с хорошо развитой кутикулой . Точки роста корня не имеют подобной защиты и поэтому требуют повышенно й влажности почвы для своего роста. Свет . Растения используют свет двумя путя ми: первый, где свет служит источников энергии для синтеза органических веществ (фотосинтез); второй, где свет - сигнал или источник информации. Во втором случае энергия света может быть на несколько порядков ниже, чем в первом. Свет оказывает большое и разностороннее влияние на темпы и харак тер роста как отдельных органов, так и растительного организма в целом. П ри этом на разные стороны ростовых процессов влияние света проявляется неоднозначно. Так свет необходим для протекания процесса фотосинтеза, и , поэтому, накопление массы растения без света не идет. Вместе с тем, рост к леток растяжением может идти в темноте, более того, на свету этот процесс тормозится. Свет оказывает большое влияние на формообразовательные пр оцессы. Этиолированные проростки, выросшие в темноте, характеризуются р ядом анатомических и морфологических особенностей. В отсутствие света происходит упрощение анатомической структуры стебля. Слабо развиваютс я ткани центрального цилиндра, механические ткани. Вместе с тем, растяже ние клеток в темноте идет очень интенсивно. В результате образуются длин ные, вытянутые стебли. Листья редуцированы, у двудольных растений вместо листовой пластинки образуются лишь небольшие чешуйки. Этиолированные проростки имеют слегка желтоватый оттенок. По-видимому, более быстрое вытягивание стебля и корня этиолированных проростков вы работалось в процессе эволюции, так как в большинстве случаев прорастан ие семян в почве происходит в отсутствие света, и эти особенности, а также отсутствие листьев, облегчают проростку проникновение через слой почв ы. Возможно, что вытягивание стебля в отсутствие света является следстви ем отсутствия ингибиторов роста. В темноте образуются много гормонов ау ксинов. Нарушение соотношения ауксинов и ингибиторов вызывает несбалансированный рост . При выходе проростков на поверхность почвы происходят их внутренние и внешние изменения. В темно те у проростков двудольных растений гипокотиль изогнут, что защищает то чку роста в почве от повреждений. Под влиянием света этот изгиб ("крючок") в ыпрямляется. На свету рост стебля тормозится, рост листьев усиливается и они принимают обычную форму. Под влиянием света происходят анатомическ ие изменения стебля, дифференцируется эпидермис, появляются волоски, из меняется окраска - синтезируется хлорофилл. Эти изменения получили назв ание фотоморфогенеза . Говоря о воздействии света, необходимо остановиться на влиянии круглос уточного освещения на процессы роста. Опыты по выращиванию растений при свете электрических ламп (светокультура) показали, что рост многих расте ний при круглосуточном освещении идет значительно интенсивнее, особен но при правильном подборе качества света (тип ламп). Так, при выращивании с еянцев древесных культур (дуб, сосна) на непрерывном освещении темпы их р оста возрастают в 1,5 - 2 раза (В. М. Леман). Такие однолетние растения, как горох и фасоль, также характеризуются очень интенсивным ростом в условиях кру глосуточного освещения. Однако есть растения, на рост которых круглосут очное освещение оказывает отрицательное влияние. В некоторых случаях к руглосуточное освещение вызывает явления, сходные с теми, которые обычн о являются следствием недостатка света. Особенно вредное влияние кругл осуточного освещения проявляется при высокой ночной температуре . Снабжение кислородом . Процессы роста требуют затрат энер гии, источником которой служит процесс дыхания. В этой связи понятна нео бходимость кислорода. При снижении концентрации ниже 5% рост тормозится. Это происходит не только из-за нарушения энергетического баланса, но и в силу накопления продуктов анаэробного обмена (спирт, молочная кислота). Минеральное питание . Для нормального про текания ростовых процессов необходимо достаточное снабжение всеми нео бходимыми минеральными элементами. Особенно специфична роль снабжения растений азотом. Это связано не только с тем, что азот входит в состав бел ков и нуклеиновых кислот, но и с образованием двух основных групп гормон ов, регулирующих ростовые процессы (ауксины, цитокинины).
1Архитектура и строительство
2Астрономия, авиация, космонавтика
 
3Безопасность жизнедеятельности
4Биология
 
5Военная кафедра, гражданская оборона
 
6География, экономическая география
7Геология и геодезия
8Государственное регулирование и налоги
 
9Естествознание
 
10Журналистика
 
11Законодательство и право
12Адвокатура
13Административное право
14Арбитражное процессуальное право
15Банковское право
16Государство и право
17Гражданское право и процесс
18Жилищное право
19Законодательство зарубежных стран
20Земельное право
21Конституционное право
22Конституционное право зарубежных стран
23Международное право
24Муниципальное право
25Налоговое право
26Римское право
27Семейное право
28Таможенное право
29Трудовое право
30Уголовное право и процесс
31Финансовое право
32Хозяйственное право
33Экологическое право
34Юриспруденция
 
35Иностранные языки
36Информатика, информационные технологии
37Базы данных
38Компьютерные сети
39Программирование
40Искусство и культура
41Краеведение
42Культурология
43Музыка
44История
45Биографии
46Историческая личность
47Литература
 
48Маркетинг и реклама
49Математика
50Медицина и здоровье
51Менеджмент
52Антикризисное управление
53Делопроизводство и документооборот
54Логистика
 
55Педагогика
56Политология
57Правоохранительные органы
58Криминалистика и криминология
59Прочее
60Психология
61Юридическая психология
 
62Радиоэлектроника
63Религия
 
64Сельское хозяйство и землепользование
65Социология
66Страхование
 
67Технологии
68Материаловедение
69Машиностроение
70Металлургия
71Транспорт
72Туризм
 
73Физика
74Физкультура и спорт
75Философия
 
76Химия
 
77Экология, охрана природы
78Экономика и финансы
79Анализ хозяйственной деятельности
80Банковское дело и кредитование
81Биржевое дело
82Бухгалтерский учет и аудит
83История экономических учений
84Международные отношения
85Предпринимательство, бизнес, микроэкономика
86Финансы
87Ценные бумаги и фондовый рынок
88Экономика предприятия
89Экономико-математическое моделирование
90Экономическая теория

 Анекдоты - это почти как рефераты, только короткие и смешные Следующий
Нежелание быть хищником не освобождает от участия в пищевой цепочке...
Anekdot.ru

Узнайте стоимость курсовой, диплома, реферата на заказ.

Обратите внимание, диплом по сельскому хозяйству и землепользованию "Антибиотики в сельском хозяйстве", также как и все другие рефераты, курсовые, дипломные и другие работы вы можете скачать бесплатно.

Смотрите также:


Банк рефератов - РефератБанк.ру
© РефератБанк, 2002 - 2016
Рейтинг@Mail.ru